DB37_T 4623—2023土壤中27种农药及其代谢物残留量的测定++液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 13.080 CCS Z 18 37 山东省地方标准 DB37/T 46232023 土壤中 27 种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of 27 pesticides and metabolites residues in soil Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 2023-07-24 发布 2023-08-24 实施 山东省市场监督管理局 发 布 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 原理.1 5 试剂和材料.1 6 仪器.2 7 试样制备.2 8 分析步骤.2 9 结果计算.4 10 精密度.4 11 定量限.4 附录 A（资料性）27 种农药及其代谢物中英文名称、CAS 号和分子式.5 附录 B（资料性）27 种农药及其代谢物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数.6 附录 C（资料性）27 种农药及其代谢物多反应监测（MRM）质量色谱图.7 附录 D（资料性）精密度的表示和计算.14 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。本文件由山东省农业标准化技术委员会种植业标准化分技术委员会归口。土壤中 27 种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 1 范围 本文件规定了土壤中27种农药及其代谢物残留量的液相色谱-串联质谱法测定的原理、试剂和材料、仪器、试样制备、分析步骤、结果计算、精密度及定量限。本文件适用于土壤中27种农药及其代谢物残留量的测定。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 原理 试样经乙腈提取，提取液盐析离心后，取上清液，经分散固相萃取净化，液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。5 试剂和材料 除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水应为GB/T 6682规定的一级水。试剂 5.1 5.1.1 乙腈（CH3CN，CAS 号：75-05-8）：色谱纯。5.1.2 甲醇（CH3OH，CAS 号：67-56-1）：色谱纯。5.1.3 乙酸铵（CH3COONH4，CAS 号：631-61-8）：优级纯。5.1.4 氯化钠（NaCl，CAS 号：7647-14-5）。5.1.5 无水硫酸镁（MgSO4，CAS 号：7487-88-9）。5.1.6 甲酸（HCOOH，CAS 号：64-18-6）：色谱纯。溶液配制 5.2 乙酸铵-甲酸水溶液（2 mmol/L）：称取0.154 g乙酸铵，用0.1%甲酸水溶液溶解并稀释至1 000 mL，摇匀。标准品 5.3 27种农药及其代谢物标准品，见附录A，纯度应不小于96%。标准溶液配制 5.4 5.4.1 标准储备溶液（1 000 mg/L）：准确称取 10 mg（精确至 0.01 mg）各农药标准品，用甲醇溶解并分别定容至 10 mL，以不高于-18 的温度条件避光保存，有效期 1 年。5.4.2 混合标准储备溶液（20 mg/L）：准确吸取 1 mL 标准储备溶液（5.4.1）于 50 mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度，以不高于-18 的温度条件避光保存，有效期 6 个月。材料 5.5 5.5.1 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：粒径 40 m60 m。5.5.2 石墨化炭黑（GCB）：粒径 40 m120 m。5.5.3 微孔滤膜（有机相）：0.22 m。6 仪器 液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。6.1 分析天平：感量 0.01 mg 和感量 0.01 g。6.2 冷冻干燥机。6.3 恒温水浴振荡器（往复式）。6.4 涡旋混合器。6.5 超声波清洗器：超声功率 500 W700 W。6.6 离心机：转速不低于 5 000 r/min。6.7 土壤筛：孔径 2 mm。6.8 7 试样制备 取0 cm10 cm深的地表土1 kg，除去其中的异物（枝棒、叶片、石子、动植物残体等），碾碎后混匀，用四分法留样250 g。将样品置于冷冻干燥机中冻干24 h，并过2 mm孔径的土壤筛。将筛过的细土装入洁净容器，密封避光，粘贴唯一性标识，于不高于-18 的温度条件保存。8 分析步骤 提取 8.1 称取10 g 试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞刻度离心管中，加入10 mL水浸泡1 h，加入10.0 mL乙腈，于50 水浴振荡器上振荡提取30 min，于50 水浴超声提取10 min，加入5 g氯化钠，剧烈振荡1 min，4 500 r/min离心5 min，待净化。净化 8.2 吸取上清液5 mL至内含700 mg无水硫酸镁、100 mg PSA 的刻度离心管中，若试样为黑土可另加入12 mg GCB。