外周血细胞形态变化与新诊断多发性骨髓瘤患者ISS分期的相关性及临床意义.pdf

外周血细胞形态变化与新诊断多发性骨髓瘤患者I S S分期的相关性及临床意义姬曼曼 陈淑霞商丘市第一人民医院血液内科 河南商丘 4 7 6 0 0 0 摘 要 目的 探讨外周血细胞形态学检查在新诊断多发性骨髓瘤患者中的应用价值及临床意义,以期为临床早期评估病情、预后提供参考。方法 选取2 0 1 9年1 0月2 0 2 2年4月商丘市第一人民医院收治的8 8例新诊断多发性骨髓瘤患者作为研究对象,入院后均行外周血细胞形态学检查,比较不同国际分期系统分期(I S S)的患者白细胞计数(WB C)、中性粒细胞绝对计数(AN C)、淋巴细胞绝对计数(A L C)、诱导T细胞/抑制T细胞(C D 4+/C D 8+)及免疫功能指标T h 1/T h 2、淋巴细胞银染核仁区(A g NO R s)、转化生长因子(T G F-),分析外周血细胞形态学指标与I S S分期、免疫功能指标的相关性,随访6个月后,根据复发情况评估预后,比较不同预后患者入院1个月后外周血细胞形态学指标,分析其对多发性骨髓瘤预后预测价值。结果 入院时WB C、AN C、T G F-比较:期期期,入院时A L C、C D 4+/C D 8+、T h 1/T h 2、A g NO R s比较:期期期,差异均有统计学意义(P0.0 5);入院时WB C、AN C与I S S分期、血清T G F-呈正相关,与T h 1/T h 2、A g NO R s呈负相关;A L C、C D 4+/C D 8+与I S S分期、血清T G F-呈负相关,与T h 1/T h 2、A g NO R s呈正相关(P0.0 5);与预后良好患者比较,预后不良患者入院1个月时WB C、AN C较高,A L C、C D 4+/C D 8+较低,差异有统计学意义(P I I.I.,A L C,C D 4+/C D 8+,T h 1/T h 2,A g-NO R s a t a d m i s s i o n:s t a g e I I I.I I.s t a g e I,t h e d i f f e r e n c e s w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(P0.0 5);WB C,AN C a n d I S S s t a g e a n d s e r u m T G F-w e r e p o s i t i v e l y c o r r e l a t e d a t a d m i s s i o n,a n d n e g a-t i v e l y c o r r e l a t e d w i t h T h 1/T h 2 a n d A g NO R s.A L C,C D 4+/C D 8+w e r e n e g a t i v e l y c o r r e l a t e d w i t h I S S s t a g e a n d s e r u m T G F-,a n d p o s i t i v e l y c o r r e l a t e d w i t h T h 1/T h 2 a n d A g NO R s(P0.0 5);c o m-p a r e d w i t h p a t i e n t s w i t h g o o d p r o g n o s i s,WB C a n d AN C w e r e h i g h e r a n d A L C a n d C D 4+/C D 8+w e r e l o w e r,t h e d i f f e r e n c e w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(P1个月;可接受本研究检查方案;患者及家属知晓本研究。并签订知情同意书。排除标准:合并其他恶性肿瘤者;合并原发性、继发性血小板减少症者;入院前1个月存在放化疗372华北理工大学学报(医学版)2 0 2 3年7月第2 5卷第4期J o u r n a l o f N o r t h C h i n a U n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y(H e a l t h S c i e n c e s E d i t i o n),J u l.2 0 2 3,V o l.2 5,N o.4史者;合并心、肺、肝、肾等重大脏器功能障碍者;合并全身性感染疾病、自身免疫性疾病者;合并精神异常或无法配合本研究者。1.3 方法 1.3.1 生化指标测定 分别于患者入院时、入院1个月后采集外周静脉血3 m L,3 7,离心1 0 m i n,3 5 0 0 r/m i n(r=8 c m),分离血清、血浆于-2 0冰箱保存待测。采用日本日立7 6 0型全自动生化分析仪测定WB C、中性粒细胞绝对计数(AN C)、淋巴细胞绝对计数(A L C)、诱导T细胞/抑 制T细胞(C D 4+/C D 8+)、T h 1/T h 2;分离外周血单个核细胞,将其银染,经K L分析 系 统 计 算 淋 巴 细 胞 银 染 核 仁 区(A g-NO R s);采用酶联免疫吸附法测定转化生长因子(T G F-)水平,仪器选用HE D-S Y 9 6 S型酶标仪,试剂盒购于武汉生源科技公司。所有操作均严格按照仪器及试剂盒相关说明进行。