生长抑制因子4、缺氧诱导因子-1α在宫颈病变组织中的表达及与HR-HPV感染的关系研究.pdf

哈尔滨医药 2023 年 6 月第 43 卷第 3 期宫颈癌（cervical cancer）是女性常见恶性肿瘤，高危人类乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染是其重要因素，但并非绝对伴有高危型HPV1。缺氧诱导因子-1琢（hypoxia-inducible factor，HIF-1琢）为在缺氧诱导下可调节多种肿瘤相关增殖和转移靶基因的异二聚体转录因子，HIF-1琢 在宫颈癌中也有表达2。生长抑制因子 4（inhibitor ofgrowth family member，ING4）基因作为 ING 家族新成员，为域型肿瘤抑制因子3。本文主要探究 ING4与 HIF-1琢 在 HR-HPV 感染的宫颈组织中表达水平及其意义。1资料与方法1.1一般资料：选取 2018 年 9 月至 2020 年 2 月我院行宫颈活检、宫颈锥切术、全子宫切除术的宫颈组织标本，其中宫颈癌组织 25 份（宫颈癌组）、宫颈上皮内瘤变组织标本 50 份（CIN1 组 28 例、CIN2-3 组 22 例），所有标本经 HE 染色后，由至少2 名病理医师检查证实。纳入标准：淤病理证实为CIN 或宫颈癌，FIGO 分期玉耀芋期；于术前未接受放、化疗；盂临床与病理资料完整。排除标准：淤合并有其他妇科恶性肿瘤；于术前 3 个月内接受过其生长抑制因子 4、缺氧诱导因子-1琢 在宫颈病变组织中的表达及与HR-HPV 感染的关系研究胡立娟（郑州市第一人民医院，河南 郑州 450001）摘要目的分析生长抑制因子 4（ING4）、缺氧诱导因子-1琢（HIF-1琢）在宫颈病变组织中的表达及与高危型 HPV（HR-HPV）感染的关系。方法选取宫颈癌组织 25 份（宫颈癌组）、宫颈上皮内瘤变组织标本 50 份（CIN1 组、CIN2-3 组）、正常宫颈组织标本 20 份（正常组），术前检测 HR-HPV，分析各组 ING4、HIF-1琢 蛋白表达水平及其相关性、与病理参数关系。结果宫颈癌组、CIN1 组、CIN2-3 组 HR-HPV 感染率高于正常组（P0.05）；正常组 ING4 阳性率最高，而 HIF-1琢 阳性率最低，宫颈癌组 HIF-1琢 阳性率最高（P0.05）；感染 HR-HPV 的组织中，宫颈癌组 ING4 阳性率最低（P0.05），而 HIF-1琢 阳性率最高（P0.05）；在感染 HR-HPV 的宫颈癌及 CIN2-3 组织中，ING4 与 HIF-1琢 水平呈负相关（P0.05）；年龄、淋巴结转移、脉管浸润、肌层浸润深度为感染 HR-HPV 的宫颈癌患者 ING4 阴性且 HIF-1琢 阳性的独立危险因素（P0.05）。结论HR-HPV 感染宫颈病变组织中 ING4 呈低表达，而 HIF-1琢 呈高表达，从而抑制血管内皮细胞增殖、迁移，延缓宫颈病变进展。关键词ING4；HIF-1琢；宫颈病变；高危型 HPV 感染中图分类号R711.74文献标识码A学科分类代码：32067文章编码：1001-8131（2023）03-0024-03DOI：10.3969/j.issn.1001-8131.2023.03.009The Expression of ING4 and Hypoxia-inducibleFactor-1 琢 in CervicalLesions and Its Relationship with HR-HPV InfectionHu Lijuan（Laboratory Department，Zhengzhou First Peoples Hospital，Zhengzhou 450001，China）AbstractObjectiveTo analyze the expression of growth family member 4（ING4）and hypoxia-inducible factor-1琢（HIF-1琢）in cervical lesions，and its relationship with high-risk HPV（HR-HPV）infection.Methods25 cervical cancertissuesamples（cervical cancer group），50 cervical intraepithelial neoplasia（CIN）tissue samples（CIN1 group，CIN2-3 group）and20 normal cervical tissue samples（normal group）were collected.HR-HPV was detected before surgery.The protein expressionlevels and correlation of ING4 and HIF-1琢 in each group，and their relationship with pathological parameters were analyzed.ResultsThe HR-HPV