HIV-1感染者与健康者接种乙型肝炎疫苗后免疫应答的差异研究.pdf

口岸卫生控制第 28卷 第 4期HIV-1 感染者与健康者接种乙型肝炎疫苗后免疫应答的差异研究肖青1，刘春华2，刘佳2，薛喜梅1，方根成1（1.河南省确山县疾病预防控制中心，河南 驻马店 463200；2.河南省疾病预防控制中心，河南 郑州 450000）摘要目的研究分析 HIV-1 感染者与健康者接种乙型肝炎疫苗后出现的免疫应答差异。方法将在 2021 年 2 月2023 年 2 月期间到医院接受乙型肝炎疫苗接种的 30 例 HIV-1 感染者作为感染组，选择同期接受乙型肝炎疫苗接种的 30 例健康者作为对照组，于两组接种前、接种后4 周和 12 周分别收集血液样本，对其血液标本采用酶联免疫法进行血清中乙型肝炎表面抗原和抗体水平检测，同时采用流式细胞术对 CD4+T 细胞的计数和病毒载量进行测定。结果在接种结束后第 4 周以及第 12 周时，HIV-1 感染者的抗-HBs 水平均低于健康者；在接种结束后第 4 周时，HIV-1 感染者呈阳性率低于健康者，比较差异有统计学意义，P0.05；在接种结束后第 12 周时，HIV-1 感染患者的呈阳性率与健康者对比，差异有统计学意义，P0.05。两组受试者在接受乙型肝炎疫苗接种后第 4 周以及第 12 周的细胞免疫反应对比，产生 干扰素（IFN-）的 CD4+T 细胞以及 CD8+T 细胞的百分比对比，HIV-1 感染者均比健康者的低，数据差异显著，P0.05。结论HIV-1 感染者接种乙型肝炎疫苗后的免疫应答与健康接种者存在差异，可能与 CD4+以及 CD8+T细胞计数和病毒载量的降低有关。关键词HIV-1 感染者乙型肝炎疫苗免疫应答CD4+T 细胞病毒载量中图分类号R512.91文献标识码Bdoi10.3969/j.issn.1008-5777.2023.04.012Differences in Immune Response between HIV-1 Infected Individuals and Healthy Individuals after Receiving Hepatitis B VaccineXiao Qing1，Liu Chunhua2，Liu Jia2，Xue Ximei1，Fang Gencheng1（1.Center for Disease Control and Prevention of Queshan County in Henan Province，Zhumadian，Henan 463200，China；2.Henan Center for Disease Control and Prevention，Zhengzhou Henan 463200，China）AbstractObjectiveTo Study and analyze the differences in immune response between HIV-1 infected individuals and healthy individuals after receiving hepatitis B vaccine.Methods30 HIV-1 infected individuals whoreceived hepatitis B vaccine at the hospital from February 2021 to February 2023 will be selected as the infectiongroup，and 30 healthy individuals who received hepatitis B vaccine at the same time will be selected as the controlgroup，Blood samples were collected from patients before，4 weeks，and 12 weeks after vaccination，and their serumlevels of hepatitis B surface antigen and antibody were measured using enzyme-linked immunosorbent assay.CD4+T cells were counted and viral load was measured using flow cytometry.ResultsAt the 4th and 12th weeks aftervaccination，the levels of anti HBs in HIV-1 infected patients were lower than those in healthy individuals，with acomparative statistical value of P0.05；At the 4th week after vaccination，the positivity rate of HIV-1 infected individuals was lower than that of healthy individuals，with a statistically significant difference（P0.05）。