涡旋混匀1 min，4 000 r/min离心5 min，吸取上清液过微孔滤膜，待测定。液相色谱参考条件 8.3 液相色谱参考条件如下：a)色谱柱：C18，2.0 mmi.d.（内径）75 mm，粒径 1.6 m，或相当者；b)柱温：40；c)流速：0.2 mL/min；d)进样量：1.0 L；e)流动相组成：A 相为乙酸铵-甲酸水溶液（5.2），B 相为甲醇，流动相梯度条件见表 1。表1 流动相及其梯度条件（VA+VB）时间 min VA VB 0.0 90 10 1.0 90 10 3.0 50 50 6.0 25 75 8.0 5 95 10.0 5 95 11.0 90 10 质谱参考条件 8.4 质谱参考条件如下：a)离子源：电喷雾离子源（ESI）；b)扫描方式：正离子和负离子同时扫描；c)加热模块温度：400；d)DL 管温度：250；e)碰撞气（氩气）压力：230 kPa；f)干燥气（氮气）流速：15 L/min；g)多反应监测（MRM）：每种农药分别选择一对定量离子和定性离子，按照出峰顺序，分时段分别检测，每种农药的离子对质谱参数和保留时间参见附录 B。基质匹配标准工作曲线 8.5 选择空白土壤样品按照8.1、8.2进行前处理，得到空白基质提取液。定量吸取混合标准储备溶液（5.4.2），用空白基质提取液逐级稀释成质量浓度为0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L的系列基质匹配标准工作溶液，供液相色谱-串联质谱仪测定。以测得定量离子峰面积为纵坐标、对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。定性及定量 8.6 8.6.1 保留时间 被测试样中目标化合物色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在2.5%之内。8.6.2 离子丰度比 在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在目标化合物。本方法中标准物质多反应监测质量色谱图参见附录C。表2 定性时离子丰度比的最大允许偏差 离子丰度比%50 2050 1020 10 允许相对偏差%20 25 30 50 8.6.3 定量 外标法定量。试样溶液的测定 8.7 将基质匹配标准工作溶液和试样溶液依次注入液相色谱-串联质谱仪中，以保留时间和离子丰度比定性，测得定量离子质量色谱图峰面积。待测样液中目标化合物的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，否则应使用空白基质提取液将其按照一定倍数稀释至线性范围内，再进行分析。平行试验 8.8 按8.18.6步骤对同一试样进行平行试验测定。空白试验 8.9 除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。9 结果计算 试样中待测物的残留量，按公式（1）计算：=(1)式中：试样中待测物残留量的数值，单位为毫克每千克（mg/kg）；从标准工作曲线中得到的待测物质量浓度的数值，单位为毫克每升（mg/L）；V 提取液体积的数值，单位为毫升（mL）；m 试样质量的数值，单位为克（g）；n 测定浓度超出线性范围时，使用空白基质提取液稀释的倍数。计算结果以重复性条件下获得的2次独立测定结果的算术平均值表示，保留2位有效数字，含量超过1 mg/kg时，保留3位有效数字。10 精密度 在重复性条件下，获得的2次独立测定结果的绝对差值不应超过重复性限（r），参见附录D。在再现性条件下，获得的2次独立测定结果的绝对差值不应超过再现性限（R），参见附录D。11 定量限 本文件方法对各种化合物的定量限为0.005 mg/kg。A A 附录A （资料性）27 种农药及其代谢物中英文名称、CAS 号和分子式 27种农药及其代谢物中英文名称、CAS号和分子式，见表A.1。表A.1 27 种农药及其代谢物中英文名称、CAS 号和分子式 农药中文名称 农药英文名称 CAS号 分子式 速灭威 Metolcarb 1129-41-5 C9H11NO2 扑草净 Prometryn 7287-19-6 C10H19N5S 三环唑 Tricyclazole 41814-78-2 C9H7N3S 三唑酮 Triadimefon 43121-43-3 C14H16ClN3O2 多菌灵 Carbendazim 10605-21-7 C9H9N3O2 吡虫啉 Imidacloprid 105827-78-9 C9H10ClN5O2 3-羟基克百威 Carbofuran-3-hydroxy 16655-82-6 C12H15NO4 戊唑醇 Tebuconazole 107534-96-3 C16H22ClN3O 克百威 Carbofuran 1563-66-2 C12H15NO3 噻嗪酮 Buprofezin 69327-76-0 C16H23N3OS 苯醚甲环唑 Difenoconazole 119446-68-3 C19H17Cl2N3O3 氯虫苯甲酰胺 Chloantraniliprole 500008-45-7 C18H14BrCl2N5O2 烯酰吗啉 Dimethomorph 110488-70-5 C21H22ClNO4 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐 Emamectin benzoate 137512-74-4 C49H77NO13 多效唑 Paclobutrazol 76738-62-0 