infection rate was higher incervical cancer group，CIN1 group and CIN2-3 group than in the normalgroup（P0.05）.The ING4 positive rate was the highest，and the HIF-1琢 positive rate was the lowest in the normal group.TheHIF-1琢 positive rate was the highest in the cervical cancer group（P0.05）.In HR-HPV infected tissues，the ING4 positiverate was the lowest，and the HIF-1琢 positive rate was the highest in the cervical cancer group（P0.05）.There was a negativecorrelation between ING4 and HIF-1琢 levels in HR-HPV infected cervical cancer and CIN2-3 tissues（P0.05）.Age，lymphnode metastasis，vascular invasion，and the depth of myometrial invasion were independent risk factors for ING4 negative andHIF-1琢 positive inpatients infected with HR-HPV（P0.05）.ConclusionThe low expression of ING4 and high expression ofHIF-1a in HR-HPV infected cervical lesions inhibit the proliferation and migration of vascular endothelial cells，thereby de原laying the progression of cervical lesions.Key wordsING4；HIF-1琢；Cervical lesion；High-risk HPV infection基金项目：河南省医学科技攻关计划项目（LHGJ20210743）24哈尔滨医药 2023 年 6 月第 43 卷第 3 期高危 HPV 亚型（14 种），于仪器检测并判读结果。1.2.2ING4、HIF-1琢 表达水平检测：应用免疫组化SP 法测定 ING4、HIF-1琢 蛋白表达。标本以 10%福尔马林固定，石蜡包埋，标记。4滋m 厚连续切片，切片脱蜡，修复抗原，DAB 显色，苏木精复染，中性树脂胶封片，镜下观察。1.2.3结果判读：HR-HPV 结果逸1.00 为阳性，1000）。免疫组化结果：采用半定量评分系统评估染色效果4，9 分为+。1.3观察指标：比较不同宫颈病变组织 HR-HPV感染率，并分析其相关性；分析 ING4 阴性且 HIF-1琢阳性与病理参数的关系。1.4统计处理：以 SPSS23.0 软件对数据进行统计学，计数资料以率（%）表示，行 字2检验、连续校正 字2检验、Wilcoxon 秩和检验，计量资料应用（x依s）形式表示，采用单因素方差分析、LSD-t 检验，Spearman法分析相关性，Logistics 回归法分析独立影响因素，以 P0.05 为差异有统计学意义。2结果2.1不同宫颈病变组织 HR-HPV 感染率比较：不同宫颈病变组织 HR-HPV 感染率有差异（字2=46.367，P0.001），其中宫颈癌组、CIN1 组、CIN2-3组 HR-HPV 感染率 96.00%（24/25）、71.43%（20/28）、68.18%（15/22）高于正常组（0）（P0.05）。2.2不同宫颈病变组织 ING4、HIF-1琢 表达水平比较：不同宫颈病变组织 ING4、HIF-1琢 表达水平差异有统计学意义（P0.05）；其中正常组 ING4 阳性率最高，而 HIF-1琢 阳性率最低，宫颈癌组 HIF-1琢 阳性率最高（P0.05）。见表 2。2.3感染 HR-HPV 的宫颈病变组织 ING4、HIF-1琢 表达水平比较：在感染 HR-HPV 的宫颈病变组织中，宫颈癌组 ING4 阳性率低于 CIN1 组、CIN2-3 组（P0.05），而 HIF-1琢 阳性率高于 CIN1 组、CIN2-3组（P0.05）。见表 3、图 1、图 2。表 3感染 HR-HPV 的宫颈病变组织 ING4、HIF-1琢表达水平比较注：与宫颈癌组比较，*P0.052.4ING4、HIF-1琢 表达水平的相关性：在感染HR-HPV 的宫颈癌及 CIN2-3 组织中，ING4、HIF-1琢 表达水平呈负相关（r=-0.436、-0.387，P0.05）。2.5ING4、HIF-1琢 与病理参数关系：单因素及多因素分析发现，年龄、是否有淋巴结转移、脉管浸润、肌层浸润深度是感染 HR-HPV 的宫颈癌患者ING4阴性且 HIF-1琢 阳性的独立危险因素（P0.05），见表1。