HPLC-Q-TOF-MS_MS快速筛查蜂蜜中26种生物碱.pdf

2023，32（3）福建分析测试Fujian Analysis&TestingHPLC-Q-TOF-MS/MS快速筛查蜂蜜中26种生物碱王鹭骁，袁文萱，吴娇敏，王 东，方恩华，徐敦明*（厦门海关技术中心，福建厦门361013）收稿日期：2022-12-2基金项目：海关总署科技项目(2020HK223)作者简介：王鹭骁（1979），男，硕士/工程师，研究方向为食品检验。E-mail：通信作者：徐敦明（1977），男，研究员，主要研究方向为食品安全。E-mail：D摘要：基于高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法（HPLC-Q-TOF-MSMS）技术，建立了快速筛查和分析蜂蜜中26种生物碱的方法。该方法建立了生物碱检测数据库，其中包含 26 种生物碱的一级精确质量数及保留时间和二级离子谱库。样品采用QuEChERS法提取，加入PSA固相萃取粉末净化，采用，ACE Excel C18-AR（4.6150 mm，2.7m）色谱柱进行分离，5 mmol/L甲酸铵水溶液（含0.1%甲酸）和乙腈作为流动相梯度洗脱，外标法定量。结果表明：26种生物碱在0.550 ng/mL的线性范围内关系良好，相关系数（r）均在0.99以上（），样品回收率在79.7%94.3%，相对标准偏差RSD在1.54%6.93%。检出限0.66.0 g/kg，定量限2.0 20 g/kg。本方法前处理操作简单、高效，为生物碱残留的快速筛查和定量检测提供了可靠的技术支持。关键词：高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（HPLC-Q-TOF/MS）；蜂蜜；生物碱中图分类号：TS207.3文献标识码：A文章编号：1009-8143（2023）03-0001-08Doi:10.3969/j.issn.1009-8143.2023.03.01Rapid screening of 26 alkaloids in honey by HPLC-Q-TOF-MS/MSWang Lu-xiao，Yuan Wen-xuan，Wu Jiao-min，Wang Dong，Fang En-hua，Xu Dun-ming*（Xiamen Customs Technical Center，Xiamen，Fujian 361013，China）Abstract:A method for the fast screening and detection of 26 alkaloids in honey was established based on high performanceliquid chromatography-quadrupole-time of flight mass spectrometry（HPLC-Q-TOF-MSMS）.The method established adatabase for the detection of alkaloids，which contained the exact mass numbers and retention times of 26 alkaloids at primary level and a secondary ion spectrum library.The samples were extracted by QuEChERS method，cleaned up by addingPSA solid phase extraction powder，and separated by an ACE Excel C18-AR（4.6150 mm，2.7 m）with aqueous solution（containing 0.1%formic acid and 5 mmol/L ammonium formate）and acetonitrile as the mobile phase.External standardmethod was used for quantitative analysis.The results showed that the 26 alkaloids had good linear relationships within0.550 ng/mL，and the correlation coefficients（r）were all above 0.99，the sample recoveries were in the range of 