纳入标准：纳入研究的健康者其乙型肝炎表面抗原和抗体均表现为阴性，无 HIV-1 感染；纳入研究的 HIV-1 感染者均符合艾滋病的临床诊断标准，其乙型肝炎表面抗原和抗体均表现为阴性，且 CD4+T 细胞计数大于每立方毫米 200 个细胞；纳入研究的受试者均签署知情同意书，且研究由医院伦理委员会批准同意。排除标准：受试者伴有其他感染性疾病；妊娠以及哺乳的女性；存在乙型肝炎疫苗接种禁忌的受试者；中途没法正常跟踪随访的受试者；受试者不存在乙型肝炎疫苗接种史。1.2方法1.2.1疫苗接种方法首先，接受乙型肝炎疫苗接种的所有受试者均应进行接种部位的常规消毒，包括上臂三角肌肌肉或者上臂皮下组织；接着分别于 0、1、6 个月为接种者进行 0.5mL 的乙型肝炎疫苗（Engerix-B、葛兰素史克）注射；然后对其接种后的上臂三角肌肌肉或上臂皮下组织进行轻微的按摩，其目的在于促进疫苗的吸收和分散；最后，观察接种者是否出现不良反应，例如局部疼痛、发热、头痛等，如果不良反应严重需要及时予以处理。1.2.2免疫应答检测方法所有受试者均在接种疫苗前，完成 3 针疫苗接种后一个月以及 12 周时抽取外周血进行乙肝相应指标的检测，将采集的外周血制作成血清标本，通过酶联免疫吸附法（ELISA）对血清中的乙肝表面抗原（HBsAb）以及抗体（anti-HBs）进行测定，若乙肝表面抗体转为阳性则表示接种成功，阳性的判断为抗体水平大于 10mIU/mL。从 HIV-1 感染者和健康者接种乙型肝炎疫苗后的血液中收集外周血单个核细胞（PBMC），并对其使用 Ficoll-Paque（GE Healthcare）密度梯度离心进行分离，在布雷菲尔丁 A（Sigma-Aldrich）存在下，用 HBV 表面抗原（HBsAg）肽库（JPT 肽技术）在 37下刺激 PBMC 6h。同时采用荧光标记抗体标记 CD4+T 以及 CD8+T 细胞的表面，再通过流式细胞术（BD FACSCanto II）对 CD4+T 和CD8+T 细胞的免疫应答进行分析。针对 HIV-1 感染者还要对其病毒载量进行检测，使用 PCR 技术检测compared to healthy individuals，P0.05.Comparison of cellular immune responses between two groups of subjectsafter receiving hepatitis B vaccine at the 4th and 12th weeks，resulting in Interferon（IFN-）The percentages ofCD4+T cells and CD8+T cells in HIV-1 infected individuals were lower than those in healthy individuals，with significant differences in data（P0.05）.ConclusionThere are differences in the immune response of HIV-1 infected individuals after receiving the hepatitis B vaccine，which may be related to a decrease in CD4+and CD8+Tcell counts and viral load.Key wordsHIV-1 infected individualsHepatitis B vaccineImmune responseCD4+T cellsViral load肖青，等.HIV-1 感染者与健康者接种乙型肝炎疫苗后免疫应答的差异研究-47口岸卫生控制第 28卷 第 4期患者血液中存在的 HIV-1 病毒载量，其病毒载量低，则说明免疫应答对 HIV-1 病毒有一定的抑制作用。1.3观察指标（1）观察对比 HIV-1 感染者和健康者在接种乙型肝炎疫苗后第 4 周以及第 12 周的免疫应答情况。（2）对比观察两组受试者在不同接种时间段的细胞免疫反应。1.4统计学方法数据的统计分析利用 SPSS23.0 软件处理，用“xs”描述计量资料，对比行 t 检验，用“n/%”描述计数资料，行 2检验，以 P0.05 表示差异有统计学意义。2结果2.1两组受试者在接种乙型肝炎疫苗后不同时间点的免疫应答情况在接种结束后第 4 周以及第 12 周时，HIV-1感染患者的抗-HBs 水平均低于健康者；在接种结束后第 4 周时，HIV-1 感染者呈阳性率低于健康者，比较差异有统计学意义，P0.05；在接种结束后第 12 周时，HIV-1 感染患者的呈阳性率与健康者对比，差异有统计学意义，P0.05。（见表 1）。