10%戊菌唑乳油的高效液相色谱分析_张丽丽.pdf

农药研究Pesticide Science and Administration2023，44(1)10%戊菌唑乳油的高效液相色谱分析张丽丽1，徐晓芳1，刘 君1，孔桂之1，曹 磊1，梅俊红1，吴进龙2*(1.山东威瑞信试验检测有限公司，山东济南250119;2.农业农村部农药检定所，北京100125)收稿日期:2022 11 15作者简介:张丽丽，女，工程师，主要从事农药产品质量检测和理化性质测试工作。联系电话:[phone]。通讯作者:吴进龙，男，研究员，主要从事农药质量管理与分析工作。联系电话:[phone]。Analytical Method of 10%Penconazole EC by HPLCZhang Lili，Xu Xiaofang，Liu Jun，Kong Guizhi，Cao Lei，Mei Junhong(Shandong VeriSignTest Detection Co.，Ltd，Jinan Shandong 250119，China)Wu Jinlong(Institute for the Control of Agrochemicals，Ministry of Agriculture and ural Affairs，Beijing 100125，China)Abstract:A method was established for separating and quantitatively analyzing 10%penconazoleemulsifiable concentrate(EC)through HPLC，utilizing a mobile phase consisting of methanol andaqueous solution，a ZOBAX SB C18column and UV at 220nm.The results showed that a linearcorrelation coefficient of 0.999 8，a standard deviation of 0.061，a coefficient of variation of0.60%，and an average recovery of 100.03%.The method proved to be simple，rapid，sensitiveand accurate，making it suitable for the quantitative analysis of penconazole emulsifiable concen-trate.Key words:penconazole;emulsifiable concentrate;HPLC;analysis摘要:本文采用高效液相色谱法，以甲醇和水溶液为流动相，使用 ZOBAX SB C18反相色谱柱和紫外可变波长检测器，在 220nm 波长下对 10%戊菌唑乳油进行分离和定量分析。结果表明，该分析方法的线性相关系数为0.999 8，标准偏差为0.061，变异系数为0.60%，平均回收率分别为 100.03%。该方法简便快捷，灵敏度、精密度和准确度高，适用于戊菌唑乳油的定量分析。关键词:戊菌唑;乳油;高效液相色谱;分析中图分类号:S482.2;0657.7+2文献标识码:A文章编号:1002 5480(2023)1 36 563Pesticide Science and Administration2023，44(1)农药研究1前言戊菌 唑 英 文 名 称:penconazole，CAS 号:66246 88 6，分子式:C13H15Cl2N3，化学名称:2 (2，4 二氯苯基戊基)1H 1，2，4 三唑。戊菌唑是一种兼具保护、治疗和铲除作用的内吸性三唑类杀菌剂，是甾醇脱甲基化抑制剂，可由作物根、茎、叶等组织吸收，并向上传导。可用于防治南瓜、葡萄、仁果、观赏植物和蔬菜上的白粉菌科、黑星菌属、子囊菌纲、担子菌纲和半知菌类病原菌引起的病害有特效。目前国内有关戊菌唑乳油的分析方法未见公开报道。本文采用高效液相色谱法对 10%戊菌唑乳油进行定量分析，该方法操作简便快捷，分离效果好，精密度和准确度均能达到定量分析的要求。2试验部分2.1试剂和溶液甲醇(色谱纯);超纯水(电阻率 18.2Mcm，25);戊菌唑标样，已知质量分数 98.2%;10%戊唑醇乳油。