79.7%94.3%，and the relative standard deviations（RSDs）were in the range of 1.54%6.93%.The limits of detection were 0.66.0 g/kg and the limits of quantification were 2.020 g/kg.The method is simple，efficient and provides a reliable technical support for the rapid screening and quantitative determination of alkaloid residues.Key words：high performance liquid chromatographyquadrupole time-of-flight mass spectrometry（HPLC-Q-TOF/MS）；honey；alkaloids生物碱是一类碱性的含氮化合物1，其结构复杂，种类繁多，在自然界中广泛存在于药用植物中，因此也被称为植碱。天然的生物碱具有广泛的生理活性和碱性2，在医药3-4、化工5、农畜牧业3等领研究报告12023，32（3）福建分析测试研究报告域广泛运用。但由于很多生物碱本身具有较强的毒性，使用不当易威胁生命健康，譬如：秋水仙碱、乌头碱类的治疗剂量和中毒剂量非常接近，稍微使用过量就可以引发中毒3；常存在于菊科、豆科等植物中的吡咯里西定生物碱，具有肝毒性、基因毒性和致癌性6-7，可以通过食物链进入动物源性食品（牛奶、蜂蜜等），极易对食用人群产生危害6-7。蜂蜜在我国使用历史悠久，作为食品，可以用来为增添风味，作为药品，可以用于脘腹虚痛、肺燥干咳、长燥便秘、，解乌头类药毒；外治疮疡不敛、水火烫伤8。但蜂蜜的品质与与蜜蜂采食的蜜源植物有着直接关系9，若过蜜源植物中含有毒性成分，则蜜蜂采食后将毒性成分带入蜂蜜中，对食用这带来安全隐患。2005年以来，云南省内连续发生了人使用蜂蜜的中毒事件数十起，导致七十多人中毒，18人死亡10；而在国外也有GRIFFIN也对澳大利亚的59份蜂蜜进行检测，其中发现41份样品还有吡咯里西啶类生物碱（PAs）10。鉴于蜂蜜是人类长期服用的食品，且作为摄入生物碱的主要途径之一，需要亟需建立检测蜂蜜中生物碱的方法。目前，现行的标准在蜂蜜中生物碱的检测方面并没有相应的国家标准，仅有一个 T/SATA035-2022团体标准11，其中仅涉及21种生物碱，且在操作步骤并未提及净化过程，采用该方法会造成色谱柱的堵塞。目前对于蜂蜜中的生物碱的研究集中在PAs类化合物，种类单一，且大部分采用的净化方法为固相萃取，操作繁杂，时间成本增加，且采用的方法多为为质谱/质谱法。液相色谱-质谱/法12-13相较而言适配性更广、灵敏度更高，因而成为检测手段的日常首选。但三重四级杆串联质谱多采用多反应检测扫描模式（MRM），但在分辨率和扫描速率方面受到限制，在样品分析时会受到基质干扰成分的影响，出现假阳性和假阴性的结果。近些年，高分辨质谱技术在蔬菜水果、茶叶、酒类等领域应用广泛，而在蜂蜜基质的报道中，利用高分辨质谱的的分析检测报道相对较少。本研究针对蜂蜜基质的特点，借助商业化QuEChERS前处理方法，采用PSA固相萃取粉末净化，建立了蜂蜜中26种生物碱的高效液相色谱法-四极杆-飞行时间质谱快速定性筛查法，该方法可在无标准的情况下，快速定性鉴定蜂蜜中26种生物碱的情况，还可以通过HPLC-Q-TOF/MS准确定量，确实做到缩短排查时间、降低实验误差，具有高通量、高效、简便等特点，为蜂蜜产品中的生物碱的安全风险评估提供了技术支持。1实验部分1.1主要仪器与设备Agilent Infinity 1290-6540 超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱仪：配有双电喷雾离子源（dualJetStream ESI），MassHunter PCDL（Personal Compound Database and Library）Manager个人化合物数据库与谱图库创建软件（美国Agilent公司）；离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）；涡旋混匀器（德国IKA公司）；BS2202S分析天平（德国Sartorious公司）；氮吹仪（瑞典Biotage公司）1.2主要材料与试剂乙腈、甲醇、甲酸（均为色谱纯，德国默克股份两合公司）；PSA粉末、QuEChERS盐包（美国安捷伦公司）；实验用水均为Milli-Q超纯水。