学术讨论—第二章-造血细胞检验.ppt

第二章第二章造血细胞造血细胞(xbo)检验检验编辑(binj)制作 侯振江 李红岩 第一页，共一百页。第二章 造血细胞检验第一节 骨髓细胞形态(xngti)检查 血细胞从原始血细胞从原始细胞逐渐发育细胞逐渐发育(fy)(fy)为成熟为成熟细胞，具有一定的规律细胞，具有一定的规律性。性。细胞细胞(xbo)体积体积 细胞核细胞核 细胞质细胞质 核质比核质比 一、骨髓细胞形态演变规律第二页，共一百页。第二章 造血细胞检验 （一）细胞体积（一）细胞体积 原始细胞随着原始细胞随着(su zhe)(su zhe)细胞的逐步成熟，其体积逐渐细胞的逐步成熟，其体积逐渐变小。但巨核细胞系例外，细胞由小变大；粒细胞中，变小。但巨核细胞系例外，细胞由小变大；粒细胞中，早幼粒细胞比原始粒细胞略大。早幼粒细胞比原始粒细胞略大。一、骨髓细胞形态一、骨髓细胞形态(xngti)演变规律演变规律第三页，共一百页。第二章 造血细胞检验 （二）细胞核（二）细胞核 1.1.大小大小 细胞核一般由大变小，但巨核细胞由小细胞核一般由大变小，但巨核细胞由小变大。变大。2.2.核形核形 由圆形或卵圆形逐渐变为凹陷由圆形或卵圆形逐渐变为凹陷,甚至分叶甚至分叶（粒细胞、巨核细胞），但淋巴细胞和浆细胞变化（粒细胞、巨核细胞），但淋巴细胞和浆细胞变化不明显不明显(mngxin)(mngxin)，成熟红细胞核消失。，成熟红细胞核消失。3.3.核质比例核质比例 一般由大逐渐变小。一般由大逐渐变小。一、骨髓细胞形态一、骨髓细胞形态(xngti)演变规律演变规律第四页，共一百页。第二章 造血细胞检验 4.4.核染色质及核仁核染色质及核仁 是衡量血细胞是否处于原始是衡量血细胞是否处于原始和幼稚阶段的重要指标和幼稚阶段的重要指标(zhbio)(zhbio)之一。之一。5.5.核染色质核染色质 由疏松、细致到粗糙、紧密，并浓由疏松、细致到粗糙、紧密，并浓缩成块，甚至脱核（红系）缩成块，甚至脱核（红系）6.6.核膜核膜 一般由不清楚到清楚。一般由不清楚到清楚。7.7.核仁核仁 由清晰到模糊，最后消失。由清晰到模糊，最后消失。一、骨髓细胞形态一、骨髓细胞形态(xngti)演变规律演变规律第五页，共一百页。第二章 造血细胞检验 （三）细胞质（三）细胞质 1.1.胞质量胞质量 由少逐渐增多，但淋巴细胞系例外。由少逐渐增多，但淋巴细胞系例外。2.2.胞质颜色胞质颜色 从深蓝色逐渐变成淡蓝或淡红从深蓝色逐渐变成淡蓝或淡红色（粉红色），淋巴细胞仍保持色（粉红色），淋巴细胞仍保持(boch)(boch)淡蓝色（嗜淡蓝色（嗜碱性）。碱性）。一、骨髓细胞形态演变一、骨髓细胞形态演变(ynbin)规律规律第六页，共一百页。3.3.胞质颗粒胞质颗粒 从无到有，由少到多。粒细胞系的颗从无到有，由少到多。粒细胞系的颗粒由非特异性到特异性，可分为嗜酸性、嗜碱性、中性粒由非特异性到特异性，可分为嗜酸性、嗜碱性、中性三种三种(sn zhn)(sn zhn)颗粒。红细胞无颗粒。颗粒。红细胞无颗粒。（四）核质比（四）核质比 一般由大变小。一般由大变小。一、骨髓细胞形态一、骨髓细胞形态(xngti)演变规律演变规律第七页，共一百页。第二章 造血细胞检验骨髓中血细胞共骨髓中血细胞共分六个系统分六个系统粒细胞系粒细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶段幼稚阶段早幼早幼中幼中幼晚幼晚幼成熟阶段成熟阶段红细胞系红细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶段幼稚阶段早幼早幼中幼中幼晚幼晚幼成熟阶段成熟阶段巨核细胞系巨核细胞系淋巴细胞系淋巴细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶段幼稚阶段成熟阶段成熟阶段单核细胞系单核细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶段幼稚阶段成熟阶段成熟阶段浆细胞系浆细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶段幼稚阶段成熟阶段成熟阶段一、骨髓细胞形态一、骨髓细胞形态(xngti)演变规律演变规律第八页，共一百页。第二章 造血细胞检验血细胞发育血细胞发育(fy )演变规演变规律图律图第九页，共一百页。二、骨髓细胞形态二、骨髓细胞形态(xngti)特特征征原始粒细胞原始粒细胞早幼粒细胞早幼粒细胞第十页，共一百页。中性(zhngxng)分叶核粒细胞中性中幼粒中性中幼粒中性晚幼粒中性晚幼粒中性杆状核粒细胞中性杆状核粒细胞中性分叶核粒细胞中性分叶核粒细胞二、骨髓细胞形态二、骨髓细胞形态(xngti)特特征征第十一页，共一百页。