1.3.2 分组方法 根据入院时I S S分期进行分组,期:血清白蛋白3 5 g/L,血清2微球蛋白3.5 0 m g/L;期:不符合期和期的所有患者;期:血清2微球蛋白5.5 0 m g/L。1.3.3 预后评估 患者症状缓解后出院,出院后每隔1个月入院复查一次,检查患者骨髓细胞形态学、外周血细胞形态。根据是否发生复发、转移评估预后,其中发生复发、转移评估为预后不良,未发生复发转移评估为预后良好。复发:经检查发现存在贫血,骨髓检查发现异常的浆细胞增生,I g G、I g M、I g A等免疫球蛋白异常,存在大量蛋白尿,血清尿素氮、肌酐升高。1.4 统计学方法 采用S P S S 2 3.0软件对不同类型数据进行相关处理分析。经K-S检验确认具备方差齐性且符合正态分布的计量资料以(xs)表示,两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较以单因素方差分析,两两比较以L S D-t检验;采用P e a r s o n/S p e a r m a n相关系数模型分析外周血细胞形态学检查指标与I S S分期、免疫 功 能 相 关 性,采 用 受 试 者 工 作 特 征(RO C)曲线分析入院1个月后外周血细胞形态学检查指标对预后的预测价值,获取曲线下面积(AU C)、置信区间、敏感度、特异度,默认双侧检验,P期期;A L C、C D 4+/C D 8+比较:期期期,差异均有统计学意义(P0.0 5)。见表1。表1 不同I S S分期患者入院时外周血细胞形态学检查比较(xs)组别nWB C(1 09/L)AN C(1 09/L)A L C(1 09/L)C D 4+/C D 8+期2 94.2 80.8 42.1 50.5 22.2 50.4 21.4 20.2 5期3 35.1 81.1 23.8 40.8 71.7 50.3 61.2 30.1 9期2 66.9 31.4 35.1 51.0 91.2 80.2 51.0 80.1 3F值3 7.8 3 78 6.3 2 55 1.6 2 12 0.4 6 6P值 0.0 0 10.0 0 10.0 0 10.0 0 12.2 不同I S S分期患者入院时免疫功能指标比较 入院时T h 1/T h 2、A g NO R s比较:期期期期,差异均有统计学意义(P0.0 5)。见表2。表2 不同I S S分期患者入院时免疫功能指标比较(xs)组别nT h 1/T h 2A g NO R s(I S%)T G F-(n g/m L)期2 91.3 90.3 24.4 20.5 31.0 60.3 1期3 31.2 40.2 54.1 50.4 21.2 50.3 8期2 61.1 20.1 83.8 50.3 61.4 10.4 2F值7.5 5 91 1.3 0 16.1 3 4P值0.0 0 10.0 0 10.0 0 3472华北理工大学学报(医学版)2 0 2 3年7月第2 5卷第4期J o u r n a l o f N o r t h C h i n a U n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y(H e a l t h S c i e n c e s E d i t i o n),J u l.2 0 2 3,V o l.2 5,N o.42.3 I S S分期与各免疫功能指标相关性分析 经相关性分析发现,入院时WB C、AN C与I S S分期、血清T G F-呈正相关,与T h 1/T h 2、A g NO R s呈 负 相 关;A L C、C D 4+/C D 8+与I S S分期、血清T G F-呈负相关,与T h 1/T h 2、A g NO R s呈正相关(P0.0 5)。见表3。表3 I S S分期与各免疫功能指标相关性分析指标WB Cr值P值AN Cr值P值A L Cr值P值C D 4+/C D 8+r值P值I S S分期0.7 5 80.0 0 10.8 0 30.0 0 1-0.7 2 80.0 0 1-0.7 5 30.0 0 1T h 1/T h 2-0.6 9 30.0 0 1-0.7 5 30.0 0 10.7 4 20.0 0 10.7 6 30.0 0 1A g NOR s-0.7 3 50.0 0 1-0.7 1 70.0 0 10.6 8 40.0 0 10.7 4 90.0 0 1T G F-0.7 8 20.0 0 10.7 9 30.0 0 1-0.8 2 10.0 0 1-0.6 9 50.0 0 12.4 不同预后患者入院1个月后外周血细胞形态学指标比较 随访6个月后,8 8例患者中复发/转移1 5例。与预后良好患者比较,预后不良 患 者 入 院1个 月 时WB C、AN C较 高,A L C、C D 4+/C D 8+较低,差异有统计学意义(P0.0 5)。见表4。表4 不同预后患者入院1个月后外周血细胞形态学检查比较(xs)组别nWB C(1 09/L)AN C(1 09/L)A L C(1 09/L)C D 4+/C D 8+预后不良1 55.8 31.2 74.7 21.0 31.4 50.2 91.1 50.1 8预后良好7 33.8 50.7 31.8 60.4 82.7 20.5 81.6 30.3 7t值8.2 9 71 6.6 8 58.2 4 44.8 9 0P值0.0 0 10.0 0 10.0 0 14.5 83.1 40.0 0 18 0.0 09 4.5 2A L C0.8 5 60.8 1 90.8 9 52.0 70.0 0 18 6.6 79 7.2 6C D 4+/C D 8+0.8 3 60.7 9 30.8 8 21.4 20.0 0 18 0.0 09 4.5 2联合0.9 2 70.8 9 20.9 6 3-0.0 0 19 3.3 39 7.2 63 讨论 多发性骨髓瘤为一种以恶性浆细胞增生为特征的恶性肿瘤,可伴随骨痛、贫血、肾功能障碍等症状,且随浆细胞增生程度不同,可引起机体各部位脏器功能受损6。