DB63∕T 699-2008 双孢蘑菇菌种生产技术规范(青海省).pdf

ICS 备案号:DB63 主同海省出blTJ 方标准DB63/T 699一-2008双子包蘑菇菌种生产技术规范2008-01-04发布2008-02-03实施青海省质量技术监督局发布目IJ1=1 本规范由青海省农林科学院提出井归口。本规范起草单位:青海省农林科学院十伞壤肥料研究所。本规范主要起草人:韩梅、杨文辉、宇:石牛、陈占全。木规范附录A、附录B为规范性附录DB63/T 699-2008 双子包蘑菇菌种生产技术规范1 范围本规范规定了双也蘑菇菌种的引种、工艺流程、生产技术要求战质量要求等。本规范适用于双抱蘑菇菌种生产O2 规范性引用文件DB63/T 699-2008 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括四J误的内容)或修1:J版均不适用J伞本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各力研究是台可使用这些文件的最新版本。凡是不注U期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 9687-1988食品包装用聚乙烯成型品11.生标准GB 9688一-1988食品包装用聚丙烯成型品卫牛标准3 术语和定义3. 1 品种经各种方法分离、诱变、杂交、筛选而选育出来具特异性、均一(一致)性和稳定性的具有同一个相先的群体。也常称作菌株或品系。3. 2 母种经各种方法分离、选育、杂交现引进得到的具有出菇能力的前丝体纯培养物及其继代培养物。3. 3 原种出母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。3.4 栽培种出国种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。4 生产技术4. 1 寻|种要求4. 1. 1 品种的选择应使用经省级以七农作物品种审定委员会登记的品种，并从具相应技术资质的供种单位引种。品种应根据当地的气候、栽培原料、市场市求等选择。4.1.2 品比试验将引进的品种进行小面积品比试验，栽培试验。并观察它的生活习性、适应性、抗逆、抗杂性等。4.1.3 菌种扩繁将l过种移植扩繁原种，一立时种移植扩繁原种不超过4瓶(袋);一瓶原种移植扩繁栽培种不超过.50瓶(袋L4. 2 生产工艺流程培养基配制分装灭菌冷却接种培养(检查)成品4. 3 菌种生产4.3.1 容器4.3.1.1 母种容器DB63/T 699-2008 使用玻璃试管和棉塞，试管采用18毫米x180毫米或20毫米x200毫米，棉塞棉主要使用原楠，不应使用脱脂棉O4.3.1.2 原种容器使用500毫升750毫升、耐126度高温的玻璃菌种瓶，或850毫升、耐126度高温白色半透明符合GB9687卫生规定的塑料向种瓶，或15厘米x28厘米、耐126度高温符合GB 9688卫生规定的塑料袋。各类容器部应使用棉辜，棉塞应符合4.3. 1. 1划定:也可用能满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖代替棉塞。4.3.1.3 栽培种容器使用符合4.3.1. 2规定的容器，也可使用17厘米x35厘米、耐126度高温符合GB9688卫生规定的塑料袋。各类容器都应使用棉塞或无棉塑料茧，井符合4.3.1. 2规定。4. 3. 2 培养基4.3.2.1 化学试剂类必须使用化学纯试剂。4. 3. 2. 2 生物制剂和天然材料类生物制剂(如酵月粉、蛋白H东)、天然材料(如棉籽壳、麦粒、麦款等)，要求新鲜、无虫、无捕、无霉、洁净、干燥。4. 3. 2. 3 培养基配方A、母种培养基用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)或综合麦粒葡萄糖琼脂培养基(见附录的。B、原种和栽培种培养墓根据当地原料资源和所生产品种的要求，使用适宜的培养基配力(见附录的，严格掌握含水量和PH值。4. 3. 2. 4 分装母种培养基的分装量掌握在试管长度的1/41/5，灭菌后摆放成的斜面I阳市t试管口二三50毫米，原种和栽培种培养基装至距瓶(袋)口注60毫米，灭菌后二三45毫米。棉寒大小松紧要适度。El种和栽培种培养基的松紧度要一虫。4. 3. 2. 5 灭菌母种的培养基配制分装后应立即灭菌:原种和栽培种培养基配制后应在4小时内进锅灭菌。母种培养基K菌蒸汽压力为1.1干克/厘米2，温度121度，维持30分钟:谷粒培养基火菌蒸汽压力为1.4千克/国米2，温度126度，维持2.5小时。装容量较大时，灭菌时间要适当延长。灭菌完毕后，应自然降压，不应强制阵压。灭陆i时应防止棉塞被冷i疑水打湿。4. 3. 2. 6 冷却冷却宣使用前要进行洁洁、|徐尘、消毒处理。将灭由后的原种瓶(袋)或栽培种瓶(袋)放置在冷却室中冷却到料温降至25度以下，力可接种。4. 3. 2. 7 接手中A、程序纠物消毒搬入接种物和被按种物接种主紫外:XJ照射。B、操作在尤菌室(革的或超净工作台接种。接种完成后及时贴好标签。C、后处理接种室每次使用后，要及时清理清洁，排除废气清除废物，台面要用75%酒精擦拭或其它方法消毒。4. 3. 2. 8 培养室处理在使用培养室的前两式，采用药物消毒。4. 3. 2. 