原红细胞原红细胞中幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞晚幼红细胞早幼红细胞早幼红细胞成熟红细胞成熟红细胞二、骨髓细胞形态二、骨髓细胞形态(xngti)特特征征第十二页，共一百页。二、骨髓细胞形态二、骨髓细胞形态(xngti)特特征征原淋巴细胞原淋巴细胞幼淋巴细胞幼淋巴细胞 淋巴细胞淋巴细胞第十三页，共一百页。二、骨髓细胞形态二、骨髓细胞形态(xngti)特征特征原巨核细胞原巨核细胞幼巨核细胞幼巨核细胞颗粒巨核细胞颗粒巨核细胞产血小板巨核细胞产血小板巨核细胞血小板血小板第十四页，共一百页。二、骨髓细胞形态二、骨髓细胞形态(xngti)特征特征原单核细胞原单核细胞幼单核细胞幼单核细胞单核细胞单核细胞第十五页，共一百页。二、骨髓细胞形态二、骨髓细胞形态(xngti)特征特征原浆细胞原浆细胞幼浆细胞幼浆细胞浆细胞浆细胞第十六页，共一百页。第二章 造血细胞检验 三、骨髓中类似细胞(xbo)的鉴别 骨髓中有许多相似的细胞，分类时存在着一定骨髓中有许多相似的细胞，分类时存在着一定(ydng)(ydng)困难，在熟练掌握各种细胞形态的基础上，重点把握它困难，在熟练掌握各种细胞形态的基础上，重点把握它们的区别要点，才能正确划分其归属。们的区别要点，才能正确划分其归属。第十七页，共一百页。第二章 造血细胞检验原始粒细胞原始粒细胞原始红细胞原始红细胞胞体胞体1018微米1520微米，可见瘤状突起胞浆胞浆透明，天蓝色不透名，深蓝色，有油画感，核周有淡染区染色质染色质细砂粒状，均匀平坦如薄纱粗颗粒状，不均匀核膜核膜不清楚清楚核仁核仁25个，较小，清晰12个，较大，界限不清（一）原始（一）原始(yunsh)粒细胞与原始粒细胞与原始(yunsh)红细胞的鉴别红细胞的鉴别 三、骨髓中类似(li s)细胞的鉴别第十八页，共一百页。第二章 造血细胞检验原始原始(yunsh)红红 三、骨髓中类似细胞三、骨髓中类似细胞(xbo)的鉴别的鉴别第十九页，共一百页。第二章 造血细胞检验(二)原始(yunsh)粒细胞、原始(yunsh)淋巴细胞、原始(yunsh)单核细胞的鉴别原始粒细胞原始粒细胞原始淋巴细胞原始淋巴细胞原始单核细胞原始单核细胞胞体胞体1018微米，圆形较规则1018微米，圆形规则1520微米，圆形或不规则形，有伪足样突起胞浆胞浆天蓝色，透明天蓝色，透明，有核周淡染区灰蓝色，不透明核型核型圆形或椭圆形圆形或椭圆形圆形或不规则形，有折叠纤细网状染色质染色质细致的砂粒状，平坦，如薄纱颗粒状，稍粗纤细网状核膜核膜不清楚核膜浓厚，界限不清不清楚核仁核仁25个，较小，清晰12个，小而明显13个，大而清晰 三、骨髓三、骨髓(su)中类似细胞的鉴别中类似细胞的鉴别第二十页，共一百页。第二章 造血细胞检验原始淋巴细胞原始淋巴细胞第二十一页，共一百页。第二章 造血细胞检验(三)单核细胞与中性(zhngxng)中幼粒细胞的鉴别单核细胞单核细胞中性中幼粒细胞中性中幼粒细胞胞体胞体圆形或不规则形，可见伪足圆形，规则胞浆胞浆灰蓝，半透明，含无数散在粉尘样嗜天青颗粒，有时可见空泡淡红或淡蓝，透明，含中等量、大小较一致的特异性中性颗粒胞核胞核不规则，可呈肾形、马蹄形、S形或分叶形，有明显的扭曲、折叠椭圆或一侧开始扁平，可出现凹陷染色质染色质粗网状，疏松聚集成索块 三、骨髓中类似细胞三、骨髓中类似细胞(xbo)的鉴别的鉴别第二十二页，共一百页。第二章 造血细胞检验 三、骨髓三、骨髓(su)中类似细胞的鉴别中类似细胞的鉴别第二十三页，共一百页。第二章 造血细胞检验 三、骨髓三、骨髓(su)中类似细胞的鉴别中类似细胞的鉴别第二十四页，共一百页。第二章 造血细胞检验 三、骨髓中类似三、骨髓中类似(li s)细胞的鉴别细胞的鉴别第二十五页，共一百页。第二章 造血细胞检验(四)中幼红细胞、浆细胞、淋巴细胞鉴别(jinbi)中幼红细胞中幼红细胞浆细胞浆细胞淋巴细胞淋巴细胞胞体胞体圆形椭圆形圆形胞浆胞浆嗜多色性，不透明，无颗粒蓝色，不透明有泡沫感，有时可见红色镶边，边缘不规则，近核处有淡染区，常有空泡，可见颗粒天蓝色，透明，有核周淡染区，可见颗粒胞核胞核圆形，居中圆形或椭圆形，常偏位圆形，常偏一侧，有切迹染色质染色质粗密成块，如打碎的墨砚，中间有明显空隙，无色泽极粗密，凝成大块，似车轮状，中间有明显空隙，有色泽呈大块状，块与块之间无明显界限，有均匀光滑感 三、骨髓中类似三、骨髓中类似(li s)细胞的鉴别细胞的鉴别第二十六页，共一百页。第二章 造血细胞检验中幼红细胞中幼红细胞淋巴细胞淋巴细胞 三、骨髓三、骨髓(su)中类似细胞的鉴别中类似细胞的鉴别第二十七页，共一百页。