1、ICS 65.020 B 16 DB65 新疆维吾尔自治区地方标准DB 65/ T 4221-2019 设施蔬菜根结线虫病绿色防控技术规程Technical Regulations for Green Prevention and Control ofRoot Knot Nematode Disease of Protected Vegetables L , ,各2019-7-1发布2019 -8-1实施新疆维吾尔自治区市场监督管理局发布D865/ T 4221-2019 目IJ1=1 本标准按照GB/T1.1-2009 标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写编写。本标准由新疆维吾尔自治区植
2、物保护站提出。本标准由新疆维吾尔自治区农业农村厅归口并组织实施。本标准起草单位:新疆维吾尔自治区植物保护站、新疆农业大学。本标准主要起草人:王惠卿、李克梅、魏新政、芦屹、任琛荣、刘艳祥、熊黎黎、1台海林、李晶。本标准实施应用中的疑问,请咨询自治区农业农村厅质量安全监管处、自治区植物保护站。对本标准的修改意见建议,请反馈至自治区市场监督管理局(乌鲁木齐市新华南路167号)、自治区植物保护站(乌鲁木齐市胜利路149号)。自治区市场监督管理局联系电话0991-2817197;传真0991-2311250;邮编830004自治区农业农村厅质量安全监管处联系电话0991-2878226;邮编830049
3、自治区植物保护站联系电话0991-5856242;传真0991一5856274;邮编830049D865/ T 4221-2019 设施蔬菜根结线虫病绿色防控技术规程1 范围本标准规定了设施蔬菜根结线虫(Meloi dogyne spp.)的术语和定义、根结线虫病的诊断、发生规律、防治策略及防控技术要求。本标准适用于新疆设施蔬菜根结线虫病的绿色防控。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 8321. 6农药合理使用准则(六)NY/T 393绿色食品农药
4、使用准则3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1 根结线虫病rootknot nematode 根结线虫病病原为根结线虫。根结线虫是隶属于动物界、线虫门、侧尾腺纲CSecernenta)、垫刃目CTylenchida)、垫刃亚目CTy 1 enchina)、垫刃总科CTy 1 enchoi dea)、异皮科CHeteroderidea)、根结亚科(Mloidogynina),根结线虫属CMeloidogyne)的一类细小动物。雌、雄虫异形,成熟雌虫梨形或拧橡形,多埋藏在寄主组织内,雄虫线状,尾端稍圆,无色透明。3. 2 2龄幼虫secondj uven i I e 根结线虫l龄幼虫在
5、卵内孵化,出壳后即为2龄幼虫,虫体线形,两端略尖,尾后部有较长的清晰的透明区。以2龄幼虫从寄主植物须根或侧根侵入并诱发病害。3. 3 绿色防控greencontrol 根据预防为主、综合防治的植保方针,采用农业防治、物理防治、生物防治、生态调控和科学用药等环境友好型措施,达到有效控制农作物病虫危害,确保农作物生产安全、农产品质量安全和农业生态环境安全的植物保护措施。3.4 高温闷棚high-temperatureseal ing treatment 0865/ T 4221-2019 盛夏季节,利用太阳的高温和药物熏蒸进行棚内消毒,一般在7月至8月上旬进行。3.5 低温冻棚low-temper