C15H20ClN3O 精异丙甲草胺(S)-Metolachlor 87392-12-9 C15H22ClNO2 抗蚜威 Pirimicarb 23103-98-2 C11H18N4O2 莠去津 Atrazine 102029-43-6 C8H14ClN5 乙草胺 Acetochlor 34256-82-1 C14H20ClNO2 哒螨灵 Pyridaben 96489-71-3 C19H25ClN2OS 阿维菌素 Abamectin 71751-41-2 C49H74O14 咯菌腈 Fludioxonil 131341-86-1 C12H6F2N2O2 氟虫腈 Fipronil 120068-37-3 C12H4Cl2F6N4OS 氟甲腈 Fipronil-desulfinyl 205650-65-3 C12H4Cl2F6N4 氟虫腈砜 Fipronil-sulfone 120068-36-2 C12H4Cl2F6N4O2S 氟虫腈亚砜 Fipronil-sulfide 120067-83-6 C12H4Cl2F6N4S 嘧霉胺 Pyrimethanil 53112-28-0 C12H13N3 B B 附录B （资料性）27 种农药及其代谢物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数 27种农药及其代谢物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见表B.1。表B.1 27 种农药及其代谢物的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数 中文名称 保留时间 min 定量离子对 碰撞能 V 定性离子对 碰撞能 V 速灭威 6.62 166.0/108.9 12 166.0/94.0 31 扑草净 8.32 241.8/157.9 25 241.8/200.0 18 三环唑 6.16 189.7/136.0 29 189.7/162.9 23 三唑酮 8.46 293.7/68.9 22 293.7/197.1 16 多菌灵 4.51 192.1/160.1 17 192.1/132.1 30 吡虫啉 5.30 256.1/175.1 18 256.1/209.1 15 3-羟基克百威 5.56 238.1/163.1 14 238.1/181.1 11 戊唑醇 9.04 308.1/70.0 35 308.1/124.9 39 克百威 6.92 222.1/165.1 12 222.1/123.1 22 噻嗪酮 9.69 306.0/116.2 18 306.0/106.3 29 苯醚甲环唑 9.32 406.0/251.0 28 406.0/110.9 55 氯虫苯甲酰胺 7.87 484.0/453.1 18 484.0/286.1 16 烯酰吗啉 8.37 388.2/301.1 21 388.2/165.1 34 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐 8.35 886.7/158.1 40 886.7/126.1 47 多效唑 8.37 294.1/70.0 21 294.1/125.0 40 精异丙甲草胺 8.81 283.7/252.1 18 283.7/176.1 26 抗蚜威 6.55 239.1/72.1 24 239.1/182.1 15 莠去津 7.67 215.7/174.1 18 215.7/96.1 25 乙草胺 8.79 269.9/224.1 9 269.9/148.1 21 哒螨灵 10.51 365.2/309.1 13 365.2/147.1 25 阿维菌素 10.60 891.3/305.2 26 891.3/567.3 15 咯菌腈 8.29 246.7/179.8-27 246.7/125.9-33 氟虫腈 8.79 434.8/329.8-16 434.8/249.9-27 氟甲腈 8.68 386.6/350.9-13 386.6/281.9-31 氟虫腈砜 8.96 450.4/414.9-16 450.4/281.9-27 氟虫腈亚砜 8.86 418.5/261.9-28 418.5/382.9-13 嘧霉胺 8.12 200.1/107.0 25 200.1/168.1 29 C C 附录C （资料性）27 种农药及其代谢物多反应监测（MRM）质量色谱图 27种农药及其代谢物多反应监测（MRM）质量色谱图，见图C.1图C.27。图C.1 速灭威 图C.2 扑草净 图C.3 三环唑 图C.4 三唑酮 图C.5 多菌灵 图C.6 吡虫啉 图C.7 3-羟基克百威 图C.8 戊唑醇 图C.9 克百威 图C.10 噻嗪酮 图C.11 苯醚甲环唑 图C.12 氯虫苯甲酰胺 图C.13 烯酰吗啉 图C.14 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐 图C.15 多效唑 图C.16 精异丙甲草胺 图C.17 抗蚜威 图C.18 莠去津 图C.19 乙草胺 图C.20 哒螨灵 图C.21 阿维菌素 图C.22 咯菌腈 图C.23 氟虫腈 图C.24 氟甲腈 图C.25 氟虫腈砜 图C.26 氟虫腈亚砜 图C.27 嘧霉胺 D D 附录D （资料性）精密度的表示和计算 重复性限（r）要求见表D.1，再现性限（R）要求见表D.2。