第二章 造血细胞检验(五五)形态上不典型细胞的划分形态上不典型细胞的划分 造血细胞的发育是连续不断的过程，其阶段划分是造血细胞的发育是连续不断的过程，其阶段划分是人为的，可见到介于两个阶段之间的人为的，可见到介于两个阶段之间的“过渡型过渡型”细胞。细胞。通常细胞质和细胞核的发育是彼此同步通常细胞质和细胞核的发育是彼此同步(tngb)(tngb)的，的，但有时也可能速度不同，称为但有时也可能速度不同，称为“核浆发育不平衡核浆发育不平衡”。三、骨髓中类似三、骨髓中类似(li s)细胞的鉴别细胞的鉴别第二十八页，共一百页。第二章 造血细胞检验一般认为无论一般认为无论(wln)(wln)胞核或胞质，凡出现下一阶胞核或胞质，凡出现下一阶段特征的细胞，应归为较成熟阶段的细胞。段特征的细胞，应归为较成熟阶段的细胞。极难鉴别介于两个系统之间的细胞，在正常极难鉴别介于两个系统之间的细胞，在正常情况下如介于浆细胞与幼稚红细胞之间的细胞，情况下如介于浆细胞与幼稚红细胞之间的细胞，可划分为红细胞系；介于淋巴细胞与幼稚红细胞可划分为红细胞系；介于淋巴细胞与幼稚红细胞之间的细胞，在骨髓中归为红细胞系，在外周血之间的细胞，在骨髓中归为红细胞系，在外周血则归为淋巴细胞。则归为淋巴细胞。三、骨髓中类似三、骨髓中类似(li s)细胞的鉴别细胞的鉴别第二十九页，共一百页。第二章 造血细胞检验对于实在难以确定类型的细胞，可列入对于实在难以确定类型的细胞，可列入“分类分类不明细胞不明细胞”，出现较多时，可通过电镜、细胞化学，出现较多时，可通过电镜、细胞化学染色、免疫学等方法鉴别。染色、免疫学等方法鉴别。血细胞的形态受涂片制备和染色的影响较血细胞的形态受涂片制备和染色的影响较大，在识别细胞时须与同一张涂片上的其他大，在识别细胞时须与同一张涂片上的其他(qt)(qt)细胞细胞比较，切不可把单个细胞孤立起来，或机械地与图比较，切不可把单个细胞孤立起来，或机械地与图谱上典型的细胞进行比较，应根据细胞各方面的特谱上典型的细胞进行比较，应根据细胞各方面的特征全面综合分析，不可单凭个别特征下结论征全面综合分析，不可单凭个别特征下结论。三、骨髓中类似三、骨髓中类似(li s)细胞的鉴别细胞的鉴别第三十页，共一百页。第二章 造血细胞检验第二节 骨髓细胞形态学检查(jinch)概述概述标本采标本采集集骨髓涂骨髓涂片染色片染色骨髓细骨髓细胞检查胞检查正常骨正常骨髓象髓象骨髓象骨髓象分析分析骨髓骨髓(su)(su)象象检查检查第三十一页，共一百页。一、概述一、概述(i sh)(i sh)（一）适应证和禁忌证（一）适应证和禁忌证 .适应证适应证 包括贫血、出血、白血病；包括贫血、出血、白血病；全血细胞减少、白细胞增多伴有幼稚细胞、考虑血液寄生虫全血细胞减少、白细胞增多伴有幼稚细胞、考虑血液寄生虫病（如黑热病、疟疾等）、骨髓转移瘤和异常蛋白血症等；病（如黑热病、疟疾等）、骨髓转移瘤和异常蛋白血症等；不明原因不明原因(yunyn)(yunyn)的发热，肝、脾、淋巴结肿大，胸骨压痛、的发热，肝、脾、淋巴结肿大，胸骨压痛、恶病质。恶病质。凡遇上述情况之一，都可进行骨髓穿刺，以前三种最为常见。凡遇上述情况之一，都可进行骨髓穿刺，以前三种最为常见。第三十二页，共一百页。第二章 造血细胞检验一、概述一、概述(i sh)(i sh).禁忌证禁忌证 严重出血的血友病患者，禁忌严重出血的血友病患者，禁忌(jnj)(jnj)作骨髓穿刺；作骨髓穿刺；晚期孕妇慎做；晚期孕妇慎做；小儿及不合作者不宜作胸骨穿刺。小儿及不合作者不宜作胸骨穿刺。第三十三页，共一百页。第二章 造血细胞检验一、概述一、概述(i(i sh)sh)临床应用临床应用明确性诊断明确性诊断 符合性诊断符合性诊断 提示性诊断提示性诊断 排除性诊断排除性诊断 第三十四页，共一百页。第二章 造血细胞检验二、标本(biobn)采集（一）骨髓取材的部位（一）骨髓取材的部位 首选髂骨，其次是胸骨、棘突首选髂骨，其次是胸骨、棘突 。由于胸骨穿刺有。由于胸骨穿刺有一定的危险性，故首选髂前或髂后上棘。一定的危险性，故首选髂前或髂后上棘。2 2岁以下小儿岁以下小儿(xio r)(xio r)主张用胫骨粗隆穿刺。主张用胫骨粗隆穿刺。必必要要时时应应多多部部位位取取材材，以以便便全全面面了了解解骨骨髓髓的的造造血血情况。情况。第三十五页，共一百页。二、标本(biobn)采集（二）（二）常见骨髓常见骨髓(su)(su)穿刺部位的特点穿刺部位的特点 穿刺部位特 点髂后上棘此部位骨质薄，进针容易，骨髓液丰富，被血液稀释的可能性小，故髂后上棘为临床上首选的穿刺部位髂前上棘此部位骨质硬、骨髓腔小，易导致穿刺失败，所以髂前上棘常用于翻身困难、需多部位穿刺等患者胸骨胸骨是人体骨髓造血功能最旺盛的部位，但胸骨后有重要脏器，故临床上不常用。