DB15T 3256-2023胡萝卜抗根腐病水平室内鉴定技术规程.pdf

ICS 65.020.01 CCS B 01 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 32562023 胡萝卜抗根腐病水平室内鉴定技术规程 Code for laboratory identification of carrot root rot disease 2023-12-15 发布 2024-01-15 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC 25）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古农业大学。本文件主要起草人：韩凤英、张艳萍、王永、扈顺、高婧、付崇毅、孙平平。胡萝卜抗根腐病水平室内鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了室内条件下胡萝卜抗根腐病鉴定材料的选择与鉴定方法。本文件适用于胡萝卜品种（系）在室内条件下对根腐病抗性水平的鉴定。2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。胡萝卜根腐病 carrot root rot disease 由茄病镰刀菌(Fusarium solani)或尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）侵染引起胡萝卜根部腐烂。抗性评价 evaluation of resistance levels 通过事宜技术方法判别植物对特定病害的反应程度和抵抗水平。人工接种 artificial inoculation 在事宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程。4 鉴定材料准备 对照选择 选用中抗以上抗病材料。选用高感材料。病原菌 病原菌为茄病镰刀菌(Fusarium solani)或尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）。培养基 选用PDA培养基。5 鉴定方法 PDA 培养基制备 将马铃薯去皮切成2 cm3 cm的小块，取200 g加入1000 mL水，在锅内煮20 min30 min，至马铃薯软而不烂时，用2层纱布过滤，滤液加入琼脂粉15 g18 g，加热搅拌至融化，再加葡萄糖20 g搅拌溶解，然后用蒸馏水定容至1000 mL，分装到三角瓶内，121 高压湿热灭菌20 min，在无菌操作台上分别倒入培养皿中，冷却至室温备用。病原菌活化 将保存的胡萝卜根腐病菌菌丝体接种在PDA平板上，置于25 培养箱中培养。待菌落形成后在菌落边缘打取直径为4 mm菌丝块接于新的PDA培养基中央进行活化培养。待菌落长到培养皿直径的80%时，用打孔器在菌落边缘打取菌丝块（直径4 mm），用于接种。人工接菌方法 选取健康的胡萝卜肉质根,先用流水冲洗干净，再用75%的酒精进行表面消毒10 min，然后用无菌蒸馏水冲洗3遍，晾干。无菌的盒中放入灭菌滤纸，每个盒中铺有2层滤纸，将胡萝卜肉质根放入盒中，然后喷适量的无菌蒸馏水保湿。把在PDA上培养的菌落边缘切取的菌丝块分别倒置于胡萝卜肉质根上，每个接种1个菌丝块，同时以接种PDA培养基圆片为空白对照，每个品种（系）3次重复。然后将其置于25 恒温培养箱中黑暗培养，每天观察其发病情况和症状，并拍照记录。调查和抗性评价 接种的胡萝卜肉质根培养48 h后，用十字交叉法测量病斑直径（同一病斑选择3个不同角度测量3次，取平均数），根据表1评价胡萝卜品种（系）的抗病性。表1 胡萝卜对根腐病抗性分级标准 抗病型 病斑直径 mm 免疫 I 0 高抗 HR 05 中抗 MR 510 中感 MS 1020 高感 HS 20 鉴定记载 胡萝卜抗根腐病鉴定结果记载表格见表 2。表2 胡萝卜根腐病室内抗性鉴定结果记载内容 编号 胡萝卜品种（系）来源 抗性评价 备注 1.采集时间：2.接种时间：3.调查日期：鉴定技术负责人（签字）：