26种标准品均购自于上海安谱科学仪器有限公司，中英文名称及CAS号详见表1。1.3试验方法1.3.1色谱条件色 谱 柱：ACE Excel C18-AR（4.6150 mm，2.7 m），流动相A：0.1%甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液；流动相B：乙腈。流动相洗脱程序：0.01.5 min，8%B；1.53.0 min，8%40%B；3.05.0 min，40%80%B；5.08.0 min，80%100%B；8.010 min，100%B；1010.2 min，100%8%B；10.216 min，8%B。柱温：35；进样量：5.0 L；流速：0.8 mL/min。质谱条件：离子源：电喷雾离子源（ESI），正离子；干燥气温度280；干燥气流速10 L/min，雾化气压力35 psi，鞘气温度260，鞘气流速10 L/min，毛细管电压4000 V，碎裂电压60 V，锥孔电压45 V。全扫描质核比范围为 m/z 501000，扫描速率为 3spectra/s；采用内标参比溶液对仪器质量精度进行实时校正，内标参比溶液包含参比离子精确质量数为121.058 73和922.009 798。1.3.2样品前处理准确称取1.0 g蜂蜜于50mL离心管中，加入3 mL二次水，加入100uL甲酸，加入5 mL乙腈，混匀，超声提取10min，8000 r/min离心3min，提取上清液，再22023，32（3）表126种生物碱的谱库数据Number序号1234567891011121314151617181920212223242526Compound化合物槟榔碱Arecoline苦参碱Matrine野百合碱Monocrotaline槐定碱Sophoridine毛果芸香碱Pilocarpine盐酸麻黄碱Ephedrine千里光碱Senecionine东莨菪碱Scopolamine毒扁豆碱Eserine钩吻碱Gelsemine free base番木鳖碱Brucine阿托品Atropine龙葵碱/茄碱Solanine去氢骆驼蓬碱Harmine金雀花碱Cytisine四氢药根碱Tetrahydrojatrorrhizine秋水仙碱Colchicine原阿片碱Protopine小檗碱Berberine荷叶碱Nuciferin喜树碱Camptothecin新乌头碱Mesaconitine次乌头碱Hypaconitine乌头碱Aconitine吴茱萸碱Evodiamine草乌甲素Bulleya conitineFormula分子式C8H13NO2C15H24N2OC16H23NO6C15H24N2OC11H16N2O2C10H15NOC18H25NO6C17H21NO4C15H21N3O2C20H22N2O2C23H26N2O4C17H23NO3C45H73NO15C13H12N2OC11H14N2OC20H23NO4C22H25NO6C20H19NO5C20H19NO5C19H21NO2C20H16N2O4C33H45NO11C33H45NO10C34H47NO11C19H17N3OC35H49NO9CAS NumberCAS号300-08-3519-02-8315-22-06882-68-492-13-7299-42-36870-67-351-34-357-47-6509-15-9357-57-351-55-820562-02-1442-51-3485-35-813063-54-264-86-8130-86-92086-83-1475-83-27689-03-42752-64-96900-87-4302-27-2518-17-2107668-79-1Theoretical value理论值/M+H+（m/z）156.1019249.1961326.1598249.1961209.1285166.1226352.1755304.1543276.1707323.1754395.1965290.1751868.5053213.1022191.1179342.17400.1755354.1336354.1336296.1645349.1183632.3065616.3116646.3222304.1444628.348Actual value实际值/M+H+（m/z）156.1018249.1964326.1607249.1964209.1289166.123352.1759304.1553276.1713323.1763395.1976290.1758868.5059213.1025191.118342.1711400.1763354.1348354.1343296.1653349.1191632.3072616.3122646.3237304.1451628.3491Relative