当其他常规部位穿刺取材不佳时，可考虑胸骨穿刺，但必须由操作经验丰富的人员来做其他部位小于2岁患者还可选择胫骨头内侧。其他还包括腰椎棘突穿刺、定位穿刺。定位穿刺临床上常用于骨髓转移癌、浆细胞瘤等第三十六页，共一百页。第二章 造血细胞检验例：骼后上棘穿刺术例：骼后上棘穿刺术 患患者者侧侧卧卧，其其上上面面的的腿腿向向胸胸部部弯弯曲曲，下下面面的的腿腿伸伸直直，使使腰腰骸骸部部向向后后突突出出，髂髂后后上上棘棘明明显显突突出出于于臀臀部部之之上上。也也可可在在相相当当于于第第5 5腰腰椎椎水水平平，向向上上约约3 3cmcm，用用手手触触摸摸其其钝钝圆圆形形突突起起处处。此此处骨密质薄，骨髓腔大，容易刺入。处骨密质薄，骨髓腔大，容易刺入。用用碘碘酒酒、酒酒精精消消毒毒(xio(xio d)d)局局部部，戴戴消消毒毒(xio(xio d)d)手手套套，将将孔孔布的孔口对准并盖于已消毒布的孔口对准并盖于已消毒(xio d)(xio d)的穿刺部位。的穿刺部位。注注射射2%2%的的普普鲁鲁卡卡因因1 12 2m1m1，麻麻醉醉局局部部皮皮肤肤、皮皮下下组组织织并并深深至至骨膜，揉摩注射处，使药液扩大麻醉范围。骨膜，揉摩注射处，使药液扩大麻醉范围。二、标本(biobn)采集 第三十七页，共一百页。以以左左手手拇拇指指(mzh)(mzh)和和食食指指将将穿穿刺刺部部位位的的皮皮肤肤压压紧紧固固定定，右右手手持持穿穿刺刺针针与与骨骨棘棘面面垂垂直直，旋旋转转刺刺入入髂髂后后上上棘棘，达达骨骨髓髓腔腔时时有有空空松松感感，深度约为针头达骨膜后再刺入深度约为针头达骨膜后再刺入l cml cm左右。左右。拔拔出出针针芯芯，接接l0 l0 mlml干干燥燥注注射射器器，轻轻轻轻负负压压抽抽取取，抽抽取取骨骨髓髓液不超过液不超过0.20.2mlml，立即置载玻片上，并涂片。立即置载玻片上，并涂片。必必要要时时再再取取骨骨髓髓液液0.50.52 2m1m1，置置肝肝素素抗抗凝凝管管内内，作作有有核核细细胞计数等项检查。胞计数等项检查。拔出穿刺针，压迫伤口，敷以消毒纱布。拔出穿刺针，压迫伤口，敷以消毒纱布。二、标本(biobn)采集 第三十八页，共一百页。第二章 造血细胞检验 骨髓取材满意的指标：骨髓取材满意的指标：(1)(1)抽吸骨髓时，病人抽吸骨髓时，病人(bngrn)(bngrn)有特殊的酸痛感。有特殊的酸痛感。(2)(2)骨髓液抽取应在骨髓液抽取应在0.20.2mlml以内，否则易于稀释。以内，否则易于稀释。(3)(3)骨髓涂片中含有骨髓小粒或脂肪滴。骨髓涂片中含有骨髓小粒或脂肪滴。(4)(4)显显微微镜镜检检查查，可可见见骨骨髓髓的的特特有有细细胞胞，如如巨巨核核细细胞胞、浆浆细细胞胞、组组织织细细胞胞、组组织织嗜嗜碱碱细细胞胞、成成骨骨细细胞胞、破骨细胞等。破骨细胞等。(5)(5)髓髓细细胞胞分分类类，中中性性杆杆状状核核粒粒细细胞胞与与分分叶叶核核粒粒细细胞之比大于血涂片。胞之比大于血涂片。二、标本(biobn)采集 第三十九页，共一百页。第二章 造血细胞检验 取材失败取材失败 部部分分稀稀释释：骨骨髓髓有有核核细细胞胞减减少少，成成熟熟细细胞胞比比例例(bl)(bl)增加。增加。完全稀释：无骨髓成分，与血片一样。完全稀释：无骨髓成分，与血片一样。二、标本(biobn)采集 第四十页，共一百页。第二章 造血细胞检验骨髓穿刺一般由临床医生操作，其注意事项如下：骨髓穿刺一般由临床医生操作，其注意事项如下：.严严格格无无菌菌，预预防防感感染染。初初诊诊患患者者于于治治疗疗前前作作骨骨髓髓穿穿刺刺以以明明确确诊断。死亡病例需检查时，应在死亡半小时内进行。诊断。死亡病例需检查时，应在死亡半小时内进行。.抽抽吸吸骨骨髓髓液液时时动动作作要要缓缓慢慢，吸吸取取量量以以0.10.10.20.2m1m1为为宜宜，抽抽吸吸骨骨髓髓液液用用力力过过大大、过过快快，易易使使骨骨髓髓抽抽吸吸量量过过多多（0.20.2m1m1）造造成成(zo(zo chn)chn)稀稀释释。需需做做有有核核细细胞胞计计数数、细细菌菌培培养养、造造血血细细胞胞培培养养、红红斑斑狼狼疮疮细细胞胞检检查查时时，再再抽抽吸吸0.50.52.0 2.0 m1m1骨骨髓髓液液肝肝素素抗抗凝送检。凝送检。（三）（三）标本标本(biobn)(biobn)采集的质量保证采集的质量保证二、标本(biobn)采集 第四十一页，共一百页。第二章 造血细胞检验 .多多部部位位穿穿刺刺可可提提高高某某些些疾疾病病的的诊诊断断率率。