SN∕T 2558.9-2015 进出口功能性纺织品检验方法 第9部分：抗菌性能 阻抗法(出入境检验检疫).pdf

书 书 书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 进出口功能性纺织品检验方法第部分：抗菌性能阻抗法犜 犲 狊 狋 犻 狀 犵犿犲 狋 犺 狅 犱犳 狅 狉犻 犿狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犳 狌 狀 犮 狋 犻 狅 狀 犪 犾狋 犲 狓 狋 犻 犾 犲 狊犘 犪 狉 狋：犃狀 狋 犻 犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪 犾犪 犮 狋 犻 狏 犻 狋 狔犻 狀狋 犲 狓 狋 犻 犾 犲 狊犳 狅 狉犻 犿狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犐犿狆 犲 犱 犪 狀 犮 犲犿犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书 书 书前言 进出口功能性纺织品检验方法分为个部分： 第部分：防紫外线性能； 第部分：负离子含量； 第部分：免烫性能； 第部分：抗菌性能平板琼脂法； 第部分：消臭率的测定检知管法； 第部分：透水汽性能； 第部分：夜光纤维发光性能； 第部分：光触媒除甲醛性能； 第部分：抗菌性能阻抗法。本部分为 的第部分。本部分按照 给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会归口。本部分起草单位：广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心、番禺出入境检验检疫局。本部分主要起草人：任忠海、李太存、潘素华、黄伯熹、苏伟霞、梁清闲、赵丹霞、兰丽丽、赵涛。犛犖犜 进出口功能性纺织品检验方法第部分：抗菌性能阻抗法范围 的本部分规定了采用阻抗法测定纺织品抗菌性能的定量试验和评价方法。本部分适用于羽绒、纤维、纱线、织物及其制品等各类纺织产品。本部分不涉及抗菌产品安全性的评价。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 食品安全国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定 纺织品色牢度试验耐家庭和商业洗涤色牢度试验方法术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 抗菌性能犪 狀 狋 犻 犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪 犾犪 犮 狋 犻 狏 犻 狋 狔纺织品所具有的能抑制织物上的细菌生长繁殖的性能。 对照样犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾犳 犪 犫 狉 犻 犮用于验证试验微生物生长条件的、不经过任何处理的 棉织物。注：已被证明采用色牢度试验用的棉标准贴衬织物，经高温蒸煮和蒸馏水洗涤后作为对照样是合适的。 阻抗测定时间犻 犿狆 犲 犱 犪 狀 犮 犲犱 犲 狋 犲 犮 狋狋 犻 犿犲；犇犜由于微生物活动引起培养基中阻抗变化至能够被仪器检测记录的时间。安全预防措施本试验所采用的试验菌能使人感染致病，应采取一切必要的预防措施，免除对人员和环境的危害，试验应由经过培训的人员进行。原理将试样与对照样分别用试验菌液接种。分别进行立即洗脱和培养后洗脱，洗脱的菌液加入阻抗检测瓶，通过微生物生长代谢将瓶内培养基中蛋白质和碳水化合物转变为氨基酸及乳酸等，引起培养基电阻抗微弱变化，可由阻抗检测仪器记录成值，值与菌液中微生物数量和活性在一定范围内存在犛犖犜 相关关系。通过建立值与菌落总数之间的标准曲线及回归方程，利用该标准曲线和回归方程，并通过测定菌液的值，从而得出活菌浓度，计算抑菌值或抑菌率，以此评价试样的抗菌效果。设备和材料 阻抗检测器：具有阻抗检测功能的阻抗检测仪器。 测量瓶：配套阻抗检测仪器使用。 微量移液器： 。 