deviationof mass number质量数相对偏差/ppm0.540.27-2.690.27-2.1-1.86-1.36-2.91-2.37-2.79-2.57-2.63-0.82-1.5-2.97-4.54-1.92-1.21-2.21-2.63-2.33-1.02-0.81-2.04-2.29-1.78Daughter Ion1子离子144.04952148.112294.05170120.06489163.10436148.1121394.05136138.08752219.11368236.10683324.12311124.1121298.09634170.08493148.05760163.0632310.11965189.07824320.06651265.12299305.12753354.17014556.29068586.30153134.04634584.33572Daughter Ion2子离子2113.06013110.09643120.0648784.067995.04686/120.06434156.09766162.09164270.06530244.0963093.06973398.33891144.0758544.03970178.08624282.1252149.05956292.07236234.10420249.10126572.28555524.24632526.27947161.05627552.30974Retention time/min保留时间/min2.5862.5974.6324.6764.8274.9384.965.0715.1165.1215.1665.3215.4385.4885.4885.6385.7945.8335.8335.9446.1556.336.6676.8847.3067.38王鹭骁 等：HPLC-Q-TOF-MS/MS快速筛查蜂蜜中26种生物碱32023，32（3）福建分析测试研究报告加入3mL二次水、5 mL乙腈，重复上述操作一次，离心，合并提取液。加入 QuEChERS 盐包，8000/min离心3 min，取5 mL有机层氮吹至近干（0.2-0.5 mL），用初始比例流动相定容至 1 mL，加入 0.2 gPSA 粉末，涡旋混匀 1 min，于 15000 r/min 离心 3 min。上清夜经0.22 m微孔滤膜过滤后，待测。2结果与讨论2.1生物碱建库与筛查结合 26 种生物碱的分子式，利用 MassHunterPCDL Manager软件将相关信息导入，建立生物碱的初始数据库；将 100 g/L 的混合标准溶液，采用1.3.1所述条件，采用全扫描模式进行测定，结合建立的初始数据库进行搜索，得到各目标化合物的提取离子色谱图（见图1）及其保留时间，将保留时间信息输入初始数据库；在Q-TOF/MS的Targeted MS/MS采集界面输入生物碱的母离子保留时间以及不同的碰撞能量，化合进行不同碰撞能量下的碎片离子数据采集，将碰撞能量及对应的碎片离子质谱图信息输入数据库，得到26种化合物数据库（26种生物碱精确质量数、保留时间以及碎片离子的信息见表1）。2.2流动相的优化流动相的pH、梯度对于目标化合物的峰面积、响应值、洗脱时间均有影响，理论上，酸性环境有利于生物碱生成M+H+离子，可以提高离子化效率14，但也有研究指出：过高的甲酸铵会产生竞争性抑制电离，会降低离子化效率5。本研究选用乙腈和0.1%甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液作为流动相，目标化合物的MRM色谱图见图1。图126种生物碱的提取色谱图2.3质谱条件的优化生物碱大都是含氮的有机化合物，在正离子的条件下容易生成M+H+离子，在质谱图条件中离子源温度、鞘气温度等对于目标化合物的离子化都至关重要。因此，本研究对于离子源温度、鞘气温度、破碎电压、锥孔电压进行全面优化。2.3.1鞘气温度在质谱条件中，鞘气是雾化气，主要作用是使样品液流溶剂化，因而鞘气温度对于目标化合物的离子化最为重要。本实验探究了在不同鞘气温度下，对于目标化合物的影响。实验选取的鞘气温度为：240、260、280、300、320。通过实验发现，随着鞘气温度的上升，大部分目标化合物的响应遵循先升高后降低的规律，考虑到26种化合物的性质，因此质谱条件的鞘气温度为260。