如如慢慢性性再再障障、恶恶性性组组织织细细胞胞病病等等，多多发发性性骨骨髓髓瘤瘤、转转移移癌癌等等宜宜在在X X线线检检查查(jinch)(jinch)发现有病变或有骨压痛的部位穿刺，可提高阳性率。发现有病变或有骨压痛的部位穿刺，可提高阳性率。二、标本(biobn)采集 第四十二页，共一百页。第二章 造血细胞检验干抽（干抽（dry tapdry tap）是指非技术操作或穿刺不是指非技术操作或穿刺不当而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。常见于：当而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。常见于：.原发性和继发性骨髓纤维化症。原发性和继发性骨髓纤维化症。.骨骨髓髓极极度度增增生生，细细胞胞过过于于紧紧密密结结实实，如如白白血血病病、真性红细胞增多症等。真性红细胞增多症等。.骨髓增生减低，如再生障碍性贫血。骨髓增生减低，如再生障碍性贫血。.肿肿瘤瘤(zhngli)(zhngli)骨骨髓髓浸浸润润，包包括括恶恶性性淋淋巴巴瘤瘤、多多发发性性骨骨髓瘤、骨髓转移癌。髓瘤、骨髓转移癌。（四）干抽（四）干抽二、标本(biobn)采集 第四十三页，共一百页。第二章 造血细胞检验当发生干抽时，有时在针头中可有少量骨髓组织，当发生干抽时，有时在针头中可有少量骨髓组织，如用针心将其推出，可制作一张涂片供检查。一般如用针心将其推出，可制作一张涂片供检查。一般(ybn)(ybn)可更换部位再行穿刺，部分病例（如骨髓纤维化）可更换部位再行穿刺，部分病例（如骨髓纤维化）必须作骨髓活检。必须作骨髓活检。二、标本(biobn)采集 第四十四页，共一百页。第二章 造血细胞检验 三、骨髓(su)涂片、染色及其质量保证 骨髓涂片及染色方法，与血涂片基本相同，但含骨髓涂片及染色方法，与血涂片基本相同，但含有有(hn yu)(hn yu)骨髓小粒和脂肪，有核细胞数量多，较血液骨髓小粒和脂肪，有核细胞数量多，较血液浓稠，推片时角度要略小，速度要慢，涂片过厚可影浓稠，推片时角度要略小，速度要慢，涂片过厚可影响细胞形态观察。响细胞形态观察。第四十五页，共一百页。第二章 造血细胞检验 骨髓涂片和染色的注意事项：骨髓涂片和染色的注意事项：1.1.载玻片要洁净。载玻片要洁净。2.2.推玻片与载玻片之间成推玻片与载玻片之间成3030角为宜，角度越小，推片角为宜，角度越小，推片速度越慢，骨髓涂片越薄。速度越慢，骨髓涂片越薄。3.3.抽取骨髓液后应立即制备骨髓涂片。选择含骨髓小粒抽取骨髓液后应立即制备骨髓涂片。选择含骨髓小粒多的标本作涂片效果更佳。多的标本作涂片效果更佳。4.4.涂片一般不用涂片一般不用(byng)(byng)抗凝剂。抗凝剂。5.5.体积较大的特殊细胞多在片尾和边缘。体积较大的特殊细胞多在片尾和边缘。6.6.涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，不能涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，不能用火烤。用火烤。三、骨髓涂片(t pin)、染色及其质量保证 第四十六页，共一百页。第二章 造血细胞检验7.7.骨髓中有核细胞较多，涂片固定和染色时间较血骨髓中有核细胞较多，涂片固定和染色时间较血涂片稍长，以保证幼稚细胞着色均匀，结构涂片稍长，以保证幼稚细胞着色均匀，结构(jigu)(jigu)清晰。清晰。染色时间的长短与气温、染料的性质有关。染色时间的长短与气温、染料的性质有关。8.8.若染色太浅，可于涂片干燥后重染；染色过深或若染色太浅，可于涂片干燥后重染；染色过深或有沉淀物，可滴加甲醇数滴，稍停后冲洗。有沉淀物，可滴加甲醇数滴，稍停后冲洗。9.9.制备的骨髓涂片宜全部送检，供染色选择、血细胞制备的骨髓涂片宜全部送检，供染色选择、血细胞化学染色或会诊用，送骨髓涂片的同时最好送血涂片。化学染色或会诊用，送骨髓涂片的同时最好送血涂片。三、骨髓(su)涂片、染色及其质量保证 第四十七页，共一百页。第二章 造血细胞检验四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)骨髓细胞检查骨髓细胞检查骨髓涂片检查骨髓涂片检查血涂片检查血涂片检查填报告单填报告单标本保存与资料标本保存与资料存档存档第四十八页，共一百页。第二章 造血细胞检验（一）（一）骨髓涂片检查骨髓涂片检查 1.1.低倍镜观察低倍镜观察 (1)(1)观察取材、涂片、染色情况是否满意。观察取材、涂片、染色情况是否满意。(2)(2)判判断断有有核核细细胞胞(xbo)(xbo)的的增增生生程程度度。