分光光度计：检测波长 或 。 恒温振荡器（摇床） ：温控精度为。 恒温培养箱：温控精度为。 冰箱：温度能保持在 。 高压灭菌锅：温度能保持 ，压力能保持在 。 玻璃小瓶：平底圆柱，容量为 ，带有瓶盖。 旋涡式振荡器。 水浴锅：温度能保持在 。 二级生物安全柜。 试管、吸管、锥形瓶、平皿等实验室常用器具和设备。培养基和试剂试验所用试剂应是分析纯的或适合于微生物试验用的。试验用水应是纯水，如蒸馏水。注：建议使用现有商业化的脱水原料制备培养基，并严格按照相关产品制造商的使用说明操作。 犅培养基 蒸馏水（最终定容至） 灭菌后，值为 。 营养肉汤（犖犅）牛肉膏 蛋白胨 蒸馏水（最终定容至） 灭菌后，值为 。 犛犆犇犔犘液体培养基酪蛋白胨 大豆蛋白胨 氯化钠 磷酸氢二钾 葡萄糖 卵磷脂 聚山梨醇酯 （吐温 ） 犛犖犜 蒸馏水（最终定容至） 灭菌后，值为 。 计数培养基（犈犃）脱水酵母膏 胰酪蛋白胨 葡萄糖 琼脂粉 蒸馏水（最终定容至） 灭菌后，值为 。试验菌种 菌种革兰氏阳性细菌：金黄色葡萄球菌犛 狋 犪狆犺狔 犾 狅 犮 狅 犮 犮 狌 狊犪 狌 狉 犲 狌 狊（ ） 。革兰氏阴性细菌：大肠埃希氏菌犈 狊 犮 犺 犲 狉 犻 犮 犺 犻 犪犮 狅 犾 犻（ 或 、 、 中的一种） ，或肺炎克雷白氏菌犓犾 犲 犫 狊 犻 犲 犾 犾 犪狆狀 犲 狌犿狅 狀 犻 犪 犲（ ） ，根据需要选一种。注：可使用加入世界菌种保藏联合会（）的菌种保藏机构提供的、与上述菌种等效的试验菌。注：如果需要，可采用其他的试验菌种，培养基成分、培养温度和培养方法应根据要求调整。 菌种转种及保存冻干菌激活后接种斜面试管培养，然后储存于冰箱（ ） ，作为保存菌。每一个月应转种一次，转种后放于冰箱（ ）保存，转种次数不应超过 代。若转种后保存时间超过一个月，不能用于下一次转种。 标识对每个菌种应标注如下信息：）供应冻干菌的菌种保藏机构名称；）冻干菌的名称和编号；）冻干菌的批号；）冻干菌激活日期；）保存菌的储藏日期；）保存菌的实验室编号。试验菌液的准备 培养犃用接种环取保存菌（ ） ，以划线法接种（ ）平皿上， 下培养 。注：该平皿在 条件下保存，在周内使用。 培养犅取营养肉汤（ ） 放入 的锥形瓶内，用接种环取培养物（ ）的典型菌落接种犛犖犜 在肉汤内置于恒温振荡器（摇床）中培养，培养条件为温度 ，振动频率 ，时间 。最后用（ ）调节菌液浓度为 。 培养犆取营养肉汤（ ） 放入 的锥形瓶内，从培养（ ）取 菌液加入肉汤内置于恒温振荡器（摇床）中培养，培养后的菌液浓度约为 。培养条件为：温度 ，振动频率 ，时间。 试验菌液的制备用蒸馏水对营养肉汤（ ）进行 倍稀释，调节培养（ ）的菌液浓度为 ，作为试验菌液。采用分光光度计或适当的方法测定菌液浓度。注：该试验菌液冰冷（）保存，在内使用，以保持接种菌的活性。 标准曲线的绘制和预测方程的建立 用接种环取保存菌（ ） ，以划线法接种（ ）平皿上， 下培养 。注：该平皿在 条件下保存，在周内使用。 标准曲线的绘制：）取菌悬液（ ）进行系列稀释，得到一系列细菌数从高到低的不同细菌数标准品。）对系列细菌数不同的标准品取合适的个稀释度进行平板菌落计数，培养温度 ，其余按 进行计数。）同时对系列标准品进行阻抗测定，培养温度 ，记录各标准品的值。）以系列标准品阻抗测定值（）为横坐标，以相应平板菌落计数结果（）的对数为纵坐标，利用统计软件绘制标准曲线。标准曲线的数据点对应的平板菌落计数结果应覆盖至少个数量级。 预测方程的建立：预测方程的推导：根据标准曲线的数据点用统计软件进行回归分析，推导出预测方程。预测方程的使用：对不同的菌悬液检样测定时，应选用利用同菌种标准品制作的标准曲线和预测方程。 试样的准备 样品洗涤试样如需洗涤，应选用耐洗色牢度试验机洗涤方法进行操作，并在试验报告中注明采用的洗涤方法。从抗菌织物大样中取个小样（每个尺寸 ，剪成块） ，按 中的试验条件进行洗涤，采用无磷标准洗涤剂。下述程序相当于次洗涤：水温 ，洗涤剂浓度 ， 溶液，钢珠 粒，洗 。洗涤后取出试样，在 和 的水中清洗两次，每次 。重复此程序，直至规定的洗涤次数。为防止残留的洗涤剂干扰抗菌性能测试，最后一个程序结束时充分清洗样品，然后晾干或烘干。 