血清PTTG1_TK1_L...临床诊断及疗效预测中的价值_杨荣松.pdf

血清 PTTG1 TK1 LncNA 水平在原发性喉癌临床诊断及疗效预测中的价值杨荣松杨琛魏璐璐作者单位:473000河南南阳河南省南阳市中心医院耳鼻喉科 摘要 目的探究血清垂体瘤转化基因 1(PTTG1)、胸苷激酶 1(TK1)、长链非编码 NA H19(lncNA H19)在原发性喉癌临床诊断及疗效预测中的应用价值。方法选取 2016 年 1 月至 2021 年 5 月于河南省南阳市中心医院收治的 143 例疑似原发性喉癌患者为研究对象，根据病理诊断结果，将原发性喉癌的患者设为观察组(n=61)，将良性病变的患者设为对照组(n=82)。比较两组患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平差异，使用受试者特征(OC)曲线分析血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平对原发性喉癌的诊断效能。使用单因素方差分析观察组不同原发性喉癌分期患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平的差异，比较不同疗效患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平差异，使用 OC 曲线探究血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平对患者疗效的预测价值。结果观察组血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平均高于对照组(P 均 0 05);OC 曲线结果显示，血清 PTTG1、TK1、LncNAH19 表达水平对原发性喉癌患者的诊断效能均较高(AUC=0 897、0 869、0 968，P 均 0 05);经单因素方差分析，不同分期的原发性喉癌患者之间，血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平均差异有统计学意义(P 0 05);有效组患者血清 PTTG1、TK1、LncNAH19 表达水平均低于无效组(P 均 0 05);OC 曲线结果显示，血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者疗效的预测效能均较高(AUC=0 855、0 785、0 678，P 均 0 05)。结论血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 用于诊断原发性喉癌，其预测分期和疗效价值均较高。关键词 原发性喉癌;垂体瘤转化基因 1;胸苷激酶 1;长链非编码 NA H19doi:10.3969/j.issn.1000 0399.2023.03.008Value of levels of serum PTTG1 TK1 and LncNA in clinical diagnosis and efficacy prediction of primary laryngeal cancerYANG ongsong，YANG Chen，WEI LuluDepartment of Otolaryngology，Nanyang Central Hospital，Nanyang 473000，China Abstract ObjectiveTo explore the application value of serum pituitary tumor transforming gene 1(PTTG1)，thymidine kinase1(TK1)and long non coding NA H19(lncNA H19)in the clinical diagnosis of patients with primary laryngeal cancer and prediction ofefficacy MethodsA total of 143 patients with suspected primary laryngeal cancer admitted to Nanyang Central Hospital，Henan Provincebetween January 2016 and May 2021 were enrolled as the research subjects According to the pathological diagnosis results，the patients withprimary laryngeal cancer were set as observation group(n=61)，and those with benign lesions were served as control group(n=82)Thedifferences in levels of serum PTTG1，TK1 and LncNA H19 of the two groups of patients were compared，and receiver operating characteris-tic(OC)curve was used to analyze the diagnostic efficiency of levels of serum PTTG1，TK1 and LncNA H19 on primary laryngeal canc-er One way analysis of variance was applied to explore the relationship between serum PTTG1，TK1 and LncNA H19 levels and primarylaryngeal cancer staging in the observation group The differences in levels of serum PTTG1，TK1 and LncNA H19 were compared amongpatients with different efficacy status，and OC curve was adopted to explore the