SN∕T 3328-2012 扇贝物种鉴定方法 SSR方法(出入境检验检疫).pdf
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1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 扇贝物种鉴定方法犛 犛 犚法犘 狉 狅 狋 狅 犮 狅 犾 狅 犳 犻 犱 犲 狀 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狊 犮 犪 犾 犾 狅 狆 狊犛 犻 犿 狆 犾 犲 狊 犲 狇 狌 犲 狀 犮 犲狉 犲 狆 犲 犪 狋 狊(犛 犛 犚) 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书犜犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行业标准扇贝物种鉴定方法犛 犛 犚法 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京市朝阳区和平里西街甲号( )北京市西城区三里河北街 号( )总编室: ( ) 网址 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印
2、张 字数 千字 年月第一版 年月第一次印刷印数 书号: 定价 元书书书前言本标准按照 给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布结构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位: 中华人民共和国烟台出入境检验检疫局、 中华人民共和国山东出入境检验检疫局。本标准主要起草人: 方绍庆、 岳志芹、 尹伟力、 刘宁、 张京宣、 于红光、 王颖、 许红岩、 钟响、 鲁闽、 段效辉、栾晶、 粟智平、 耿金培。犛 犖犜 扇贝物种鉴定方法犛 犛 犚法范围本标准规定了扇贝物种 鉴定方法。本标准适用于进出境冰鲜、 干制、 熟制罐头类水产品中对扇贝的种
3、类鉴定。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件, 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改单) 适用于本文件。 分析实验室用水规格和试验方法 基因检验实验室技术要求术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 简单序列重复 狊 犻 犿 狆 犾 犲 狊 犲 狇 狌 犲 狀 犮 犲 狉 犲 狆 犲 犪 狋;犛 犛 犚微卫星 侧翼区序列比较保守, 核心区以的核苷酸序列成首尾相连的串联重复。微卫星在真核生物基因组中分布广泛, 具有多态性丰富、 共显性遗传、 结果稳定等优点, 目前已在种群遗传分析、 亲本鉴定、 遗传连锁图谱构建等方面
4、得到广泛应用。 聚合酶链式反应狆 狅 犾 狔 犿 犲 狉 狀 犪 狊 犲 犮 犺 犪 犻 狀狉 犲 犪 犮 狋 犻 狅 狀;犘 犆 犚以耐热 聚合酶和一对引物( 与待测目标核酸分子序列同源的 片段) 通过高温( 分子变性) 和低温( 引物和目标核酸分子复性并被耐热 聚合酶延伸) 交替循环扩增待测目标核酸分子的方法。原理制备并筛选栉孔扇贝、 华贵栉孔扇贝、 虾夷扇贝和海湾扇贝小的 片段, 利用小插入片段文库筛选微卫星标记, 构建小型基因组 文库。然后使用含有特定重复序列的寡聚核苷酸序列的序列设计引物, 对四种扇贝进行特异性 扩增, 对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳, 对目的物种扩增出 片断判定扇贝种
5、类。扇贝形态特征参见附录。仪器设备和主要试剂 仪器设备 仪、 组织研磨器、 超净工作台、 制冰机、 高速冷冻离心机、 水浴锅、 台式小型离心机、 常规冰箱、犛 犖犜 旋涡振荡器、 电泳仪、 凝胶成像系统。 主要试剂除另有规定外, 所有试剂均为分析纯。 水: 应符合 中一级水的规格。用于 ( 包括核酸提取) 时所用的水均用 处理以除掉 酶。 苯酚。 三氯甲烷。 蛋白酶 。 异丙醇。 无水乙醇。 乙醇。 硫酸镁。 。 犜 犪 狇 聚合酶。 缓冲液。 。 核酸染料。 琼脂糖。 电泳缓冲液( 配方见附录) 。 上样缓冲液( 配方见附录) 。 引物见表。表引物序列种类引物序列( )栉孔扇贝 (犆 犺 犾
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