因此,尽早评估多发性骨髓瘤病情、预测预后,制定相应干预方案至关重要。外周血细胞形态学检查近年来已逐渐应用于多发性骨髓瘤评估中,其通过显微镜或自动化仪器对外周血细胞形态及数量进行测量,从而对疾病病情进行评估7。本研究经外周血细胞形态学检查结果发现,不同I S S分期多发性骨髓瘤患者WB C、AN C、A L C、C D 4+/C D 8+比较存在差异,且具有显著相关性,据此可推测上述指标与多发性骨髓瘤病情紧密联系。有研究显示,外周血A L C为肿瘤预后评估的重要免疫标志物之一,其表达随病情进展而波动,与肿瘤患者总体生存期存在紧密联系,且高水平A L C为多发性骨髓瘤患者自体干细胞移植前延长总体生存期的重要影响因素8。国内学者研究发现多发性骨髓瘤患者C D 4+细胞表达受抑制,而C D 8+、淋巴细胞多表达正常9,因此C D 4+/C D 8+比值多呈下降趋势,C D 4+、C D 8+在维持自身成分免疫耐受时,可阻止机体对自身同源肿瘤细胞免疫,致使肿瘤免疫抑制,随肿瘤发展,C D 4+表达受抑制程度提高,572华北理工大学学报(医学版)2 0 2 3年7月第2 5卷第4期J o u r n a l o f N o r t h C h i n a U n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y(H e a l t h S c i e n c e s E d i t i o n),J u l.2 0 2 3,V o l.2 5,N o.4因此C D 4+/C D 8+比值与I S S分期存在显著相关性。AN C可反映机体受感染情况,多发性骨髓瘤患者出现感染时机体白细胞可显著变化,由于骨髓内浆细胞挤压白细胞,致使外周白细胞减少,如伴随细菌性感染,机体白细胞、中性粒细胞百分比可显著升高,WB C、AN C随之升高1 0-1 1。近年来随分子生物学发展,临床发现多发性骨髓瘤免疫功能异常与病情密切相关,其中T h 1、T h 2在细胞免疫及体液免疫中发挥重要作用,其比值可反映多发性骨髓瘤患者抗肿瘤免疫状态。A g NOR s为R NA聚合酶亚单位之一,可反映r D NA转录效率,能体现淋巴细胞活性及机体细胞免疫状态;而T G F-为肿瘤细胞及T r e g细胞共同分泌的免疫抑制因子,可反映肿瘤对免疫应答的抑制程度,随肿瘤进展,机体免疫功能发生显著变化,上述指标随之改变1 2-1 4。本研究结果发现,不同I S S分期患者入院时T h 1/T h 2、A g NO R s、T G F-比较存在显著差异,且与外周血细胞形态学检查指标具有显著相关性,进一步说明外周血细胞形态学检查对于多发性骨髓瘤病情、免疫状态的评估价值。本研究经随访6个月后发现,不同预后患者入院1个月后外周血细胞形态学检查指标存在差异,进一步行R O C分析显示,WB C、AN C、A L C、C D 4+/C D 8+各指标对多发性骨髓瘤预后不良联合预测AU C为0.9 2 7,具有较高预测价值。综上所述,外周血细胞形态学检查对于多发性骨髓瘤病情、免疫功能具有一定评估价值,可为临床制定干预方案、改善预后提供依据。参考文献1C o w a n A J,G r e e n D J,Kw o k M,e t a l.D i a g n o s i s a n d M a n a g e m e n t o f M u l t i p l e M y e l o m a:A R e-v i e wJ.J AMA,2 0 2 2,3 2 7(5):4 6 4-4 7 7.2蒋潇婷,崔玉山,房佰俊.病态造血在新诊断的多发性骨髓瘤患者中的生物学价值及临床意义J.中华医学杂志,2 0 2 2,1 0 2(3 6):2 8 2 7.3郭孟怡,高攀科,李敬东.多发性骨髓瘤患者临床特征、F I S H检测结果与疗效相关性的临床分析J.现代肿瘤医学,2 0 2 2,3 0(2):3 0 7-3 1 1.4F e r n n d e z d e L a r r e a C,K y l e R,R o s io l L,e t a l.P r i m a r y p l a s m a c e l l l e u k e m i a:c o n s e n s u s d e f i n i t i o n b y t h e I n t e r n a t i o n a l M y e l o m a W o r k-i n g G r o u p a c c o r d i n g t o p e r i p h e r a l b l o o d p l a s m a c e l l p e r c e n t a g eJ.B l o o d C a n c e r J,2 0 2 1,1 1(1 2):1 9 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