predictive value of serum PTTG1，TK1 and LncNA H19 inefficacy of patients esultsThe expression levels of serum PTTG1，TK1 and LncNA H19 in the observation group were higher than thosein the control group(all P 0 05)OC curve results showed that the expression levels of serum PTTG1，TK1 and LncNA H19 had highdiagnostic efficiency in patients with primary laryngeal cancer(AUC=0 897，0 896，0，968，all P 0 05)One way analysis of varianceshowed that the expression levels of serum PTTG1，TK1 and LncNA H19 were significantly different among patients with different stages ofprimary laryngeal cancer(P 0 05)The expression levels of serum PTTG1，TK1 and LncNA H19 of patients in the effective group werelower than those in the ineffective group(all P 0 05)OC curve showed that the expression levels of serum PTTG1，TK1 and LncNAH19 had high predictive efficiency in patients with primary laryngeal cancer(AUC=0 855，0 785，0 678，all P 0 05)ConclusionsSerum PTTG1，TK1 and LncNA H19 are of high value in the diagnosis of primary laryngeal cancer and predicting the efficacy Key words Primary laryngeal cancer;Pituitary tumor transforming gene 1;Thymidine kinase 1;Long non coding NA H19喉癌是临床常见的头颈部恶性肿瘤，可分为声门上、声门下、声门型或贯声门型喉癌，其中以声门型喉482安徽医学第 44 卷第 3 期Anhui Medical Journal2023 年 3 月癌常见，多发于男性，吸烟是导致声门型喉癌的危险因素1。原发性喉癌的主要症状包括声嘶、呼吸困难、吞咽困难、颈部淋巴结等，其临床主要治疗方法为外科手术及术后放疗，早期患者疗效较为显著，但部分晚期患者疗效较差，且患者可能发生术后失声、语言障碍、永久造瘘等并发症2。因此，原发性喉癌的早期诊断尤为重要。垂体瘤转化基因 1(pituitary tumor transforminggene 1，PTTG1)最早发现于大鼠中，是一种具备高亲水性的蛋白，在肝癌、肺癌、乳腺癌等癌症中均显著高表达，可导致恶性肿瘤发生3 4。胸苷激酶 1(thymidinekinase 1，TK1)是 DNA 合成的关键酶之一，其浓度与细胞增殖情况联系紧密，故 TK1 可用于评估肿瘤发生、发展、预后5 6。长链非编码 NA(long non codingNA，lncNA)是一种不具备蛋白编码功能的 NA，临床研究显示 LncNA H19 可作为多种癌症的诊断、预后生物标志物 7 8。本文旨在探究原发性喉癌患者血清PTTG1、TK1、LncNA H19 的检测意义，现报道如下。1资料与方法1 1一般资料选取 2016 年 1 月至 2021 年 5 月河南省南阳市中心医院收治的 143 例疑似原发性喉癌患者为研究对象，根据病理诊断结果，将原发性喉癌的患者设为观察组(n=61)，将良性病变的患者设为对照组(n=82)。观察组患者中男性 45 例，女性 16 例，年龄 42 76 岁，平均年龄(59 46 11 42)岁，肿瘤分期参照 TMN 分期，为期 12 例，期 15 例，期 18 例，期 16 例。对照组患者中男性 61 例，女性 21 例，年龄 45 71 岁，平均年龄(58 28 10 05)岁。两组患者性别、年龄比较，差异无统计学意义(性别:2=0 007，P=0 933;年龄:t=0 655，P=0 514)。12纳入与排除标准纳入标准:经病理组织诊断确诊原发性喉癌或良性病变者;年龄 18 岁;未接受化疗、放疗或手术治疗者。排除标准:临床资料缺失者;行保守治疗者;合并肝肾功能不全者;合并或继发其他恶性肿瘤者;合并其他可能影响观测指标的疾病者。本研究经医院伦理委员会批准(伦理审批号:2021KW0108)。1 3研究方法采集两组患者清晨空腹外周静脉血5 mL，静置 30 min 后离心，转速 3 000 r/min;离心时间10 min，取上层血清，使用酶联免疫吸附法检测血清PTTG1 水平，使用全自动化学发光仪检测血清 TK1 水平，使用实时荧光定量 PC(quantitative real timePC，qT PC)测定血清 LncNA H19 水平。1 4疗效评价标准患者均在治疗半年后使用 E-CIST 实体瘤疗效评价标准8 评价疗效，期间进行电话随访。完全缓解(complete remission，C):患者全部病灶消失;部分缓解(partial remission，P):患者治疗后病灶最大径与最大垂直直径乘积与基线病灶相比，缩小30%;稳定(stable disease，SD):患者治疗后病灶最大径与最大垂直直径乘积与基线病灶相比，增大25%。疾病进展(progressive disease，PD);患者治疗后病灶最大径与最大垂直直径乘积与基线病灶相比，增大 25%，或出现新病灶。以 C+P 为治疗有效，以SD+PD 为治疗无效。