DB5404_T 0003-2023林芝灵芝标准综合体+第1部分：菌种基本要求.pdf

ICS65.020.99B395404林芝市地方标准DB5404/T 00032023林芝灵芝标准综合体第 1 部分：菌种基本要求2022-12-03 发布2023-01-03 实施林芝市市场监督管理局发 布DB5404/T 00032023I目次前言.II1范围.12规范性引用文件.13术语和定义.14子实体形态特征.25质量要求.25.1感官要求.25.2微生物学要求.45.3菌丝生长速度.46检验方法.46.1感官检验.46.2微生物学检验.46.3菌丝生长速度检验.56.4一级种农艺性状和商品性状.56.5留样.57检验规则.57.1抽样.57.2判定规则.68标签、标志、包装、运输、贮存.68.1标签、标志.68.2包装.68.3运输.78.4贮存.7DB5404/T 00032023II前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件是林芝灵芝标准综合体的第1部分，林芝灵芝标准综合体已经发布了以下部分：第1部分：菌种基本要求；第2部分：菌种生产技术规程；第3部分：菌袋制作规程；第4部分：栽培技术规程；第5部分：采收存储技术规范；第6部分：分级规范。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由林芝市质量协会提出。本文件由林芝市市场监督管理局归口。本文件起草单位：西藏自治区产品质量监督检验所、林芝市藏医院、西藏米林红太阳藏药材科技开发有限公司、林芝市质量协会。本文件主要起草人：洛桑卓玛、何天文、旦巴旺久、罗笑娟、龙莎莎、辛双阳、次仁卓嘎、邵强、措姆、赵明。DB5404/T 000320231林芝灵芝标准综合体 第 1 部分：菌种基本要求1范围本文件规定了林芝灵芝（白肉灵芝）Ganoderma leucocontextum(Leyss.Ex Fr.)Karst品种、菌种质量和菌种检验。本文件适用于林芝市灵芝的固体菌种及检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 191包装储运图示标志GB/T 12728食用菌术语GB 4789.28 食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求NY/T 528食用菌菌种生产技术规程3术语和定义GB/T 12728 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.13.2林芝灵芝在林芝灵芝地理标志产品保护范围内野生的或按本文件种植、采收和加工的具有独特品质的多孔菌科灵芝属白肉灵芝（Ganoderma leucocontextum）的子实体。3.33.4地理标志产品保护范围林芝灵芝产地范围为西藏自治区林芝市巴宜区、米林县、工布江达县、波密县、察隅县、朗县、墨脱县共7个县（区）现辖行政区域。3.53.6菌种生长在适宜基质上具结实性的菌丝培养物，包括一级种、二级种和三级种。3.73.8一级种经各种方法先育得到的具有结实性菌丝体纯培养物及其继代培养物称一级种，也称母种。3.93.10二级种由一级种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物称二级种，也称原种。3.113.12三级种DB5404/T 000320232由二级种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物，栽培种只能用于栽培，不可再次扩大繁殖菌种，称三级种，也称栽培种。3.133.14拮抗现象具有不同遗传基因的菌落间产生不生长区带或形成不同形式线状边缘的现象。3.153.16角变因菌丝体局部变异或感染杂菌而导致菌丝变细、生长缓慢、菌丝体表面特征成角状异常的现象。3.173.18高温抑制线食用菌菌种在生产过程中受高温的不良影响，培养物出现的圈状发黄、发暗或菌丝变稀弱的现象。3.193.20生物学效率单位质量培养料的风干物质所培养产生出的子实体或菌丝体质量（鲜重），常用百分数表示。