试样质量从每个样品上选取有代表性的试样，剪成适当大小，称取 作为一个试样。分别取个待测抗菌性能试样和个对照样。犛犖犜 注：个对照样用于接种细菌后立即测定值，其余个对照样和个待测抗菌性能试样用于细菌接种并培养后的测定值。 试样放置将每一个试样分别放置在玻璃小瓶内。）易卷曲的织物试样，在其上压一根玻璃棒，或用线将其两边固定。）纱线试样宜两头扎成束状，在其上压一根玻璃棒。）对于地毯或类似结构样品，剪取样品上的起绒部分作为试样，在其上压一根玻璃棒。）羽绒、纤维、絮片等蓬松试样上压一根玻璃棒。 试样灭菌根据试样的纤维和整理类型选择灭菌方法。一般采用高压锅灭菌法。用适当的材料将装入试样的小玻璃瓶和瓶盖分别包覆后放入高压灭菌锅内消毒（ ， ， ） 。从高压灭菌锅取出小瓶和瓶盖，去掉包覆材料，放在干净工作台上干燥 后盖上瓶盖。若试样不宜采用高压蒸汽灭菌，可采用其他方法灭菌并在报告中说明，但所采用的灭菌方法不应影响抗菌性能和检测结果；对同一个检测样本的试样、对照样应采用同一种灭菌方法。 试验操作 试样的接种分别用微量移液器准确取试验菌液（ ） 分散接种在每个玻璃小瓶内的试样（ ）上，确保菌液不要沾在瓶壁，盖紧瓶盖。注：为使菌液在试样上浸透，也可使用含有 的非离子表面活性剂的试验菌液，但应在试验报告中注明。 接种后立即洗脱在已接种试验菌液的个对照样玻璃小瓶（ ）中，分别加入培养基（ ） ，盖紧瓶盖，用振荡器振荡次（每次） ，将细菌洗下。 培养将接种试验菌液的其余个玻璃小瓶（个对照样和个试样）在 下培养 。 培养后洗脱在培养后（ ）的各玻璃小瓶中，分别加入培养基（ ） ，盖紧瓶盖，振荡器振荡次（每次） ，将细菌洗下。 菌落数的测定从 和 每个玻璃小瓶中吸取洗脱液，移入装有 培养基（ ）的测量瓶中，混匀。每个小瓶分别吸液加入两个测量瓶做平行样。 培养至得到值。两个平行测量瓶的菌落数相差应在 以内，否则此数据无效，应重做试验。犛犖犜 结果的计算及评价 细菌浓度的计算根据得到的值，通过预先设置的检测类型，阻抗检测器自动将检样值代入相应预测方程，计算出检样中的菌落总数。或者利用所绘制的标准曲线和相应预测方程，按式（）也可手工计算出检样值对应的菌落总数。犡 （犪 狓犫）（）式中：犡 检样中细菌数，单位为菌落形成单位每亳升（） ；犪 标准曲线的斜率；狓 阻抗测定时间（值） ；犫 标准曲线的截距。 试验有效性的判断根据式（）计算试验菌的增长值犉，当犉大于或等于 ，试验判定为有效。否则试验无效，需重新进行试验。犉 犆 犆（）式中：犉 对照样的试验菌增长值；犆 个对照样接种并培养 后测得的细菌数的平均值（） ；犆 个对照样接种后立即测得的细菌数的平均值（） 。 抑菌值的计算对于有效的试验，按式（）计算抑菌值，修约至小数点后一位。犃 犆 犜（）式中：犃 抑菌值；犜 个试样接种并培养 后测得的细菌数的平均值（） 。 抑菌率的计算如果需要，按式（）计算抑菌率，数值以百分率（）计，修约至整数位。抑菌率犆犜犆 （） 结果的表达以抑菌值或抑菌率的计算值作为检测结果；当抑菌值或抑菌率计算值为负数时，表示为“” ；当抑菌率计算值 时，表示为“ ” 。 抗菌效果的评价当抑菌值或抑菌率 ，样品具有抗菌效果。当抑菌值或抑菌率 ，样品具有良好的抗菌效果。犛犖犜 试验报告试验报告应包括下列内容：）试验是按本部分进行的；）样品和对照样的描述；）样品的预处理（如：消毒、洗涤方法和次数） ；）试验菌种名称、编号、接种浓度及标准曲线和预测方程；）对照样的增长值犉，包括犆和犆；）试样的犜；）抑菌值和（或）抑菌率；）抗菌效果的评价；）试验人员和试验日期；）试验菌液中添加的表面活性剂名称和浓度；）任何偏离本部分的情况。犛犖犜 书 书 书 犜犖 犛中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口功能性纺织品检验方法第部分：抗菌性能阻抗法 中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲号（ ）北京市西城区三里河北街 号（ ）总编室： （ ） 网址 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数 千字 年月第一版 年月第一次印刷印数 书号： 定价 元