低低倍倍镜镜下下选选择择细细胞胞(xbo)(xbo)分分布布均均匀匀处处，根根据据骨骨髓髓片片中中有有核核细细胞胞(xbo)(xbo)的的密密度度或或有有核核细细胞胞(xbo)(xbo)与与成成熟熟红红细细胞胞(xbo)(xbo)的的比比例估计骨髓有核细胞例估计骨髓有核细胞(xbo)(xbo)的增生程度。的增生程度。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第四十九页，共一百页。第二章 造血细胞检验增生极度活跃：增生极度活跃：1 1：1 1 500500个有核细胞个有核细胞 各种白血病各种白血病 增生明显活跃：增生明显活跃：1 1：10 20010 200500 500 白血病白血病 、增生性贫血、增生性贫血 增生活跃：增生活跃：1 1：20 2020 20200 200 正常骨髓象、某些贫血正常骨髓象、某些贫血 增生低下：增生低下：1 1：50 350 320 20 造血功能造血功能(gngnng)(gngnng)低下低下 增生极度低下：增生极度低下：1 1：200 200 3 3 再生障碍性贫血再生障碍性贫血 骨髓骨髓(su)有核细胞增生程度五级分类法有核细胞增生程度五级分类法有核细胞有核细胞增生程度增生程度 有核细胞有核细胞/成熟红细胞成熟红细胞 平均低倍视野平均低倍视野有核细胞数有核细胞数常见病例常见病例四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第五十页，共一百页。第二章 造血细胞检验增生极度增生极度(jd)低低下下增生增生(zngshng)低下低下增生增生(zngshng)极极度活跃度活跃增生明显活跃增生明显活跃增生活跃增生活跃第五十一页，共一百页。第二章 造血细胞检验 (3)(3)巨核细胞的计数及分类：巨核细胞的计数及分类：低倍镜下观察并计数全片巨核细胞总数，如将骨低倍镜下观察并计数全片巨核细胞总数，如将骨髓膜标准化为髓膜标准化为1.5cm3.0c1.5cm3.0c,则巨核细胞参考值为则巨核细胞参考值为7 73535个。个。血小板减少性紫癜或其他血小板减少性紫癜或其他(qt)(qt)原因引起血小板减少原因引起血小板减少时，应进行巨核细胞分类，以油镜确定巨核细胞的阶时，应进行巨核细胞分类，以油镜确定巨核细胞的阶段，分类至少观察段，分类至少观察2525个巨核细胞，求出巨核细胞各阶段个巨核细胞，求出巨核细胞各阶段百分率。百分率。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第五十二页，共一百页。第二章 造血细胞检验 (4)(4)观察骨髓涂片边缘和尾部，注意寻找有观察骨髓涂片边缘和尾部，注意寻找有无体积较大散在或成堆出现的特殊病理细胞无体积较大散在或成堆出现的特殊病理细胞:如如转移癌细胞、恶性组织细胞、戈谢氏细胞、尼转移癌细胞、恶性组织细胞、戈谢氏细胞、尼曼曼-匹克细胞、但需油镜观察加以确证。这些细匹克细胞、但需油镜观察加以确证。这些细胞的发现，对有关疾病的诊断胞的发现，对有关疾病的诊断(zhndun)(zhndun)具有肯定意义。具有肯定意义。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第五十三页，共一百页。第二章 造血细胞检验 2.2.油镜观察油镜观察 (1)(1)骨骨髓髓细细胞胞分分类类先先浏浏览览一一下下各各类类细细胞胞的的形形态态特特点，再进行细胞分类。点，再进行细胞分类。白白血血病病细细胞胞形形态态学学不不容容易易识识别别时时,可可先先染染组组织织化化学学协协助助(xizh)(xizh)诊诊断断,然然后后再再进进行行细细胞胞分分类类。如如有有的的标标本本形形态态学学不不典典型型时时，先先分分类类，再再结结合合临临床床综综合合分分析析，描述骨髓形态学特点。描述骨髓形态学特点。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第五十四页，共一百页。第二章 造血细胞检验 (2)(2)骨髓细胞分类先浏览该涂片上各类细胞的形态特点，骨髓细胞分类先浏览该涂片上各类细胞的形态特点，看是否容易识别看是否容易识别(shbi)(shbi)；然后分类，要求计数；然后分类，要求计数200200或或500500个有个有核细胞核细胞;巨核细胞、破碎细胞、分裂相细胞不计数在有核巨核细胞、破碎细胞、分裂相细胞不计数在有核细胞百分比内，对巨核细胞单独进行计数和分类细胞百分比内，对巨核细胞单独进行计数和分类 ；按各；按各细胞的种类、发育阶段分别记录，并计算出百分比值。细胞的种类、发育阶段分别记录，并计算出百分比值。