图2鞘气温度优化实验2.3.2破碎电压本实验探究了在不同的破碎电压下，对于目标化合物的影响，实验选取破碎电压为40 V、60 V、80 V、100 V、120 V。通过实验发现：大部分的化合物随着破碎电压的升高，相应值也会升高，但有部分化合物如：盐酸麻黄碱、金雀花碱等会出现破碎电压升高而降低的情况。考虑到26中化合物的总体情况，故破碎电压选择60V。图3破碎电压优化实验2.3.3锥孔电压锥孔电压使分子离子再次电离得到碎片离子，主要是影响离子进入质谱的速度。理论上：锥孔电压高，离子速度快，离子损失小，检测灵敏度高，可以在在离子源区获得更多的碎片，产生碎片离子本实验探究了在不同的锥孔电压下，对于目标化合物42023，32（3）的影响，实验选取锥孔电压为45 V、60 V、80 V、100 V的电压进行优化。结果如下图所示。通过实验发现：随着锥孔电压的增大，各个化合物的相应值会降低，原因可能是因为：过高的锥孔电压会增加离子间的碰撞，引起源内裂解，因此，质谱条件的锥孔电压选择为45V。图4锥孔电压优化实验2.4前处理方法本研究中的26种生物碱包括了钩吻碱类、乌头碱类、吡咯西里啶类等多种类型的生物碱，种类较为繁多，有强碱性的、中等碱性等，化合物的性质差异大。考虑到实验的便捷性，实验选取最常用的QuEChERS法，实验采用乙腈作为提取溶剂，加入的NaCl和无水MgSO4可以起到吸水分层的作用，并且在吸水的过程中，MgSO4吸水会放热，可以促进生物碱从水相转移至乙腈相15。实验选取商用的QuEChERS盐包，NaCl和无水MgSO4的比例为0.5g和4.0g，通过实验发现，该QuEChERS盐包提取效果较好。2.5氮吹影响考虑到目标化合物的色谱峰的峰宽、峰型，一般选用初始比例的流动相配制标准溶液或氮吹浓缩后对于样品溶液进行复溶。文献中大部分的氮吹条件为：氮气吹干。为考查氮气吹干和氮气吹至近干是否对于目标化合物有影响，实验吸取 1 mL100 ng/mL的乙腈配制的混合标准溶液，分别进行氮吹全干和氮吹近干（0.2-0.5 mL）后采用初始比列流动相进行复溶，进行测定。实验发现，氮吹全干会导致目标化合物的平行较差，部分目标化合物（如：茄碱回收率75%）的回收率较低，因此实验选择的氮吹方式为氮吹至近干。2.6标准曲线检出限及定量限分别吸取适量的生物碱标准中间液，依次加入经提取净化后阴性样品，配置成浓度为 0.5，2，5，10，20，50 ng/mL标准工作液，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。26种生物碱在 150 ng/mL范围内，线性关系良好，相关系数R2均大于 0.99。在空白样品中添加低水平浓度的混合标准品，经过前处理后，以信噪比（S/N）大于3确定为本方法的为检出限（LOD），信噪比（S/N）大于10确定表226种生物碱的线性方程及相关系数槟榔碱苦参碱野百合碱槐定碱毛果芸香碱盐酸麻黄碱千里光碱东莨菪碱毒扁豆碱钩吻碱番木鳖碱阿托品龙葵碱去氢骆驼蓬碱Y=13580.2X+9097.3Y=8462.4X+2933.6Y=2124.8X+134.4Y=26902.3X+10024.1Y=6751.3X+7890.2Y=55461.2x-24459.6Y=15751.3X+4507.8Y=12857.1X+15530.2Y=28763.9X+30467.2Y=15842.8X-13716.5Y=12335.3X-6017.7Y=8840.73X+25177.8Y=3377.9X+1675.5Y=28752.6X+19195.6R2=0.9996R2=0.999R2=0.999R2=0.996R2=0.999R2=0.9948R2=0.998R2=0.997R2=0.998R2=0.999R2=0.999R2=0.998R2=0.997R2=0.9981.00.66.06.01.01.01.01.00.60.60.60.60.60.63.02.020203.03.03.03.02.02.02.02.02.02.0化合物线性方程相关系数R2检出限定量限王鹭骁 等：HPLC-Q-TOF-MS/MS快速筛查蜂蜜中26种生物碱52023，32（3）福建分析测试研究报告为为定量限（LOQ），确定了该方法的检出限为0.66.0 g/kg和定量限2.0 20 g/kg，具体结果见表2。2.7方法的回收率和精密度向空白蜂基质中按照不同化合物的1倍LOQ、2倍LOQ、10倍LOQ不同加标水平加入标准溶液，按照1.3.2进行前处理操作，每组平行测定6次，进样分析，计算加标回收率平均回收率在79.7%94.3%，相对标准偏差RSD在1.54%6.93，表明该方法的准确度较高。