6、atureseal ing treatment 利用冬季低温,抑制病原物生存,减轻危害。4 根结线虫病的诊断4.1 病原设施蔬菜田发生危害的根结线虫主要有2种,即:南方根结线虫和北方根结线虫。4.2 危害症状病害主要发生在蔬菜根部,发病轻的病株症状不明显,重病株生长不良,植株矮小,结实小且少,严重时整株叶片黄化甚至萎焉枯死。患病植株根部产生多处根结,有时膨大成团状或葫芦状。根结初为白色,表面光滑,后期变褐、粗糙(参见附录B)。4,3 严重度分级指标见表1。表1根结线虫病单株发生程度级值分级标准单株严重度。无可见根瘤和卵块无发生根瘤总长度占总根长度的1%-24%;轻发生2 根瘤总长度占总根长度的
7、25%-49%;中等发生3 根瘤总长度占总根长的50%-74%;偏重发生4 根瘤总长度占总根长的75%-100%。严重发生4.4调查取样温室蔬菜种植(移栽定植前取样一次,种植(移栽定植)后每月取样一次。种植(定植前采用对角线5点取样法从ocm-20 cm的土层取土样,每个样点取200g土,充分混匀后用量杯量取100mL土样,用贝曼漏斗法分离线虫。种植(定植后同样采用上述5点取样方法采集土样并分离线虫,当发现蔬菜根部组织有根结症状时,同时采集蔬菜根部组织,每点采集3株,根据4.2中的严重度分级指标对病根进行分级记载。如样品不能及时分离,可置于1.C-TC冷藏保存,但冷藏时间不宜超过1周。4.5
8、分离从土壤或蔬菜根际组织中收集根结线虫的卵、2龄幼虫和成虫,常用的有直接解剖分离法、贝曼漏斗法、筛淘法。4.6 形态学检测2 D865/ T 4221-2019 在体视显微镜下直接用解剖针解剖根结,观察根系中是否有根结线虫雌虫。用贝曼漏斗法分离土壤中线虫,用培养皿收集分离的根结线虫,在体视显微镜下观察是否有根结线虫雄虫和2龄幼虫。常见根结线虫诊断特征(参见附录的。5 发生规律5.1 寄主种类根结线虫对寄主的选择范围十分广泛,包括双子叶植物、单子叶植物、草本植物和木本植物在内大约114个科3000多种植物,以危害番茄和瓜类最为严重。设施蔬菜根结线虫可危害瓜类、番茄、茄子、辣椒、菜豆、芹菜、菠菜等
9、几十种蔬菜,尤以茄科植物(番茄)、葫芦科(黄瓜)为侵染对象居多。5.2 危害传播根结线虫多分布在ocm-20 cm土壤内,5 cm-15 cm土层中数量最多,以2龄幼虫从寄主幼根侵入、繁殖,剌激根部形成根结,4龄时交尾产卵,可周年循环危害蔬菜,并通过带虫土、苗或灌溉水传播。新疆冬季寒冷,根结线虫露地无法越冬,以卵或2龄幼虫随病株残体留在土壤中越夏(参见附录A)。6 防治策略设施蔬菜根结线虫主要生活在土壤中,应采用农业防治、物理防治、生态调控、化学防治及生物防治相结合的绿色防控技术防治。7 防控技术7. 1 农业防治a)选用抗病、耐病品种;b)用充分腐熟的有机肥;c)选用无病土育苗,定植前实行严
10、格种苗检验;d)采用滴灌避免病原线虫随水流传播;e)清除病残体,生长期及时清除杂草,生长季结束后,结合深翻收集蔬菜及杂草病根,集中深埋或晒干后烧毁。7.2 生态调控选择番茄、瓜类、豆类等蔬菜与根结线虫不喜食的如辣椒、甘蓝、葱、蒜、韭菜等倒茬。种植可被根结线虫侵染但在雌虫产卵前即可采收的短季速生作物,如泊麦菜、大白菜、叶用离宦、菠菜等,诱集线虫,减轻对下茬蔬菜的危害。7.3 物理防治7.3.1 高温闷棚7月-8月休闲季节,深翻病土于阳光下暴晒20d,或混入掺有秸轩的腐熟牛粪灌透水后覆盖地膜封15 d以上,高温时节中午可使地下30cm土温达到55C-60C,杀死ocm-30 cm土层中的根结线虫。
11、高温闷棚处理后揭开棚膜,3d后即可恢复种植,种植前应补充微生物菌肥。7.3.2 低温冻棚3 DB65/ T 4221-2019 发病严重的温室,可于冬季休棚后1次灌透水,不扣棚覆膜,经1个月-2个月的土壤结冰冷冻,利用冬季低温冻死线虫,可有效控制根结线虫对下茬蔬菜的危害。7.4 生物防治定植前,用5亿c臼/g淡紫拟青霉颗粒剂1.5kg/667 m2-3 kg/667 m2与农家肥、化肥混匀做底肥施用,可穴施或沟施;或在移栽时采用含2亿cfu/g枯草芽抱杆菌、康氏木霉菌、EM菌混合菌剂1.5kg/667 m2r-.-3 kg/667 m2的生物菌剂作为定根水灌根。7.5 化学防治农药选择能符合N