表D.1 重复性限（r）名称 含量 mg/kg 重复性限 r 含量 mg/kg 重复性限 r 含量 mg/kg 重复性限 r 速灭威 0.005 0.000 52 0.05 0.004 0 0.5 0.043 扑草净 0.005 0.000 42 0.05 0.004 1 0.5 0.038 三环唑 0.005 0.000 36 0.05 0.003 2 0.5 0.031 三唑酮 0.005 0.000 36 0.05 0.003 8 0.5 0.025 多菌灵 0.005 0.000 49 0.05 0.002 3 0.5 0.024 吡虫啉 0.005 0.000 44 0.05 0.003 2 0.5 0.034 3-羟基克百威 0.005 0.000 41 0.05 0.003 7 0.5 0.019 戊唑醇 0.005 0.000 43 0.05 0.003 4 0.5 0.027 克百威 0.005 0.000 37 0.05 0.003 2 0.5 0.031 噻嗪酮 0.005 0.000 40 0.05 0.002 9 0.5 0.023 苯醚甲环唑 0.005 0.000 42 0.05 0.003 6 0.5 0.034 氯虫苯甲酰胺 0.005 0.000 39 0.05 0.003 4 0.5 0.026 烯酰吗啉 0.005 0.000 46 0.05 0.003 8 0.5 0.029 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐 0.005 0.000 57 0.05 0.004 0 0.5 0.048 多效唑 0.005 0.000 63 0.05 0.004 2 0.5 0.034 精异丙甲草胺 0.005 0.000 42 0.05 0.003 5 0.5 0.033 抗蚜威 0.005 0.000 43 0.05 0.002 9 0.5 0.044 莠去津 0.005 0.000 54 0.05 0.003 8 0.5 0.034 乙草胺 0.005 0.000 37 0.05 0.003 1 0.5 0.032 哒螨灵 0.005 0.000 44 0.05 0.004 6 0.5 0.034 阿维菌素 0.005 0.000 58 0.05 0.004 0 0.5 0.040 咯菌腈 0.005 0.000 61 0.05 0.004 7 0.5 0.033 氟虫腈 0.005 0.000 56 0.05 0.006 0 0.5 0.039 氟甲腈 0.005 0.000 50 0.05 0.003 6 0.5 0.037 氟虫腈砜 0.005 0.000 49 0.05 0.003 4 0.5 0.036 氟虫腈亚砜 0.005 0.000 53 0.05 0.003 8 0.5 0.032 嘧霉胺 0.005 0.000 38 0.05 0.004 0 0.5 0.032 表D.2 再现性限（R）名称 含量 mg/kg 再现性限 R 含量 mg/kg 再现性限 R 含量 mg/kg 再现性限 R 速灭威 0.005 0.001 4 0.05 0.008 8 0.5 0.066 扑草净 0.005 0.001 4 0.05 0.007 1 0.5 0.042 三环唑 0.005 0.000 51 0.05 0.007 6 0.5 0.062 三唑酮 0.005 0.000 63 0.05 0.004 0 0.5 0.038 多菌灵 0.005 0.000 70 0.05 0.005 7 0.5 0.065 吡虫啉 0.005 0.000 65 0.05 0.004 1 0.5 0.044 3-羟基克百威 0.005 0.001 3 0.05 0.004 2 0.5 0.038 戊唑醇 0.005 0.000 91 0.05 0.005 1 0.5 0.055 克百威 0.005 0.000 62 0.05 0.006 4 0.5 0.059 噻嗪酮 0.005 0.000 93 0.05 0.003 6 0.5 0.030 苯醚甲环唑 0.005 0.000 66 0.05 0.006 2 0.5 0.045 氯虫苯甲酰胺 0.005 0.000 59 0.05 0.005 4 0.5 0.069 烯酰吗啉 0.005 0.001 2 0.05 0.005 7 0.5 0.038 甲氨基阿维菌素苯甲酸盐 0.005 0.001 0 0.05 0.009 4 0.5 0.064 多效唑 0.005 0.001 2 0.05 0.006 0 0.5 0.046 精异丙甲草胺 0.005 0.001 5 0.05 0.007 7 0.5 0.064 抗蚜威 0.005 0.000 53 0.05 0.010 0.5 0.069 莠去津 0.005 0.001 0 0.05 0.008 4 0.5 0.046 乙草胺 0.005 0.001 3 0.05 0.004 4 0.5 0.072 哒螨灵 0.005 0.001 1 0.05 0.006 5 0.5 0.056 阿维菌素 0.005 0.001 3 0.05 0.006 1 0.5 0.059 咯菌腈 0.005 0.001 1 0.05 0.006 7 0.5 0.048 氟虫腈 0.005 0.001 2 0.05 0.007 7 0.5 0.056 氟甲腈 0.005 0.000 87 0.05 0.004 1 0.5 0.048 氟虫腈砜 0.005 0.000 67 0.05 0.007 7 0.5 0.080 氟虫腈亚砜 0.005 0.001 1 0.05 0.009 0 0.5 0.057 嘧霉胺 0.005 0.000 82 0.05 0.006 2 0.5 0.047