金雀花碱四氢药根碱秋水仙碱原阿片碱小檗碱荷叶碱喜树碱新乌头碱次乌头碱乌头碱吴茱萸碱草乌甲素Y=28752.6X+19195.6Y=32122.2X-21317.3Y=10541.1x-5692.9Y=33461.0X-12135.2Y=33761.0X-16831.5Y=29247.2X-17889.6Y=1374.06X-857.7Y=4780.2X-3960.8Y=1376.9X+1955.25Y=7848.3X-4361.2Y=3370.7X-1297.1Y=3331.5X+1301.2R2=0.999R2=0.996R2=0.998R2=0.997R2=0.996R2=0.995R2=0.999R2=0.999R2=0.999R2=0.997R2=0.999R2=0.9990.60.60.60.60.60.62.00.60.60.61.02.02.02.02.02.02.02.06.02.02.02.03.06.0化合物线性方程相关系数R2检出限定量限（续表1）表326种生物碱平均回收率和相对标准偏差槟榔碱苦参碱毛果芸香碱盐酸麻黄碱千里光碱东莨菪碱3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg88.689.289.985.388.387.380.385.789.679.883.792.894.384.596.379.790.584.15.325.414.333.883.763.336.351.544.214.655.614.743.525.113.543.563.951.98去氢骆驼蓬碱金雀花碱四氢药根碱秋水仙碱原阿片碱小檗碱3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg90.192.293.486.387.184.587.484.989.993.984.987.786.991.584.190.194.181.36.352.163.676.565.782.36.645.315.045.262.233.822.903.903.326.653.212.03化合物添加浓度平均回收率/%RSD/%化合物添加浓度平均回收率/%RSD/%62023，32（3）2.8实际样品的检测收集市售的蜂蜜样品共6份进行测定，并无发现其中含有目标化合物，猜测可能是因为市场上流通的蜂蜜是经过筛选处理后的，后续会对野外并未流通在市场的野生蜂蜜进行测定。3结论本研究采用QuEChERS前处理方法，PSA固相微 萃 取 粉 末 净 化 样 品，采 用 超 高 效 液 相 色 谱（UPLC）-四极杆-飞行时间质谱（Q-TOF/MS）法建立了26种生物碱数据库。结果表明该方法灵敏度高、操作简单，适用于测定蜂蜜中的26中生物碱的检测，为蜂蜜中的生物碱检测提供一种高效的方法，为蜂蜜中生物碱的检测标准化提供了提供研究思路，也可以为其他基质中生物碱的定量定性分析提供技术支持。参考文献1 秦艳，赵希娟，郭鹏妹，等.基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱分析酸橙果实中的生物活性成分J.食品与发酵工业，2022，48（5）：268-280.2 廖仕成，李荷丽，刘红河，等.超高效液相色谱-串联质谱法同时检测中药材及植物性食品中23种有毒生物碱J.食品安全质量检测学报，2022，13（1）：141-149.3 梁丹，李志伟，李明，等.天然生物碱的研究与应用J.安徽农业科学，2007，35（35）：11340-11342.4 丁芳林，彭书练.HPLC/ESI-MS法测定槟榔中的槟榔碱J.农产品加工 学刊，2008，000（004）：76-79.5 沈沛霖，钱圆，卫严冰，等.超高效液相色谱-串联质谱法分析柑橘及土壤中苦参碱残留J.浙江农业科学，2018，59（3）：501-503.6 许秀丽，许博舟，王菡，等.超高效液相色谱-高分辨质谱法同时测定茶叶中15种吡咯里西啶类生物碱J.中国食品卫生杂志，2021（033-006）：783-790.7 昝珂，李耀磊，王莹，等.QuEChERS-UPLC-MS/MS 法快速测定蜂蜜中28个吡咯里西啶生物碱的含量及风险评估J.药物分析杂志，2021，41（12）：2087-2094.8 昝珂，谢培德，金红宇，等.蜂蜜中肝毒性吡咯里西啶类生物碱成分质量控制研究进展J.药物分析杂志，2021，41（6）：943-952.9 杜凤君，徐敦明，张志刚，等.QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法同时分析蜂蜜中33种生物碱J.