4子实体形态特征林芝灵芝菌柄较短，呈黑红色，有漆状光亮，菌柄内为白色海绵状，菌盖呈圆形或扇形状，表面红色或深红色，边缘色略淡，外围为白色，菌孔面呈白色至奶油色，菌肉为白色，担孢子呈椭圆体，具白肉灵芝固有的气味。5质量要求5.1感官要求5.1.1一级种（母种）应符合表1的规定。表 1母种感官要求项目要求容器完整，无损，无色透明棉塞或硅胶塞干燥、洁净、松紧适度，能满足透气和滤菌要求培养基灌入量试管总容积的五分之一至四分之一斜面长度顶端距棉塞或硅胶塞40 mm50 mm接种块大小（接种量）(3 mm5 mm)(3 mm5 mm)菌种外观菌丝生长量长满斜面菌丝体特征菌丝白色、浓密、短绒状，气生菌丝有但不茂盛。在接种块附近的菌丝有时呈浅黄色。菌丝体表面均匀、平展、无角变、无高温抑制线菌丝分泌物部分品种会产生少许浅黄色分泌物菌落边缘整齐杂菌菌落无DB5404/T 000320233项目要求斜面背面外观培养基不干缩，颜色均匀、无暗斑、无色素气味有林芝灵芝菌种特有清香味，无酸、臭、霉等异味5.1.2二级种应符合表2的规定。表 2原种感官要求项目要求容器完整，无损棉塞或无棉塞塑料盖干燥、洁净、松紧适度，能满足透气和滤菌要求培养基上表面距瓶（袋）棉塞或无棉塑料盖下部距离40 mm接种量（每支母种接原种数，接种物大小）4瓶（袋）6瓶（袋），(12 mm15 mm)菌种外观菌丝生长量长满培养料菌丝体特征菌丝白色、浓密、短绒状培养物表面菌丝体均匀、平展、无角变、无高温抑制线、均匀紧贴于物料颗粒表面。培养基及菌丝体不能与菌种瓶壁或塑料袋分离，紧贴瓶（袋）壁、无干缩。培养物表面分泌物一般情况下无，培养后期偶有透明淡黄色露珠状分泌物。杂菌菌落无拮抗现象无子实体原基无气味有林芝灵芝菌种特有清香味，无酸、臭、霉等异味5.1.3三级种应符合表3的规定。表 3栽培种感官要求项目要求容器完整，无损棉塞或无棉塞塑料盖干燥、洁净、松紧适度，满足透气和滤菌要求培养基上表面距瓶（袋）口的距离40 mm接种量（每瓶或袋原种接栽培种数）20瓶（袋）40瓶（袋）菌种外观菌丝生长量长满培养料菌丝体特征菌丝白色、浓密、短绒状不同部位菌丝体生长齐整，色泽一致，无角变，无高温抑制线培养基及菌丝体不能与菌种瓶壁或塑料袋分离，紧贴瓶（袋）壁、无干缩培养物表面分泌物一般情况下无，培养后期偶有透明淡黄色露珠状分泌物。杂菌菌落无拮抗现象无子实体原基培养后期在瓶（袋）口附近允许有小块原基出现DB5404/T 000320234气味有林芝灵芝菌种特有清香味，无酸、臭、霉等异味5.2微生物学要求应符合表4的规定。表 4母种微生物学要求项目要求菌丝生长状态浓密、丰满、旺健，长速正常、整齐，菌丝有较多锁状联合。杂菌无5.3菌丝生长速度5.3.1一级种在PDA(马铃薯葡萄糖琼脂)培养基上，在避光、适温（251）条件下，菌丝长速为（8.21.1）mm/d，菌丝长满斜面的时间为8 d10 d。5.3.2二级种在适宜培养基上、适宜培养容器里（以使用15 cm28 cm聚丙烯塑料菌种袋、装量300 g干料每袋为例），在避光、适温（251）条件下，菌丝长速为（8.00.8）mm/d，菌丝长满容器的时间为23 d30 d。5.3.3三级种在适宜培养基上、适宜培养容器里（以使用17 cm33 cm聚丙烯塑料菌种袋、装量400 g干料每袋为例），在避光、适温（251）条件下，菌丝长速为（6.70.8）mm/d，菌丝长满容器的时间为26 d40 d。6检验方法6.1感官检验按表5逐项进行。表 5感官要求检验方法检验项目检验方法检验项目检验方法容器肉眼观察接种量母种、原种肉眼观察、测量栽培种检查生产记录硅胶塞、无棉塑料盖肉眼观察培养基上表面距瓶（袋）口的距离肉眼观察一级种培养基灌入量肉眼观察菌种外观各项（杂菌菌落除外）肉眼观察一级种斜面长度测量杂菌菌落肉眼观察，必要时用5放大镜观察一级种斜面背面外观肉眼观察气味鼻嗅6.2微生物学检验DB5404/T 0003202356.2.1表 4 中菌丝生长状态用放大倍数不低于 400 倍的光学显微镜对培养物的水封片进行观察，每一检样应观察不少于 50 个视野。