1、ICS 65.020 B 61 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 17102018 香茅草组培苗生产技术规程 Technical regulations for tissue culture plantlet Production in Cymbopogon citratus 2018 - 04 - 20 发布 2018 - 05 - 20 实施广西壮族自治区质量技术监督局 发 布 DB45/T 17102018 I 目 次 前 言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 外植体选取和处理 . 1 4 初代培养 . 1 5 继代培养 . 2 6 生根培养 .
2、 2 7 瓶苗移栽 . 2 8 苗木出圃 . 3 9 档案管理 . 4 附录 A(资料性附录) 培养基配方 . 5 DB45/T 17102018 II DB45/T 17102018 III 前 言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区林业厅提出并归口。 本标准起草单位:广西壮族自治区林业科学研究院。 本标准主要起草人:刘海龙、周丽珠、陈晓明、覃玉凤、覃子海、陈博雯、梁忠云、肖玉菲、谷瑶。 DB45/T 17102018 1 香茅草组培苗生产技术规程 1 范围 本标准规定了香茅草(Cymbopogon citratus)组培苗生产技术的外植体选取和处理、
3、初代培养、继代培养、生根培养、瓶苗移栽、苗木出圃、管理要求。 本标准适用于广西境内香茅草组培苗的生产技术。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 15776 造林技术规程 3 外植体选取和处理 3.1 外植体选取 选择长势良好、无病虫害的香茅草植株;整株挖掘,去除根系取茎及茎以上部分。 3.2 外植体处理 3.2.1 材料剪切 剪除外植体下部残留根系及茎上部叶片,保留茎和叶鞘,长度 3 cm8 cm。剥掉最外面 12 层叶鞘。 3.2.2
4、消毒 用去磷洗涤剂刷洗外植体,然后用自来水冲洗。在超净工作台上,用 75的酒精溶液中浸泡外植体 10 s,用无菌水冲洗 23 次,再用 0.1升汞或 2次氯酸钠溶液浸泡外植体 8 min12 min,用无菌水冲洗 35 次。 4 初代培养 4.1 初代培养基 初代培养基配方参见附录 A.1。 4.2 培养条件 培养温度为 25 3 。光照强度 2 000 Lx8 000 Lx,光照时间 12 h/d16 h/d。 DB45/T 17102018 2 4.3 外植体接种 将消毒后的外植体接种到初代培养基上,茎段基部插入培养基,立稳。 5 继代培养 5.1 继代培养基 继代培养基配方参见附录 A.
5、2。 5.2 培养条件 同 3.2。 5.3 继代转接 待初次培养的外植体茎段生长至5 cm 时,将其转入继代培养基上培养。接入的茎段经过 15 d 20 d 培养,将增殖芽分株为单芽或小丛,继续转入继代培养基。转接前均需剪切上部叶片,保持芽体高度 3.0 cm 左右。继代转接代数不宜超过 30 代。 6 生根培养 6.1 生根培养基 生根培养基配方参见附录 A.3。 6.2 培养条件 同 3.2。 6.3 生根转接 将继代增殖芽切分成单芽转入生根培养基。转接前应剪切上部叶片,保持芽体高度 3.0 cm 左右。 7 瓶苗移栽 7.1 移栽时间 宜在 39 月进行移栽。 7.2 炼苗 待根系长1
6、.0 cm 时,移到遮光度 6580的大棚内炼苗 3 d7 d。 7.3 容器 宜选用无纺布杯,规格为直径 5 cm,高 10 cm。 7.4 基质 育苗用经堆沤的椰糠。在移栽前 3 d 内用 0.5高锰酸钾(K2MnO4)或者甲基托布津 800 倍溶液淋透消毒,1 d 后再用清水淋洒洗去药液。 DB45/T 17102018 3 7.5 洗苗 将培养基及组培苗倒出,轻轻挤压培养基,取出生根苗,放入清水中洗除残留培养基。 7.6 移栽 用工具在容器杯的中心插一小孔,将苗放入孔中,轻轻压实容器杯,淋透水。 7.7 移栽后管理 7.7.1 水分 每天喷(淋)水 12 次,保持基质湿润。 7.7.2
7、 光照 用遮阳网控制光照。移栽后一周内,透光度保持在 30,一周后逐渐增加光照,一个月后透光度增至 6080。 7.7.3 施肥 组培苗恢复生长后,在傍晚用 0.2复合肥(N:P2O5:K2O=15:15:15)水溶液或者 0.1尿素和 0.2过磷酸钙的混合水溶液喷施叶面,喷施后立即用清水冲洗叶面,每月 1 次。 7.7.4 病虫害防治 6.7.4.1 主要病虫害 苗期主要病害有叶枯病等,主要害虫有麦二叉蚜等。 6.7.4.2 防治方法 香茅草苗期主要病虫害防治方法见表1。 表1 香茅草苗期主要病虫害防治方法 病虫害名称 防治方法 叶枯病 发病季节每隔 7 d10 d 喷 1:1:100 的波
8、尔多液 1 次,连喷 3 次。 麦二叉蚜 用 3啶虫脒乳油,每亩用量 15 mL20 mL,或用 48毒死蜱乳油,每亩用量 100 mL,每隔 5 d 喷药 1 次,连喷 2 次。 8 苗木出圃 8.1 苗木分级 苗木出圃应达到表 2 中级和级苗木的要求,苗木根系发达,长势好,苗干直,无机械损伤,无病虫害。合格苗应达 80以上。 DB45/T 17102018 4 表2 苗木等级表 苗木种类 苗龄 合格苗 综合控制条件 、 级苗百分率 级苗 级苗 地径 苗高 地径 苗高 容器组培苗 6 个月 1.0 cm 50 cm 0.5 cm1.0 cm 20 cm50 cm 色泽正常、 长势好 80 8
9、.2 起苗 在起苗前 1 d2 d 浇灌透水。起苗时间应与栽植季节一致,起苗时保持容器内根团完整,不得用手提苗茎。 8.3 包装运输 按GB/T 15776的规定执行。 9 档案管理 按GB/T 15776的规定执行。 DB45/T 17102018 5 A A 附 录 A (资料性附录) 培养基配方 A.1 初代培养基配方 WPMBA 0.3 mg/L1.0 mg/L白糖 3琼脂 5.5 g/L,pH值为5.8。 A.2 继代培养基配方 WPMBA 2.0 mg/L3.0 mg/LNAA 0.2 mg/L0.5 mg/L白糖 3琼脂 5.5 g/L,pH值为5.8。 A.3 生根培养基配方 1/2WPMIBA 0.8 g/L1.0 mg/LIAA 1.2 mg/L1.5 mg/L白糖 1.5琼脂 6.0 g/L,pH值为5.8。 中华人民共和国广西地方标准 香茅草组培苗生产技术规程 DB45/T 17102018 广西壮族自治区质量技术监督局统一印刷 版权专有 侵权必究