实验-肠道致病菌的分离鉴定.ppt

*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,Content,示教：,主要肠道杆菌，大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌及变形杆菌的形态、染色性,主要肠道杆菌的培养特性：SS平板/EMB平板,主要肠道杆菌的生化反应：双糖、尿素分解反应,操作：,肥达反应,粪便肠道致病菌的分离和鉴定血清学,(,*,续,),录像：,厌氧菌,肠道杆菌的分类,肠杆菌科,志贺菌属,埃希菌属,沙门菌属,克雷伯菌属,变形杆菌属,ETEC,EIEC,EPEC,EHEC,EAEC,痢疾、福氏、鲍氏、宋内,伤寒，副伤寒，猪霍乱，肠炎,肠道杆菌的基本特征,形态结构相似,培养要求不高,生化反应活跃,抗原结构复杂,抵抗力不强,易发生变异,双糖管,发酵乳糖,H,2,S试验,发酵葡萄糖(产酸产气)及动力,上层：乳糖,Fe,2+,固体,下层：葡萄糖,半固体,指示剂:酚红（pH6.8-8.4,黄 红）,致病菌红色,非致病菌黄色,观察：,乳糖 葡萄糖 动力 硫化氢,尿素酶,大肠埃希菌,+,痢疾志贺菌,+,伤寒沙门菌,+/,副伤寒杆菌,+,变形杆菌,+,红色,黄色,双糖管结果观察,黄色,黄色,可疑肠道致病菌,大肠埃希菌,双糖管接种方法,穿刺斜面接种法,肥达试验,原理：,伤寒沙门菌菌体O 抗原,伤寒沙门菌鞭毛抗原,甲型副伤寒沙门菌鞭毛H抗原,肖氏沙门菌鞭毛抗原,已知抗原,病人血清中的未知抗体,凝集,肥达试验,操作：,病人,血清,生理盐水,微量板,1,2,3,4,5,6,7,8,伤寒,O,0.2ml,0.2ml,伤寒,H,0.2ml,0.2ml,副甲,H,0.2ml,0.2ml,肖氏H,0.2ml,0.2ml,1:20,1:40,1:80,1:160,1:320,1:640,1:1280,生理盐水,混匀,Ag加样方向,抗原,肥达试验结果分析（1）,凝集程度：,（）上层液澄清，细菌全部凝集于孔底,（）上层液基本透明，细菌大部分（75）凝集于孔底,（）上层液半透明，细菌在孔底有明显凝集,（）上层液混浊，孔底有少量凝集,（）不凝集，同于对照,书写报告,：,反应的最高稀释度为凝集效价,肥达试验结果分析（2）,凝集效价,：伤寒沙门菌O,1：80，H,1：160,副伤寒沙门菌H,1：80,动态观察：双份血清，效价,4倍,O与H抗体的诊断意义：,OIgM,HIgG,O、H抗体均高：肠热症,O、H抗体均低：未患病,O抗体不高，H抗体高：回忆反应，预防接种,O抗体高，H抗体不高：感染早期，交叉反应,上次实验结果观察：,脓汁标本中的两种菌落：,黄色，完全溶血,白色，不溶血,接种甘露醇发酵管,革兰染色,观察是否发酵甘露醇,The End,Thanks,