2.2仪器高效液相色谱仪:日立 Primaide，具有可变波长紫外检测器和自动进样器;日立色谱工作站;色谱柱:250mm 4.6mm(i.d.)不锈钢柱，内装 ZOBAX SB C18、5m 填充物。2.3液相色谱操作条件流动相:(甲醇:水)=75:25;流速:1.0mL/min;柱温:25 2;检测波长:220nm;进样体积:10L;保留时间:戊菌唑约 8.9min。典型的戊菌唑标样和 10%戊菌唑乳油的高效液相色谱图(图 1、2)图 1戊菌唑标样高效液相色谱图图 210%戊菌唑乳油高效液相色谱图2.4测定步骤2.4.1标样溶液的配制称取 0.05g(精确至73农药研究Pesticide Science and Administration2023，44(1)0.000 1g)戊菌唑标样，置于 50mL 容量瓶中，加入 20mL 甲醇，超声波振荡 5min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀。用移液管移取上述溶液 5mL，置于 50mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。2.4.2试样溶液的配制称取含 0.05g(精确至 0.000 1g)戊菌唑的试样，置于 50mL 容量瓶中，加入20mL 甲醇，超声波振荡5min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀。用移液管移取上述溶液 5mL，置于 50mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤。2.4.3测定在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻 2针标样溶液的响应值相对变化 1.2%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。2.4.4计算将测得的 2 针试样溶液以及试样前后 2 针标样溶液中戊菌唑峰面积分别进行平均。试样中戊菌唑的质量分数 (%)，按式(1)计算:=A2 m1 PA1 m2(1)式中:A1标样溶液中戊菌唑峰面积的平均值;A2试样溶液中戊菌唑峰面积的平均值;m1标样的质量，g;m2试样的质量，g;P标样中戊菌唑的质量分数，%。3结果与讨论3.1色谱条件的选择通过日立 Primaide 高效液相色谱仪的光谱数据采集功能，获得戊菌唑的紫外波长扫描图(图 3)。从图中可以看到戊菌唑在波长 220nm 处有较大吸收，在该波长处灵敏度较高，干扰较少，能够满足分析的要求，故将检测波长确定为 220nm。图 3戊菌唑的紫外光谱图色谱柱选择常用的 ZOBAX SB C18反相柱。根据戊菌唑物化性质和溶剂的紫外吸收波长，选择甲醇作为溶剂溶解样品，并以甲醇和水作为流动相。将流动相按不同比例在色谱柱上进行试验，随着甲醇比例的增加，保留时间减小，当甲醇与水比例达到 80:20 时，有杂质峰干扰戊菌唑，峰纯度达不到试验要求，最终选择 (甲醇:水)=75:25 作为流动相，流速 1.0mL/min。该条件下，戊菌唑色谱峰峰形较好，与杂质能完全分离，具有良好的精密度和准确度，并且分析时间较短，提高了工作效率。3.2分析方法的特异性鉴定按照 2.4.1 和2.4.2 中方法分别配制标准溶液和样品溶液，按标准中方法对戊菌唑进行全波段扫描、峰纯度分析。从谱图可知戊菌唑在该分析方法下峰纯度均 990，有效成分出峰处无其他物质干扰，83Pesticide Science and Administration2023，44(1)农药研究符合定量分析要求。3.3分析方法的线性相关性试验称取 0.05g(精确至 0.000 1g)戊菌唑标样，置于 50mL 容量瓶中，加入20mL 甲醇，超声波振荡5min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀。用移液管移取 3、4、5、6、7mL 上述溶液，分别置于50mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配制 5 个不同浓度的有效成分线性相关溶液。在上述色谱操作条件下进行分析，以戊菌唑浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标作标准曲线(图4)，得到戊菌唑线性回归方程为 y=82 834x+104 775，线性相关系数为 0.999 8。