1.2方法1.2.1HR-HPV 检测：应用罗氏公司提供的COBAS4800 型 HPV 全自动样品制备与 PCR 扩增法检测表 1四组一般资料比较组别ING4 阳性率HIF-1琢 阳性率宫颈癌组（n=25）11（44.00）*21（84.00）*字213.13525.763P约0.001约0.001CIN1 组（n=28）17（60.71）*11（39.29）*银CIN2-3 组（n=22）9（40.91）*12（54.55）*银正常组（n=20）18（90.00）2（10.00）表 2不同宫颈病变组织 ING4、HIF-1琢表达水平比较n（%）注：与正常组比较，*P0.05；与宫颈癌组比较，银P0.05感染 HR-HPV 的宫颈病变组织ING4 阳性率HIF-1琢 阳性率宫颈癌组（n=24）3（12.50）15（62.50）字26.3727.994P0.0410.018CIN1 组（n=20）8（40.00）*5（25.00）*CIN2-3 组（n=15）7（46.67）*4（26.67）*25哈尔滨医药 2023 年 6 月第 43 卷第 3 期因素茁SEWald字2ORP95%CI年龄0.432 0.1855.4530.020 1.540 1.072耀2.214脉管浸润0.265 0.1175.1300.024 1.303 1.036耀1.639肌层浸润深度0.342 0.1257.4860.006 1.408 1.102耀1.799FIGO 分期0.289 0.1633.1440.077 1.335 0.970耀1.838是否有淋巴结转移 0.359 0.1347.1780.008 1.432 1.101耀1.862HIF-1琢 与 HR-HPV 感染引起的宫颈病变有密切关系，与赵秀兰的研究结果相似。肿瘤细胞内有氧环境失去平衡，HIF-1琢 正是缺氧状态下 HIF-1 主要表达亚基，与肿瘤组织血管的生成及缺氧时能量代谢有密切关系3，因此 HIF-1琢 与宫颈病变尤其是 HR-HPV 感染引起的宫颈病变有重要关系。ING4 可通过 p53 乙酰化途径对肿瘤细胞周期产生影响，促进细胞凋亡。本研究正常组 ING4 阳性率最高，感染 HR-HPV 的宫颈病变组织中宫颈癌组 ING4 阳性率最低，这与周莹等4的报道结果相近，表明 ING4 也与 HR-HPV 引起的宫颈病变有一定关联。有学者推测 ING4 在肿瘤中低表达或功能丢失可使 FasL 高表达，有利于黑色素瘤细胞逃脱免疫监视，使肿瘤免受 T 淋巴细胞攻击。感染 HR-HPV 的宫颈癌及 CIN2-3 组织中，ING4 与 HIF-1琢 表达水平呈负相关，与张金山5的结果不一致，可能与标本选取及疾病分期、样本量较少等因素有关。低氧环境中 HIF-1琢 能活化下游与葡萄糖代谢和细胞增殖有关的 100 多个基因转录6。本研究结果支持 ING4 可通过抑制 HIF-1琢 表达而抑制肿瘤血管新生、增殖及迁移，参与宫颈组织 HR-HPV 感染及病变发展，原因为既往也有学者进行相关研究。本次也发现年龄、是否有淋巴结转移、脉管浸润、肌层浸润深度是感染 HR-HPV 的宫颈癌患者 ING4 阴性且 HIF-1琢 阳性独立危险因素，与早期报道相近7，因此 ING4、HIF-琢 表达与HR-HPV 感染的宫颈癌患者病理参数有关。综上所述，HR-HPV 感染的宫颈病变组织中，ING4 呈低表达，而 HIF-1琢 高表达，两者可能参与宫颈病变进展，关于其机制后期可进一步深入研究。参考文献1 应申鹏，曹学全，刘艳梅，等.缺氧诱导因子-1琢 与缺氧诱导因子-2琢蛋白和mRNA在宫颈癌中的表达及其临床意义 J.中国临床药理学杂志，2017，33（19）：1893-1896.2 夏中友，张宗平，李云祥，等.ING4 和 CD34 蛋白在人前列腺癌组织中的表达及其相关性研究 J.中国男科学杂志，2017，31（2）：8-13.3 王芳，尹立勇，娄娟，等.HIF-1琢 及其靶基因在宫颈癌中的表达 J.河北医科大学学报，2017，38（7）：764-769.4 周莹.ING4、PHB 与 Ki-67 在宫颈病变组织中的表达与HR-HPV 感染的相关性研究 D.新疆：石河子大学，2017.5张金山，朱宗恒，王钢胜，等.乳腺癌组织中 ING4、HIF-1琢 和 HIF-2琢 表达及与肿瘤微血管新生的关系 J.安徽医药，2017，21（5）：847-851.6 李悦，杨向红.ING4对缺氧状态下血管内皮细胞增殖、迁移及 HIF-1琢表达的抑制作用 J .现代肿瘤医学，2016，24（22）：3551-3556.7 王鹏，尹晓东，王德明，等.ING4 和 HIF-1琢 在口腔鳞癌中的表达及临床意义 J.现代生物医学进展，2017，17（28）：5466-5470.收稿日期：2022-07-08图 1ING4 于不同宫颈组织中表达情况A 为正常宫颈组织（SP 法，伊100）、B 为 CIN1；C 为 CIN2-3；D为宫颈癌组织（SP 法，伊400）ABCDABCD图 2HIF-1琢 在不同宫颈组织中的表达表 4ING4、HIF-1琢 与病理参数关系26