分析科学学报，2019，35（6）：817-823.10 张强，刘志涛，赵世文，等.2005-2013年云南省食用蜂蜜中毒情况分析J.现代预防医学，2015，42（19）：3496-3506.11 CAROLINE T G，SIMON M M，MARTIN D，et al.Development of a fast isocratic LC-MS/MS method for the high-throughput analysis of pyrrolizidine alkaloids in Australian毒扁豆碱钩吻碱番木鳖碱阿托品龙葵碱3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg93.184.987.286.983.588.490.581.184.688.782.386.991.486.990.43.782.955.964.995.666.446.936.654.323.785.956.445.382.804.28荷叶碱新乌头碱次乌头碱乌头碱吴茱萸碱3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg3 g/kg6 g/kg30 g/kg9084.693.687.991.390.286.384.684.387.78386.584.391.182.43.656.544.364.256.186.835.063.495.715713.546.804.513.145.11化合物添加浓度平均回收率/%RSD/%化合物添加浓度平均回收率/%RSD/%（续表3）王鹭骁 等：HPLC-Q-TOF-MS/MS快速筛查蜂蜜中26种生物碱72023，32（3）福建分析测试研究报告honeyJ.Food Additive Contam aminants：Part A，2015，32（2）：214-228.12 T/SATA 035-2022.蜂蜜中21种生物碱的测定 液相色谱串联质谱法S.深圳：深圳市分析测试协会，2022.13 Ann-Kristin Rausch，Robert Brockmeyer，Tanja Schwerdtle.Development，validation，and application of a multi-method for the determination of mycotoxins，plant growtnregulators，tropane alkaloids，and pestocodes in cereals bytwo-dimensional liquid chromatography tandem mass spectrometryJ.Analytical and Bioanalytical Chemistry，2022（413）：3041-3054.14 姜冰，丁涛，曹崇江，等.HPLC-MS/MS法同时测定动物源性食品中9种吡咯里西啶类生物碱的含量J.分析测试学报，2020，39（4）：473-478.15 蔡志斌，刘金明，韦慧慰，等.高效液相色谱-串联质谱法快速检测植物药酒中的40种生物碱J.食品安全质量检测学报，2022，13（4）：1201-1209.DOI(Digital Object Identifier)数字对象标识符，是一种对包括互联网信息在内的数字信息进行标识的工具。DOI 的结构式：./，分为前缀和后缀两部分中间用一斜杠分开，前缀中又以小圆点分为两部分。“doi:10.3969/j.issn.1009-8143.2013.01.008”是一篇本刊论文的数字对象标识符（DOI），其中“10”为数字对象标识符代码；“3969”为管理或发行者代码；“j.issn.1009-8143”福建分析测试 期刊的ISSN号；“2013.01.008”为这种期刊中某篇文章的代码，2013为出版年份，“01”是期数，“008”是文章顺序数。利用DOI码可以检索到这篇文章。中文DOI注册的DOI码与CrossRef DOI一样都是进入全球解析系统，成为国际期刊学术论文的一份子,都可以通过DOI全球解析系统的网站http:/www.doi.org进行解析服务，或者通过 DOI 的 URL 形式（http:/dx.doi.org/+DOI 号，如 http:/dx.doi.org/10.3969/j.issn.1009-8143.2013.01.008）在浏览器的地址栏中或网页的任意位置进行解析链接。本刊自2013年第1期开始启用DOI编码。福建分析测试 编辑部2023.58