图 4戊菌唑线性关系图3.4分析方法的精密度试验从同一产品中准确称取 5 个试样，在上述色谱操作条件下进行分析，测得戊菌唑的标准偏差为 0.061，变异系数为 0.60%(表 1)。表 1分析方法的精密度试验结果编号12345平均值(%)标准偏差变异系数(%)戊菌唑质量分数(%)10.27110.28110.16510.17910.15210.210.0610.603.5分析方法的准确度试验从已知质量分数的戊菌唑乳油(10.21%)中称取 5 个试样，分别加入一定量的戊菌唑标样(98.2%)，在上述色谱操作条件下进行分析，测得戊菌唑的平均回收率为 100.03%(表 2)。表 2分析方法的准确度试验结果编号试样称样量(g)标样称样量(g)理论值(g)实测值(g)回收率(%)平均回收率(%)10.249 90.026 890.026 410.051 7399.2820.225 20.029 510.028 980.052 33101.2430.250 10.025 340.024 880.050 0298.39100.0340.230 10.0294 20.028 890.052 3599.9050.272 20.024 070.023 640.051 75101.35下转第 5 页93Pesticide Science and Administration2023，44(1)农药管理保大会各项筹备工作，宣传近年我国植保工作成效，展示实用技术、产品。3.2充分运用好亚太植保委员会的平台为我所用我国是亚太地区农业生产和农产品贸易量最大的国家，进出口的农产品和农化产品数都非常大，亚太区域植保委员会是我国充分掌控亚太地区植物保护领域唯一多边合作机制的重要平台，有效带动和推进着区域各国植物保护工作，不但可以充分体现大国责任，还能够有效推动我国产能过剩的农药走出去，将迁飞性有害生物防控阻截在境外，在保障我国农业生产安全和农产品贸易安全的前提下，充分发挥大国责任，保障亚太区域的农业生产安全。3.3加强专业技术型专家的培养与输出我国推荐到 FAO 工作的代表人数与我国所承担的会费不仅完全不匹配，且有较大差距。有必要加大培养力度，做好我国人力资源的梯度布局与培养规划设计。加强我国人才的培养与输出，增强我国在国际组织中的影响力、话语权及主导力。首次参加本次会议的年轻同事，在团长领导下，积极准备大会的议题发言材料，积极对大会的标准及各专业委员会的工作作出回应，充分展示了我国年轻一代专业技术型专家的能力和水平。在本届大会上，我国代表 1 人成功争取连任了农药管理执行委员会主席，1 人成功当选亚太区域植物检疫措施标准委委员。3.4加强以核心产品为基础的集成技术输出我国为 APPPC 开展的农药管理政策法规、农药登记技术、农药质量控制技术、农药风险评估、农药安全使用等培训，有必要以我国自主研发的核心产品为基础，如本次会上，中国按计划提出的无人机新施药技术和生物农药科学使用技术规程等方面的培训得到广泛认同，已经列入 APPPC 未来两年的工作计划，无人机施药和生物农药的培训交流不仅可以推动我国自主研发的飞防农药制剂、助剂和生物化学农药、植物源农药、微生物农药等的出口，也将强力拉动我国施药装备的出口。3.5有必要密切关注周边国家重大有害生物的防控工作进展本次会议期间，一些国家通报了植保植检相关信息，如 APPPC 秘书处通报了麦瘟病在尼泊尔新发突发，印度和孟加拉等通报草地贪夜蛾发生危害加重，马来西亚通报了橡胶茎叶病、番茄潜叶蛾、桔小实蝇的监测情况，印度尼西亚修订了植物检疫条例，更新了禁止农药的种类。相关单位将加强对相关信息的跟踪收集，及时根据周边国家病虫疫情变化和农药使用情况，评估其传入我国的风险，加强农药抗药性监测，制定应对预案;根据相关法规制度调整，评估对我国农产品和农业投入品贸易的影响。参考文献 1 www.apppc.org/.上接第 39 页4结论试验建立了戊菌唑乳油有效成分含量测定的高效液相色谱分析方法，试验结果表明，本方法分离效果好、线性关系良好，具有较高的精密度和准确度，分析操作简便快捷，是戊菌唑乳油产品质量控制较为理想的分析方法。参考文献 1 张艳林，黄金明.戊菌唑原药的高效液相色谱分析 J.贵州农业科学，2009，08.2 姜宜飞，王国联，王胜翔.戊菌唑 200 克/升水乳剂高效液相色谱分析方法研究 J.农药科学与管理，2010，10.5