9 培养条件根据培养物的不同生长要求，培养温度为22度24度，空气相对湿度在60%70%，通风，避光。4.3.2.10 培养期的检查2 DB63/T 699-2008 各级菌种培养期间应定期检查，及时拣山不合格菌种。4.3.2.11 记录生产各环节应详细记录。4.3.2.12 留样各级陆i种都应留样备查，留样的数量应以每个批号母种3支5支，原种和栽培种5阳(袋)7阳(袋), 于4度6度下贮存，贮存至使用者在正常牛产条件下该批菌种出第一潮菇。4. 4 质量要求4.4.1 母种4.4.1.1 容器规格采用18毫米X180毫米或20毫米X200毫米的玻璃试管。4.4.1.2 培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)成综合麦粒葡萄糖琼脂培养基。4.4.1.3 感官指标符合表l规定。表1母种感官指标项日要求棉来县Ji.尤棉塑料盖十燥、洁净、松紧适度，能满足透气和滤菌耍求培养基准入虽为试管总体积的l/1Ol/5培养基斜田长度只J试管总长度的l/2l/5斜面接种块大小(3毫米5毫米)X (3毫米.5毫米)茵丝体特征沾自或米自、浓密、羽毛状或叶脉状培养基斜田雨丝体表面均匀、平整、无角变正而外观菌丝分泌物尤陶格边缘整齐，无常状、贿状细陶或醉月闹闹治:)(霉保i陶洛培养基斜山背山外观培养基不干缩，颜包均匀、无H吉斑、无包素拮养物气味有双f包蘑菇民i种特有的香味，无酸、臭、霉寺异味培养物镜检菌丝粗壮，无杂菌菌丝及子包子，无虫及虫卵。4.4.1.4菌丝生长速度在温度24度下，15天20天长满试管。4.4.1.5 经出菇试验确定产量及品质等栽培农艺性状合格后，方可用于扩大繁殖或出售。A、菌丝萌发、定植能力接种到适合的培养基后，在正常条件下24小时内萌发恢复，走植迅速、菌丝健壮，20天以内长满培养墓。B、结菇转潮能力覆土后12d16d结菇，分布均匀18d22d采菇，每潮菇问阳7d10doC, 性对温度、湿度、酸碱度等生长条件变化耐受能力较强;对主要病虫害的抵抗能力较强3D、生物学效率在E吊条件下生物学效率不低于30%。4.4.2 国种4.4.2.1容器规格符合4.3.1. 2规定。4.4.2.1 培养基A、麦粒97%，石膏粉1%，碳酸钙1%，糖1%，含水量62%士l%，pH值二7.50B、腐熟棉籽壳(干)97%，石膏粉1%，碳酸钙2%，含水量55%士1%，pH值二7.5。4.4.2.2感官指标符合表2规定。表2原种感官指标项H 要求相塞或无相塑料盖下燥、洁净、松紧适度，能满足透气和1Ji:民i要求培养基上表而距瓶U的距离50毫米:1:5毫米接种量每支母种接原种4瓶6瓶民i丝体特征;市白浓密、生长吐促菌种瓶外观3 DB63/T 699-2008 培养物衣而菌绞体牛长均匀，无角变，无高温抑制线培养基及菌丝体紧贴瓶里，无干缩培养物表面分泌物无备种杂菌f包子、菌丝主七培养物气味有蘑菇菌种特有的香味，无酸、央、寿等异味培养物镜检保(丝和壮、无杂肉陶丝和f包子、无虫.虫卵4. 4. 2. 3 菌丝生长速度:原种瓶)业发满菌丝，在温度24度下菌丝长满瓶不超过45天。4. 4. 3 栽培种4.4.3.1 容器规格符合4.3.1.3规定。4. 4. 3. 2 培养基:同4.4.2.2规定。4. 4. 3. 3感官指标符合表3规定。Jjjj 口棉塞或无棉塑料孟培养基面E巨瓶(袋)门的距离接种最每瓶i、种接栽培种菌丝体特征向种并且(袋)不同部位前丝体外观培养基及菌丝休培养物表面分泌物各种杂菌J包子、菌丝培养物气味I市养物镜1分表3栽培种感官指标要求干燥、沾净、松紧适度，能满足透气和滤菌要求50毫米:1:5毫米30瓶(袋)50瓶(袋)洁白浓密、生长旺健生长均匀，无角变，无高温州制线紧贴瓶(袋)哇，尤干缩无无有蘑菇菌种特有的香味，无酸、央、;再等异味菌丝粗壮、尤杂菌菌丝和炮子、兀虫及虫卵4.4.3.4 菌丝生长速度栽培种瓶(袋)应发i茵茵丝，在温度24度下菌丝长满菌种瓶(袋)不超过4.5天。4.4.4 贮存4.4.4.1 母种一般在5度:!:1度冰箱中贮存，保藏期不超过90元。4.4.4.2 原种应尽快使用，10天内叫在温度24度:!:1度、沽沽、通风、干燥(相对湿度70%75%)、避光的室内存放。在5度:!:1度下贮存，保藏期不超过40天。4.4.4.3 栽培种应尽快使用，在温度24度:!:1度、沽洁、迫风、干燥(相对湿度70%75%)、避光的室内存放栽培种不超过10天，其余培养基的栽培种不超过20天。在5度:!:1度下可贮存90天。4 DB63/T 699-2008 附录A(规范性附录)母种常用培养基及其配方A. 1 PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)马铃薯200克(用浸出汁)，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升，pH直巾性。A. 2综合麦粒葡萄糖琼脂培养基麦粒200克(用浸山汁)，葡萄糖20克，磷酸二氢佣l克，硫酸馍o.5克，蛋白陈l克，琼脂20克，水1000毫升，pH 值中忡。5 附录B(规范性附录)原种和栽培种常用培养基配方及其适用种类B. 1 腐熟料培养基腐熟棉籽壳(干)97%，石膏粉1%，碳酸钙2%，含水量55%土凹，PH值二7.50 B. 2麦粒培养基麦97%98%，石膏2%3%，碳酸钙1%，含水量.50%士1%，PH值二7.5。DB63/T 699-2008 6