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第五十五页，共一百页。第二章 造血细胞检验 (3)(3)各细胞系形态学观察各细胞系形态学观察 仔细观察各系、各阶段细胞的形态是否正常，例如：仔细观察各系、各阶段细胞的形态是否正常，例如：1 1）粒细胞系统：）粒细胞系统：粒细胞的增生情况，各阶段细胞所占的比例，各期粒细胞的大小粒细胞的增生情况，各阶段细胞所占的比例，各期粒细胞的大小(dxio)(dxio)形态、核形、有无双核粒细胞、核浆发育不平衡现象、成熟形态、核形、有无双核粒细胞、核浆发育不平衡现象、成熟粒细胞有无分叶过多或过少。粒细胞有无分叶过多或过少。细胞核染色质结构；核仁大小、数量；胞质量的多少，颜色深浅；颗粒细胞核染色质结构；核仁大小、数量；胞质量的多少，颜色深浅；颗粒的多少，有无中毒性颗粒及空泡变化。的多少，有无中毒性颗粒及空泡变化。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第五十六页，共一百页。第二章 造血细胞检验2）红细胞系统：红细胞系统：各期幼红细胞的增生情况，各阶段幼红细胞所占的比例，各期幼红细胞的增生情况，各阶段幼红细胞所占的比例，幼红细胞的大小形态，有无巨幼红细胞、核形异常（双核、多幼红细胞的大小形态，有无巨幼红细胞、核形异常（双核、多核、畸形核、核碎裂、核固缩、核浆发育不平衡）。核、畸形核、核碎裂、核固缩、核浆发育不平衡）。细胞核染色质结构，有无核仁及数量。细胞核染色质结构，有无核仁及数量。胞质量胞质量(zhling)(zhling)、颜色、有无包涵物（豪、颜色、有无包涵物（豪-焦氏小体、嗜碱性点彩）焦氏小体、嗜碱性点彩）。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第五十七页，共一百页。第二章 造血细胞检验 成熟红细胞的大小形态成熟红细胞的大小形态(xngti)(xngti)，有无异常红细，有无异常红细胞，如球形、椭圆形、镰刀形、靶形、盔形、三角胞，如球形、椭圆形、镰刀形、靶形、盔形、三角形、棘形、泪滴样、大红细胞、多色性红细胞、嗜形、棘形、泪滴样、大红细胞、多色性红细胞、嗜碱性点彩红细胞、卡波环等。碱性点彩红细胞、卡波环等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第五十八页，共一百页。第二章 造血细胞检验3）巨核细胞系统：）巨核细胞系统：全片巨核细胞的数量，各阶段细胞的比例，有无成熟障全片巨核细胞的数量，各阶段细胞的比例，有无成熟障碍现象，有无病理性改变，如微小巨核细胞、小巨核细胞、碍现象，有无病理性改变，如微小巨核细胞、小巨核细胞、单圆核巨核细胞、多核巨核细胞。单圆核巨核细胞、多核巨核细胞。同时观察血小板的数量、大小同时观察血小板的数量、大小(dxio)形态，是成簇还是散形态，是成簇还是散在，有无巨大血小板，畸形血小板。在，有无巨大血小板，畸形血小板。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第五十九页，共一百页。第二章 造血细胞检验4）其他细胞系：其他细胞系：如单核细胞、淋巴细胞、浆细胞系统及其他细胞：如单核细胞、淋巴细胞、浆细胞系统及其他细胞：该类细胞占有核细胞的比例，细胞形态有无异常该类细胞占有核细胞的比例，细胞形态有无异常(ychng)，有无原、幼阶段的细胞。如疾病与这类细胞无相关性，有无原、幼阶段的细胞。如疾病与这类细胞无相关性，可作简要描述，如有相关性要作为重点进行描述。可作简要描述，如有相关性要作为重点进行描述。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第六十页，共一百页。第二章 造血细胞检验 5 5）有无特殊细胞、特殊病理）有无特殊细胞、特殊病理(bngl)(bngl)细胞：如恶细胞：如恶性组织细胞、戈谢氏细胞、尼曼性组织细胞、戈谢氏细胞、尼曼-匹克细胞、转匹克细胞、转移性肿瘤细胞、恶性淋巴瘤细胞。移性肿瘤细胞、恶性淋巴瘤细胞。6 6）有无寄生虫。）有无寄生虫。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第六十一页，共一百页。（二）血涂片二）血涂片(t pin)检查检查 1 1血涂片染色血涂片染色(rns)(rns)2 2血涂片分类血涂片分类 在染色良好的血涂片体尾交界处分类至在染色良好的血涂片体尾交界处分类至少少100100个白细胞，同时注意观察各种细胞（包括红细个白细胞，同时注意观察各种细胞（包括红细胞和血小板）的形态，还要观察血涂片的其他部位胞和血小板）的形态，还要观察血涂片的其他部位 3.3.