12、Y/T393的要求,注意每种杀虫剂连续使用不超过2次,交替轮换使用。4 D865/ T 4221-2019 附录A(资料性附录)设施蔬菜根结线虫的危害与发生规律A. 1发生与危害线虫是一类两侧对称原体腔无脊椎动物。世界上大约有50到100万种线虫种类,仅有10%是植物线虫,是仅次于昆虫的第二类动物。全球范围内收录的植物线虫己有260属5700余种。根结线虫首次由Berkley于1855年发现寄生于黄瓜根部,1879年Comu将其命名为根结线虫。根结线虫隶属于动物界、线虫门、侧尾腺纲CSecernentea )、垫刃目CTylenchida )、垫刃亚目CTylenchina )、垫刃总科CTy
13、lenchoidea)、异皮科CH eteroderide、根结亚科CMeloidogyninae) ,根结线虫属CMeloidogyne)。它是一类非常重要的植物病原线虫,在全球范围内分布广泛。目前,世界上共记录了106种根结线虫,包括89个命名种、13个同物异名种及4个疑问种。新疆对蔬菜危害最大的根结线虫主要有2个种,分别是南方根结线CMeloidogynincognita)和北方根结线虫CMhapla)。这2个根结线虫种的寄主范围非常广泛,同时也是根结线虫属的主要种类,危害也最为严重。根结线虫对寄主的选择范围十分广泛,包括双子叶植物、单子叶植物、草本植物和木本植物在内大约114个科300
14、0多种植物,以危害番茄和瓜类最为严重。据调查,在新疆设施蔬菜根结线虫可为害瓜类、番茄、茄子、辣椒、菜豆、芹菜、菠菜等几十种蔬菜,尤以茄科植物(番茄、葫芦科(黄瓜为侵染对象居多,通常造成减产10%-20 %,严重的达30%-50 %,甚至绝产,毁苗重种事件经常发生。1991年全俊仁等首次在温室中发现新疆辣椒根结线虫,经鉴定为北方根结线虫CM hapla ) 0 2009年杜兰英等在新疆哈密发现黄瓜根结线虫病的发生。目前,根结线虫病已经在新疆多地设施蔬菜发生严重并己经造成了很大的损失,特别是在阿克苏、吐鲁番、伊犁、轮台、库尔勒等南北疆设施蔬菜发生危害严重。据调查,2006年乌鲁木齐市板房沟温室黄瓜
15、和番茄的根结线虫病发生严重,造成黄瓜和番茄减产65 %r-.-70 %0 2011年在库尔勒市英下乡设施蔬菜种植基地调查,蔬菜根结线虫病在10年以上的大棚中发生普遍,许多大棚中的虹豆、四季豆、黄瓜、苦瓜、芹菜,甚至杂草发病率达100%,有的温室因损失严重,造成弃耕。A.2 发生规律新疆冬季寒冷,根结线虫露地无法越冬,而设施蔬菜的栽培模式可使线虫安全越冬,实现周年循环危害。根结线虫多分布在ocm-20 cm土壤内,5 cm-15 cm土层中数量最多,常以卵或2龄幼虫随病株残体留在土壤中越夏。待温度适宜、有寄主蔬菜生长时,卵孵化成2龄幼虫从寄主幼根侵入、繁殖,刺激根部形成根结。线虫发育至4龄时交尾
16、产卵,卵在根结中孵化出2龄幼虫至土中再次侵染危害或越夏。在无休闲的设施大棚内,线虫可全年危害蔬菜,并通过带虫土、苗或灌溉水传播。地势高、土质疏松、湿度适当的沙土地,最适宜根结线虫活动,发病较重;而土壤潮湿、粘重、板结的田块,不利于根结线虫活动,发病轻。土壤肥沃,幼苗健壮,水肥适宜,植株长势好,则抗线虫能力强,发病轻;连作地发病重。因此,在新疆一些设施蔬菜产区,该病害危害更为严重。5 D865/ T 4221-2019 A.3 生物学特性根结线虫生活史见图A.l:r d t dA王王一c:L互?可达锺虫窟开提-、:r非取食后的J2侵挚期姐虫图A.1根结线虫生活史哇墨萝第一次蜕皮pp画为却由如图A
17、.l所示,根结线虫的生活史为卵、幼虫、成虫。首先根结线虫卵经过适宜的条件在卵壳内经过第一次蜕皮发育成2龄幼虫,通过口针破壳而出,游离进入土壤。2龄幼虫是根结线虫侵染危害植物的唯一有效龄期,根的分泌物质会诱导2龄幼虫找到寄主,一旦找到适合的寄主后就会从须根或主根的根尖侵入寄主,在根内靠近伸长区的生长锥内定居并长大,并引发根结。2龄幼虫经过第2次蜕皮后,口针退化,不再进食,变成4龄幼虫。根结线虫生活史的不同阶段,幼虫的体形也会随之发生变化,从椭圆形的卵到线形,发育成成虫后,雄虫为线性,雌虫为梨形,线虫体内的生殖器官也随之发育成熟。4龄幼虫在经过第四次蜕皮之后,雄虫又细又长,口针和中食道球重新发育,