1 5观察指标及分析方法比较两组患者血清 PT-TG1、TK1、LncNA H19 水平差异，使用受试者工作特征(receiver operating characteristic，OC)曲线分析血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平对原发性喉癌的诊断效能。探究观察组患者血清 PTTG1、TK1、LncNAH19 水平与原发性喉癌分期的关系，比较不同疗效观察组患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平差异，探究血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平对患者疗效的预测价值。1 6统计学方法采用 SPSS 23 0 软件对数据进行统计分析，正态分布计量资料用 x s 表示，组间比较采用 t 检验，多组间比较使用单因素方差分析，诊断效能及疗效预测价值使用受试者工作特色(receiver op-erator characteristic curve，OC)曲线分析。以 P 0 05为差异有统计学意义。2结果2 1两组患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平比较观察组血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平均高于对照组，差异有统计学意义(P 0 05)。见表 1。表 1两组患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19表达水平比较(x s)组别例数 PTTG1(pg/mL)TK1(pmol/L)LncNA H19观察组61140 04 30 844 83 1 686 15 1 35对照组8298 82 15 772 68 0 643 39 0 66t 值10 41810 61016 117P 值0 0010 0010 001注:PTTG1 为垂体瘤转化基因 1;TK1 为胸苷激酶 1;Ln-cNA H19 为长链非编码 NA H19。22血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者的诊断效能将患者以确诊结果进行分582第 44 卷第 3 期安徽医学2023 年 3 月Anhui Medical Journal组，以不同分组为状态变量，PTTG1、TK1、LncNA H19为检验变量，进行 OC 曲线分析。OC 曲线结果显示，血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者的诊断效能均较高，曲线下面积为 0 897、0 869和 0 968(P 0 05)。见表 2、图 1。表 2血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者的诊断效能指标最佳截断点AUC95%CI灵敏度(%)特异度(%)P 值PTTG1112 67 pg/mL0 8970 835 0 94183 6186 590 001TK13 71 pmol/L0 8690 802 0 91975 4197 560 001LncNA H194 610 9680 925 0 99091 8093 900 001注:PTTG1 为垂体瘤转化基因 1;TK1 为胸苷激酶 1;LncNA H19 为长链非编码 NA H19;AUC 为曲线下面积。图 1血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者的诊断效能的 OC 曲线23血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平比较不同原发性喉癌分期患者经单因素方差分析，不同分期的原发性喉癌患者之间，血清 PTTG1、TK1、LncNA H19表达水平差异均有统计学意义(P 0 05)。见表 3。24不同疗效患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平比较有效组患者血清 PTTG1、TK1、LncNAH19 表达水平均低于无效组(P 0 05)。见表 4。2 5血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者疗效的预测效能分析将患者以治疗结果进行分组，以不同分组为状态变量，PTTG1、TK1、LncNA H19为检验变量，进行 OC 曲线分析。OC 曲线结果显示，血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者疗效的预测效能均较高，曲线下面积为0 855、0 785 和 0 678(P 0 05)。见表 5、图 2。表 3不同原发性喉癌分期患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平比较分组例数 PTTG1(pg/mL)TK1(pmol/L)LncNA H19期组12106 76 16 153 01 1 044 68 0 86期组15126 16 15 244 41 1 415 50 0 90期组18148 67 22 345 17 1 296 40 0 87期组16168 30 30 846 21 1 337 58 0 84F 值21 49515 05129 171P 值0 0010 0010 001注:PTTG1 为垂体瘤转化基因 1;TK1 为胸苷激酶 1;Ln-cNA H19 为长链非编码 NA H19。表 4不同疗效患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19表达水平比较(x s)组别例数 PTTG1(pg/mL)TK1(pmol/L)LncNA H19有效组46130 33 25 014 44 1 665 89 1 39无效组15169 77 28 456 04 1 096 87 1 31t 值5 1283 4852 403P 值0 0010 0010 019注:PTTG1 为垂体瘤转化基因 1;TK1 为胸苷激酶 1;Ln-cNA H19 为长链非编码 NA H19。