计算计算 计算各类各阶段细胞的相对含量计算各类各阶段细胞的相对含量 4.4.血涂片特征描述血涂片特征描述 一般要描述血涂片中各类细胞的一般要描述血涂片中各类细胞的数量、大小、形态、染色及结构有无异常，血小板的数量、大小、形态、染色及结构有无异常，血小板的分布，有无寄生虫及其他异常细胞等。分布，有无寄生虫及其他异常细胞等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第六十二页，共一百页。5.5.血涂片观察的内容血涂片观察的内容(nirng)(nirng)(1)(1)粒细胞：观察中性杆状核粒细胞、分叶核粒细胞，粒细胞：观察中性杆状核粒细胞、分叶核粒细胞，嗜酸性和嗜碱性粒细胞的数量及形态（包括胞体、胞核及嗜酸性和嗜碱性粒细胞的数量及形态（包括胞体、胞核及胞质），注意有无原始粒细胞、幼稚粒细胞，粒细胞分叶胞质），注意有无原始粒细胞、幼稚粒细胞，粒细胞分叶过多或过少、双核、巨幼样变，粒细胞毒性改变及棒状小过多或过少、双核、巨幼样变，粒细胞毒性改变及棒状小体等。体等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第六十三页，共一百页。5.5.血涂片观察血涂片观察(gunch)(gunch)的内容的内容 (2)(2)红细胞：观察红细胞的大小、形态、染色和结红细胞：观察红细胞的大小、形态、染色和结构变化，如有无大红细胞、小红细胞、球形红细胞、靶构变化，如有无大红细胞、小红细胞、球形红细胞、靶形红细胞、嗜多色性红细胞、有核红细胞、嗜碱性点彩形红细胞、嗜多色性红细胞、有核红细胞、嗜碱性点彩红细胞、卡博环和豪周小体等。红细胞、卡博环和豪周小体等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第六十四页，共一百页。(3)3)淋巴细胞淋巴细胞:观察淋巴细胞数量及形态观察淋巴细胞数量及形态(xngti)(xngti)，有无原始淋巴细胞、幼稚淋巴细胞及异型淋巴细胞有无原始淋巴细胞、幼稚淋巴细胞及异型淋巴细胞等。等。(4)(4)单核细胞单核细胞:观察单核细胞数量及形态，注意有无原观察单核细胞数量及形态，注意有无原始、幼稚单核细胞和棒状小体等。始、幼稚单核细胞和棒状小体等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第六十五页，共一百页。(5)(5)血小板血小板:观察血小板数量、大小、形状、染色观察血小板数量、大小、形状、染色和分布等，尤其和分布等，尤其(yuq)(yuq)注意有无大血小板、巨大血小注意有无大血小板、巨大血小板、畸形血小板和巨核细胞等。板、畸形血小板和巨核细胞等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第六十六页，共一百页。(6)(6)浆细胞浆细胞:观察浆细胞数量及形态，注意有无原始、观察浆细胞数量及形态，注意有无原始、幼稚浆细胞等。幼稚浆细胞等。(7)(7)其他其他:有无寄生虫及其他明显异常细胞，例如有无寄生虫及其他明显异常细胞，例如(lr)(lr)疟原虫、恶性组织细胞、恶性淋巴瘤细胞、吞疟原虫、恶性组织细胞、恶性淋巴瘤细胞、吞噬细胞等。噬细胞等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第六十七页，共一百页。血象和骨髓血象和骨髓血象和骨髓血象和骨髓象的关系象的关系象的关系象的关系骨髓象相似而血象有区别骨髓象相似而血象有区别骨髓象相似而血象有区别骨髓象相似而血象有区别骨髓象变化不显著而血象有显著骨髓象变化不显著而血象有显著骨髓象变化不显著而血象有显著骨髓象变化不显著而血象有显著异常异常异常异常 骨髓象有区别而血象相似骨髓象有区别而血象相似骨髓象有区别而血象相似骨髓象有区别而血象相似 骨髓象有显著异常而血象变化不骨髓象有显著异常而血象变化不骨髓象有显著异常而血象变化不骨髓象有显著异常而血象变化不显著显著显著显著血象中细胞较骨髓中的细胞成熟血象中细胞较骨髓中的细胞成熟血象中细胞较骨髓中的细胞成熟血象中细胞较骨髓中的细胞成熟四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(jinch)第六十八页，共一百页。第二章 造血细胞检验（三）骨髓细胞（三）骨髓细胞学检查学检查(jinch)报报告单的填写告单的填写填写的主填写的主填写的主填写的主要内容要内容要内容要内容患者基本信息及本次骨髓涂片号、骨髓患者基本信息及本次骨髓涂片号、骨髓患者基本信息及本次骨髓涂片