1、ICS 65.020.01 B 15 NY 中华人民共和国农业行业标准NY /T 3626-2020 西瓜抗枯萎病鉴定技术规程Technical code of practice for evaluation of watermelon resistance to Fusarium wiIt 2020-07 -27发布2020-什01实施中华人民共和国农业农村部发布NY / T 3626-2020 T 西瓜抗枯萎病鉴定技术规程1 范围本标准规定了西瓜对枯萎病(参见附录川的抗病性评价方法。水标准适用于西瓜抗枯萎病室内2 规范性引用文件NY / T 1857. 3 3 术语和定义NY / T 18
2、57 4 原理性水平。5. 1. 3 5. 1. 4 其他材料培养皿(直径大小为90温tE养箱、超净工作台、高压灭验仪棍。5.2 方法5 2. 1 PDA培养基制备/T 3626-2020 别的版本适用于本文H.、育在if.1;.等实验耗材;fI30.C)、微波炉、电磁炉等实称lIk洗净去皮的马铃薯200 g,切成小块,jJll7J. 1 000 mL煮沸0.5h,纱布;过滤,如l人琼脂粉15g,1JU热彻戚浴化后,再加l入葡萄糖15g,搅拌均匀并浴仰后,如l自来水至总体积为1000mL,分装于250mL三角瓶,121.C0. 1 MPa灭菌20min.随后倒入90mm 培养皿l备用。5.2.
3、2 PDB培养液制备PDA培养1在(5.2.1)中不力U入Jj(脂粉,其他成分都相同的培养基为PDB培养液。5. 2 3 麦粒沙培养基制备脱壳后的麦粒(从普通超rl购买),沙粮粒径大小为1mm3 mm.煮熟的麦粒与沙粒按质量比1 2 1昆匀,装入250mL二角)fl或广口瓶,占瓶休积的1/3,121.CO . 1 MPa灭茵30min,现用现配。NY/T 3626-2020 5.24 病原菌扩繁i仅保存在一80C的西瓜枯萎病商(尖泡镰泡菌西瓜专化型1号生理小利1).用PD八培养基28C复苏2d.待菌落民til后再转擦到新的PDA培养基上生长,培养7d- l0 d备用。5. 2 5 伤根接种法于
4、包子悬浮液的制备Jlt生长旺盛的西瓜枯萎病在1;1丝,接利于PDB液体培养基巾,在28C挤床里振荡培养7d-lO d后,将振荡培养后的菌液用双层纱布过iJiJ,去掉囱丝,没;液以3000 r/min离心,去除上市液,用无菌水重悬,用J(ll球计数板统计病原菌袍子的数问,调至于包子悬浮浓浓度为每毫刑1XIO个袍子,现m现配。5.26 鉴定材料育苗用47%春需霉素王铜可湿性粉剂按1000倍JJrI人55C混水中浸利16h,用干净的湿纱布包好,笠于28C催芽,待种子JEE根l王至0.5cm、85%的种子露自后播种.播种时,将利子轻轻放入培养钵或育苗挠,夜盖由l土lcm,Ia度控制在25C-30C,5
5、.27 土壤或基质接种法采用PDA培养基繁殖病菌.jl.j:m麦粒沙培养基扩大培养,制备菌土,衍要鉴定的品种直接播种于菌土中,同时t播面利5.28 伤根接种法取3叶或4111期生长状态一致、健壮的西瓜幼苗,用消水冲洗根部的土攘,在取苗和冲洗过程中会在根部造成伤口,将冲洗干净怕伤口的幼苗根古!I?.i泡于浓度为每笔刑lX10个袍子的病原菌于包子悬浮液中10 min-15 min.处理后的瓜苗定植于育苗钵内。设r,!1水伤根接种为对!?1.5. 2 9 病原菌在麦粒沙培养基中扩繁将在PDA上生长状态旺盛的西瓜枯萎病病原菌j有直径。.6cm自J打孔然打取j饼。取10块J:i;j饼均匀地接利到麦粒沙培
6、养基中.28C培养,每隔2d充分括:匀,培养10d-15 d, 5. 2 10 菌土制备土壤或基质采用121C0.1 MPa灭菌2h。将病原菌生长充分的麦粒沙培养基捣碎,按照2%的质盘比,与灭菌的土:I!l或基质充分混匀.!i1J成土攘或基质Thl1土,分装至培养钵或育lhl盘,现用现配。6 抗病性鉴定6. 1 鉴定设计每份符训材料重复3次,每次重复选取-1:长健壮、L势一致的待测材料不少于20株幼苗,用于抗病性鉴定.6. 2 接种后幼苗培养条件两种方法接种后的鉴定材料在温室生|支,温度控制在25C-30C.正常水分管理.7 病害调查及抗病性分级7. 1 病害调查7. 1 1 调查时间接种后第
7、15d 开始调查,每隔5d调查一次,直至感病对!t品种发病率达80%止。7. 1 2 调查方法记录待测西瓜品种的发病情况,他株数及总株数等记入西瓜抗枯萎病鉴定调查表,计算发病率。7.2 抗病性评价7.2. 1 发病率计算根据调查数据,记录西瓜枯萎病品种抗病性鉴定调查表(参见附录)。按式(l)计算e户=平X100 . (1) 2 /T 3626-2020 王飞1, 户发病率,单位为百分号C%); b一一总株数,单位为株; 住II株数,单位为株。7.22 抗病性分级标准枯萎病抗病性分级标准用发病率的高低评价。户20%为高抗CI-ligh Rcsistancc, I-I邸;20%豆豆户50%为中抗C
8、MiddlcRcsistancc, MR) ; 50%运户80%为轻抗CSlightRcsistance, S邸,户注80%为感病CSusceptiblc, S) 0 7.23 鉴定有效性判别感病对!自材料户80%,且抗病对照材料户20%,该批i次抗枯萎病鉴定结果视为有效.8 鉴定记录鉴定结果报告单需要出具鉴定单位、地点及时间等,报告格式参见附录B.3 NY IT 3626-2020 A. 1 西瓜枯萎病病原A2 4 附录A(资料性附录)西瓜枯萎病病原菌的信息, Fon)引起的病窑.病原的病原菌产生浅紫色色,无色,1个-5个元色,单l血或仙J双、1号生丑II小种、2,整株猝倒。NY/T 362
9、6-2020 附录B(资料性附录)西瓜枯萎病品种抗病性鉴定调查表西瓜枯萎病品种抗病性鉴定调查表见表B.1o表B1西瓜枯萎病品种抗病性鉴定调查表接利后第15d 接种后第20d 接和l后第25d 接种后第30d 接种后耳35 d 接种后第40d 抗性类别编号品种总林名称株他株数 发病率 他株数发病率 他株数且主病率他株数且主病率他株数发病率他株数发病率株% 株% 株% 株% 株% 株% 接种日期鉴定地4鉴定单位单位(荒1,)年)1 日检测人复核人年nICI 年)11:1 5 ONON-N凹HFZNY / T 3626-2020 中国农业:h版社:1版(北京市IiJJ阳区麦子店街18号楼)( 1IIJli攻编码100125网力l、叭,vw.且也p.CQm. cn) 北京印刷一厂印刷新华书店北京发行所发行各地祈华书店经销4峰兴4峰奇峰印怅O.75 字数15千字2020年10月北京第11印刷4略2020年10月第1版书号16109.82门定价18.00元峰开本880mmX1230mm 1/ 16 版权专有侵权必究举报电话(010)59194261 NY /T 3626-2020