6.2.2细菌检验取少量疑有细菌污染的培养物或菌块，按无菌操作接种于GB 4789.28中规定的营养肉汤培养液中，36 38 避光震荡培养1天，观察培养液是否混浊。培养液混浊，为有细菌污染；培养液澄清，为无细菌污染。6.2.3霉菌检验取少量疑有霉菌污染的培养物或菌块，按无菌操作接种于PDA培养基中，25 28 避光培养3d4 d，出现白色以外色泽的菌落或非林芝灵芝菌丝形态菌落的，或出现异味者为霉菌污染物，必要时进行水封片镜检。6.3菌丝生长速度检验6.3.1一级种按培养基配方，在24 26 避光培养，计算长满试管所需天数（d）。6.3.2二级种和三级种按培养基配方，在24 26 避光培养，计算菌丝长满所需天数（d）。6.4一级种农艺性状和商品性状将被检一级种制成二级种、三级种。分三组，每组不少于100袋，共不少于300袋。与一级种在同一环境下，常规管理并按表6项目做好栽培记录，统计对比一级种与二级种、三级种的检验结果，以时间计的检验项目，被检一级种有一项较对照菌株推迟5 d以上（含5 d）者，判定为不合格；产量显著低于对照菌株者，为不合格；子实体外观形态与对照明显不同或畸形者，为不合格。表 6一级种栽培中农艺性状和商品形状检验记录检验项目检验结果检验项目检验结果一级种长满所需时间（d）原种长满所需时间（d）菌丝长满培养基料面所需时间（d）总生物学效率（%）第一潮出芝所需时间（d）色泽、质地第一潮出芝生物学效率（%）芝盖形状平均单产（g/袋）芝盖尺寸（mm）6.5留样各级菌种都要留样备查，留样的数量应每个批号菌种3支（瓶、袋），于避光、6 8 下储存，储存期一级种为3个月，二级种为2个月，三级种为1个月。7检验规则7.1抽样DB5404/T 000320236抽样应具有代表性。一级种按来源、品种、培养条件、接种时间分批编号，二级种、三级种按菌种来源、制种方法和接种时间分批编号。按批随机抽取被检样品一级种、二级种、三级种的抽样量分别为该批菌种量的10%、5%、1%。但每批抽样数量不得少于10支（瓶、袋）；若一级抽样超过100支（瓶、袋）的，可进行两级抽样。7.2判定规则检验项目全部符合要求的，判定为合格菌种，其中任何一项不符合要求，判定为不合格菌种。技术指标不符合要求的，允许复检一次，仍不符合要求，则判该批产品不合格。8标签、标志、包装、运输、贮存8.1标签、标志8.1.1产品标签每支（瓶、袋）菌种应贴（印）有清晰注明以下内容的标签：a)产品名称（如：林芝灵芝母种）；b)品种名称（如：林芝灵芝菌种厂号）；c)生产单位（菌种厂）；d)接种日期（如：年月日）；e)执行标准。8.1.2包装标签每箱（或其它包装单位）菌种必须贴有清晰注明以下要素的包装标签：a)产品名称、品种名称；b)厂名、厂址、联系电话；c)出厂日期；d)保质期、贮存日期、贮存条件；e)数量；f)执行标准。8.1.3包装储运图示按GB/T 191的规定，应注明以下图示标志：a)小心轻放标志；b)防水、防潮、防冻标志；c)防晒、防高温标志；d)防止倒置标志；e)防止重压标志。8.2包装8.2.1一级种外包装采用木盒或有足够强度的纸盒，内填棉花、碎纸、泡沫塑料等缓冲物。8.2.2二级种、三级种：外包装可采用洁净、干燥的塑料箱、编织袋或有足够强度的纸箱，箱内菌种之间用碎纸、报纸等具有缓冲作用的轻质材料填满。箱内附产品合格证和使用说明书。DB5404/T 0003202378.3运输8.3.1不得与有毒物品混装、混运。8.3.2气温达 25 或以上时，需用 6 15 冷藏车运输，运输时间不得超过 5 d。8.3.3运输中必须有防震、防晒、防尘、防雨淋、防冻、防杂菌污染的措施。8.4贮存8.4.1用于转管保藏的一级种（母种），在 6 8 避光保藏不超过 5 个月；一级种（母种）至使用时，在 6 8 避光保藏不超过 60 d；至销售时，在 6 8 避光保藏不超过 50 d。8.4.2原种应尽快使用，在温度不超过 28、清洁、干燥、通风（空气相对湿度 50%70%）、避光的室内存放不超过 10 d，在 6 8 下贮存时，贮存期不超过 30 d。8.4.3栽培种应尽快使用，在温度不超过 28、清洁、干燥、通风（空气相对湿度 50%70%）、避光的室内存放不超过 15 d，在 68 下贮存时，贮存期不超过 30 d。