18、开始取食,生殖系统发育完全,雌、雄虫交配后,雄虫进入土壤中活动,可以存活几个星期。雌虫形状为梨形,头部稍尖,消化系统发育完全,继续在寄主植物根内生活并产卵,完成其生活周期。每头雌虫大约可产卵300粒800 粒。根结线虫生活史受温度影响很大,一般在27.C下,完成一个生活史需要25 d,温度过高或过低时,所需时间会更长。根结线虫生殖方式为有性生殖和孤雌生殖。南方根结线虫、爪哇根结线虫、花生根结线虫、北方根结线虫的种群和其它一些常见的种,都进行孤雌生殖。土温25.C -28 oC、相对湿度40%70 %条件下,线虫繁殖很快,25 d30 d可以繁殖1代;在土温高于40.C、低于5.C很少活动,致死
19、温度为55 .C。6 OB65/ T 4221-2019 附录B(资料性附录)蔬菜根结线虫病诊断与鉴定方法B.1 危害症状病害主要发生在蔬菜根部,发病轻的病株症状不明显,重病株生长不良,植株矮小,结实小且少,严重时整株叶片黄化甚至萎焉枯死。患病植株根部产生多处根结,有时膨大成团状或葫芦状。根结初为白色,表面光滑,后期变褐、粗糙。症状如图B.1所示:a:番茄根部症状b.苦瓜根部症状C:根部解剖图示白色雌虫)图B.1 根结线虫侵染植物根部症状B.2诊断和鉴定方法剖开疑似根结线虫病的蔬菜根部根结,可见其中有针尖大小的乳白色近透明的梨形雌虫。经贝曼漏斗法可分离病根周围土壤获得2龄幼虫和雄虫。根结线虫属
20、中有100个种,其中南方根结线虫和北方根结线虫是地理分布和寄主范围最广的、最常见的种类。表B.1、表B.2、表B.3是2种根结线虫雌虫、雄虫和2龄幼虫主要形态鉴别特征的比较。表B.1 2种常见根结线虫雌虫的主要形态鉴别特征鉴别项目Mincognita 1M. hapla 会阴花纹背弓高,似方形低,圆会阴花纹侧区侧线清楚,光滑到波状,或缺,或由于侧线不明显线纹断裂并且分叉形成刻痕会阴花纹线纹细到粗,清楚,有时呈Z型细,光滑到稍波浪状会阴花纹端部常有纹涡无涡纹,角质层下有刻点口针锥体部前半部明显向背面弯略向背面弯,细弱口针杆部后部稍宽后部稍宽口针基部球给缩,圆到横向延伸,有时前缘呈齿状结缩,小,圆
21、口针长(m)I 1517 I 1417 * DEGO (m) 124 156 注*DEGO:背食道腺开口到口针基部的距离。7 DB65/ T 4221-2019 表B.22种常见根结线虫2龄幼虫的主要形态鉴别特征鉴别项目M. incogni ta M. hapla 头帽前端平、宽圆,窄头部通常有13个不完整的环纹圆,通常光滑口针宽度针锥部和杆部中等宽针锥部和杆部窄口针基部球给缩,圆,向后倾斜给缩,圆,小口针长(m)10 12 1012 DEGO (m) 2-3 3,. . -4 尾长(m)4263 4669 透明尾长(阳6 13.5 1219 体长(m)346463 357,-.,517 表B
22、.32种常见根结线虫雌虫的主要形态鉴别特征鉴别项目M. incogni ta M. hapla 头帽平到凹陷,唇盘高出中唇高、窄头部不给缩,通常有23个不完整的环纹生益缩,直径大于第一体环口针锥体部剑状,顶端钝细弱,顶端尖口针杆部通常柱形,近基部球处常变窄柱形,近基部较宽或较窄口针基部球给缩,圆到横向延伸,有时前缘呈齿状1益缩,小,圆口针长(m)2325 1723 DEGO (阳n)2,-.,4 4-5 北方根结示意图见图B.2,南方根结线虫示意图见图B.3。C A G刊F 阿A.雄虫头部,B.雄虫口针,C,D.会阴花纹,E,F.雌虫口针,G.2龄幼虫口针,H.2龄幼虫头部图B.2北方根结线虫(M.hap/a) 图B.3南方根结线虫(M.i ncogn i ta) 8