表 1两组受试者在接种乙型肝炎疫苗后不同时间点的免疫应答情况组别健康者HIV-1 感染者t/2值P 值例数/例3030抗-HBS 水平（mIU/mL）第 4 周45.6718.7222.5412.375.6460.05第 12 周87.2329.8545.3621.496.2350.05阳性率 n（%）第 4 周20（66.67）12（40.00）4.2860.05第 12 周26（86.67）23（76.67）1.0020.05表 2两组受试者在不同接种时间段的细胞免疫反应（xs）组别健康者HIV-1 感染者t 值P 值例数/例3030CD4+T 细胞的百分比（%）第 4 周1.680.530.920.455.9870.05第 12 周2.580.871.590.625.0760.05CD8+T 细胞的百分比（%）第 4 周0.930.370.550.244.7190.05第 12 周1.540.560.980.314.7920.052.2两组受试者在不同接种时间段的细胞免疫反应两组受试者在接受乙型肝炎疫苗接种后第 4周以及第 12 周的细胞免疫反应对比，产生 干扰素（IFN-）的 CD4+T 细胞以及 CD8+T 细胞的百分比对比，HIV-1 感染者的均比健康者的低，数据差异显著，P0.05，（见表 2）。3讨论HIV-1 感染者发展成艾滋病的过程中，可以激活非特异 T 细胞慢性免疫能力，同时在接受抗病毒治疗的过程中会对疾病的进展产生一定的抑制作用，并且 HIV-1 感染对大多数 T 细胞免疫激活分子的表达有着较大的影响和关联，然而 HIV-1 病毒不容被清除，同时会一直以低表达水平存在于机体内，从而长期刺激 T 细胞激活后造成 T 细胞的增殖和应答能力缺失，被称为免疫耗竭4。另外，作为HIV-1 感染群体，可进一步造成免疫系统的损伤，因而作为 HIV 感染者更易发生 HBV 慢性感染。因为艾滋病和乙型肝炎的传播途径较为相似，所以发生艾滋病合并乙型肝炎后，加重了对肝功能的损伤，从而增大了患者的死亡风险，并且由于 HIV-1感染者的免疫系统受影响，其免疫力降低，继而在接种乙型肝炎疫苗后，HIV-1 感染者易导致免疫应答降低，从而影响接种效果5。乙型肝炎病毒以及 HIV-1 合并感染患者可快-48第 28卷 第 4期速发展成艾滋病，并提高了发展成肝硬化、肝癌等病变的风险，但是予以乙肝疫苗接种后，能有效预防乙型肝炎病毒的感染，所以针对 HIV-1 合并HBV 感染的人群予以乙肝疫苗接种可较好地预防HIV-1 合并 HBV 感染6。此次研究主要是对比了HIV-1 感染者与健康人群对乙型肝炎疫苗接种后的免疫反应，研究结果显示，在接种结束后第 4 周以及第 12 周时，HIV-1 感染患者的抗-HBs 水平比健康者都低，P0.05；在接种结束后第 4 周以及第12 周时，HIV-1 感染患者的呈阳性率与健康者对比，P0.05。HIV-1 感染者中存在的抗-HBsAg 抗体水平较低可能是由于 B 细胞功能受到损伤，毕竟从以往临床研究结果可知 HIV-1 感染会影响 B 细胞的活化、分化和抗体产生。研究结果还表明，在接种后第 4 周、12 周产生 干扰素（IFN-）的 CD4+T 细胞以及CD8+T 细胞的百分比对比，HIV-1 感染者都要低于健康者，P0.05。相关研究8-9表示，CD4+T 细胞与CD8+T 细胞与慢性 HIV-1 感染者的病程具有一定的相关性。HIV-1 感染者出现 CD4+T 细胞反应较低可能是因为 T 细胞功能遭到破坏，毕竟 HIV-1 感染会对 T 细胞的活化、分化和细胞因子的产生造成一定的影响。HIV-1 阳性个体可能需要额外的疫苗剂量或替代的疫苗接种策略来实现对 HBV 感染的充分保护。另外，HIV-1 病毒会直接攻击 CD8+T细胞，导致它们死亡或失去功能，从而降低 CD8+T细胞的数量，并且作为慢性 HIV-1 感染可长时间的让免疫系统处于高度激活状态，从而导致免疫细胞（如 CD4+、CD8+T 细胞等）的过度消耗和疲劳，即免疫耗竭。同时，可因为发生免疫逃逸或者受到其他疾病或者感染的影响等，均能导致 CD8+T 细胞的降低。综上所述，HIV-1 感染者接种乙型肝炎疫苗后仍然可以产生免疫应答，但相对于健康者而言，免疫应答较弱。因此，在 HIV-1 感染者中推广乙型肝炎疫苗接种仍然具有重要意义，但需要注意免疫应答的弱点。需要进一步的研究来确定如何改善HIV-1 感染者对 HBV 疫苗的免疫反应。参考文献1 艾滋病疫情防治概况 J.家庭医学，2020（9）：61.2 庄辉.实现世界卫生组织提出的消除病毒性肝炎目标J.肝博士，2019（1）：1.3 葛申，马建新，刘瑶瑶，等.接种乙型肝炎疫苗无应答健康成人再免疫效果的 Meta 分析 J.中国疫苗和免疫，2019，25（5）：598-604.4 赵增艳，韦彩雯，张源，等.HIV-1 感染者外周血 T 细胞 miR-155 水平与免疫激活和耗竭的关系研究 J.实用医学杂志，2021，37（23）：2989-2992.5 唐仁海，李畅，王继宝，等.接种 HBV 疫苗的 HIV 感染者血清抗-HBs 5 年阳性率及影响因素 J.中国艾滋病病，2022，28（6）：652-657.6 栗翠林，韩俊燕，曾永秦，等.HIV 感染者接种乙肝疫苗的必要性及低应答研究进展 J.首都公共卫生，2020，14（2）：97-102.7 黄丽静，姚钦江，蒋春燕，等.HIV 感染后接种乙肝疫苗应答反应情况的研究 J.中外医疗，2020，39（8）：32-34.8 王倩莹，王甜甜，王硕，等.使用活化诱导标记法评价HIV-1 感染者特异性 CD4+T 细胞免疫应答的研究J.中华微生物学和免疫学杂志，2022，42（1）：8.9 何天怡，邱文浩，刘显，等.慢性 HIV-1 感染者 CD8+T细胞活化和耗竭水平与病程的相关性研究 J.广西医科大学学报，2021，38（8）：1497-1503.收稿日期：2023-05-22肖青，等.HIV-1 感染者与健康者接种乙型肝炎疫苗后免疫应答的差异研究-49