表 5血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者疗效的预测效能分析指标最佳截断点AUC95%CI灵敏度(%)特异度(%)P 值PTTG1145 55 pg/mL0 8550 741 0 93278 2680 000 001TK14 38 pmol/L0 7850 661 0 88056 52100 000 001LncNA H197 050 6780 546 0 79282 6146 670 028注:PTTG1 为垂体瘤转化基因 1;TK1 为胸苷激酶 1;LncNA H19 为长链非编码 NA H19;AUC 为曲线下面积。682杨荣松等:血清 PTTG1 TK1 LncNA 水平在原发性喉癌临床诊断及疗效预测中的价值第 44 卷第 3 期2023 年 3 月图 2血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者疗效的预测效能的 OC 曲线3讨论原发性喉癌的临床病理类型常表现为鳞癌，随着疾病进展患者病情由声嘶、咳嗽等症状逐渐进展为失声、呼吸困难、吞咽困难甚至吸入性肺炎，最终导致死亡10。目前，临床对于原发性喉癌的诊断以患者原发病灶的活检作为金标准，而活检通常在全麻或局麻情况下进行，声门上区的喉癌可安全获取较大的活检标本，声门型喉癌获取活检样本时则存在永久性声带损伤的风险，单纯影像学检查无法作为诊断的有效方法，通常将其作为辅助诊断的方法。因此，本研究探寻血清生物学标志物(PTTG1、TK1、LncNA H19)辅助诊断原发性喉癌的意义。PTTG1 又称分离酶抑制蛋白基因，具备调控姐妹染色单体分离的作用，参与细胞分裂、染色体稳定等生理过程，主要通过与多种转录因子相互作用发挥功能11。TK1 起初被用于血液系统恶性肿瘤的诊断，随着临床研究的深入，发现血清 TK1 可用于多种实体瘤的检测，且血清中的 TK1 含量增高与乳腺癌等恶性肿瘤的预后不良存在显著联系12。LncNA 指长度大于200 个核苷酸且不具备蛋白编码功能的 NA 分子，LncNA 在癌症患者中表现出表观遗传调控、DNA 损伤、细胞周期调控、参与信号传导通路等多种功能13。此前有研究14 认为，LncNA H19 在多种癌症中均呈现高表达。本研究结果显示，观察组血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平均高于对照组，说明 PT-TG1、TK1、LncNA H19 均可能参与了原发性喉癌的发生。目前认为，PTTG1 可通过调控细胞周期参与癌症发生、发展15;TK1 是产生、维持脱氧核糖核酸的必要物质，在 DNA 损失控制、修复、复制中有重要作用16;LncNA H19 可通过与多种癌基因、抑癌基因发生相互作用，进而调控肿瘤的生长、增殖、分化凋亡及侵袭转移17。本研究 OC 曲线分析结果显示，血清PTTG1、TK1、LncNA H19 对原发性喉癌患者的诊断效能均较高，说明上述 3 种指标均对诊断原发性喉癌有一定意义。李越峰等18 研究证实，TK1 用于癌症诊断的价值较高。本研究单因素方差分析结果显示，不同分期的原发性喉癌患者之间，血清 PTTG1、TK1、Ln-cNA H19 表达水平均存在显著差异。有研究19 认为，LncNA H19 高表达的喉癌患者 TNM 分期为期比例高于低表达喉癌患者，该结果提示 LncNA H19与癌症分期相关。本研究结果显示，有效组患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 均低于无效组，说明原发性喉癌患者疗效与血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 水平可能存在一定联系，而经 OC 曲线结果显示，血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平对原发性喉癌患者疗效的预测效能均较高。宋霖等20 研究认为，LncNA H19 是影响癌症患者预后的独立风险因素，有望成为患者预后评估的分子标志物。本研究不足之处在于:未分析原发性喉癌患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 的影响因素;未探究血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 之间是否存在相关性;未能探究生存期与原发性喉癌患者血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 之间的关系。临床可进一步延长原发性喉癌患者的随访时间，进一步分析患者生存期与上述指标的联系。综上所述，原发性喉癌与良性病变患者的血清PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平存在显著差异;OC 曲线结果显示，上述 3 种血清指标表达水平可用于鉴别原发性喉癌与良性病变患者。此外，原发性喉癌患者临床分期与血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 表达水平均呈正相关。就原发性喉癌的疗效情况来看，有效组血清 PTTG1、TK1、LncNA H19 更低，而上述指标可用于预测患者疗效，由此可见上述 3 种指标可作为原发性喉癌预后评估的辅助指标。参考文献 1 杨鑫，黄志纯，丁小琼 光学增强内镜在喉癌前病变及喉癌诊断中的初步应用 J 中国耳鼻咽喉头颈外科，2021，28(2):67 70 2 SHE D J，TIMMEMAN D，NEDZI L，et al Phase Ifractional dose escalation study of equipotent stereotactic ra-782第 44 卷第 3 期安徽医学2023 年 3 月Anhui Medical Journaldiotherapy regimens for early stage glottic larynx cancer J Int J adiat Oncol Biol Phys，2019，105(5):110 118 3 HU Z G，ZHENG C W，SU H Z，et al MicroNA 329 mediated 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