SN∕T 4252-2015 出口动物源性食品中咪唑脲苯残留量检测方法 液相色谱法和液相色谱-质谱∕质谱法.pdf
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1、书 书 书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 出口动物源性食品中咪唑脲苯残留量检测方法液相色谱法和液相色谱质谱质谱法犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犻 犿 犻 犱 狅 犮 犪 狉 犫狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿犪 犾狅 狉 犻 犵 犻 狀犳 狅 狉犲 狓 狆 狅 狉 狋犎犘犔犆犿犲 狋 犺 狅 犱犪 狀 犱犔犆 犕犛犕犛犿犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书 书 书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准出口动物源性食品中咪唑脲苯残留量检测方法液相色谱法和液相色谱质
2、谱质谱法 中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲号( )北京市西城区三里河北街 号( )总编室: ( ) 网址 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数 千字 年月第一版 年月第一次印刷印数 书号: 定价 元书 书 书前言本标准按照 给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院,中华人民共和国河北出入境检验检疫局。本标准主要起草人:李晓娟、李玮、王凤池、艾连峰、彭涛、陈冬东、代汉慧、段文仲。犛犖犜 出口动物源性食品中咪唑脲苯残留量检测方法液相色谱法和液
3、相色谱质谱质谱法范围本标准规定了出口动物源性食品中咪唑脲苯残留量的液相色谱测定与液相色谱质谱质谱确证方法。本标准适用于牛肉、羊肉、牛肝、羊肝、牛肾、羊肾、牛奶中咪唑脲苯残留量的测定及确证。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 分析实验室用水规格和试验方法方法提要试样中的咪唑脲苯用三氟乙酸乙腈混合溶液提取,经混合型阳离子交换固相萃取柱净化,高效液相色谱测定,外标法定量,液相色谱质谱质谱法确证。试剂和材料除另有说明外,所用试剂均为分析纯。 乙腈:色谱纯。 甲醇:色谱
4、纯。 三氟乙酸:色谱纯。 氢氧化钠:分析纯。 乙酸铵:优级纯。 甲酸:分析纯。 乙酸:分析纯。 三氟乙酸水溶液:取 三氟乙酸( ) ,用水稀释并定容至 ,混匀。 三氟乙酸水溶液:取 三氟乙酸( ) ,用水稀释并定容至 ,混匀。 提取液:三氟乙酸水溶液乙腈(,体积比) 。取 三氟乙酸水溶液( ) ,取 乙腈,混匀。 洗脱液:三氟乙酸甲醇溶液。取三氟乙酸( ) ,用甲醇稀释并定容至 ,混匀。 甲酸水溶液:取 甲酸( ) ,用水稀释并定容至 ,混匀。 定容液: 甲酸水溶液乙腈(,体积比) 。取 甲酸水溶液,取 乙腈,犛犖犜 混匀。 氢氧化钠溶液:称取 氢氧化钠( ) ,用 水溶解,混匀。 乙酸乙酸铵
5、溶液( ) :称取 乙酸铵( ) ,加入 乙酸( ) ,用水稀释并定容至 ,混匀。 弱阳离子交换与反相吸附混合型固相萃取柱: ( ,) ,或相当者。使用前用乙腈活化,待用。 标准品:咪唑脲苯, ,纯度大于等于 。 标准储备液:准确称取咪唑脲苯 (精确至 ) ,用甲醇溶解并定容至 ,配置成浓度约为 的标准储备液。该溶液于以下避光保存,有效期为个月。 标准工作液:根据需要用定容液( )将标准储备液稀释成适当浓度的标准工作溶液,标准工作溶液需现用现配。仪器与设备 液相色谱仪:配紫外检测器或二极管阵列检测器。 液相色谱串联四极杆质谱仪:配电喷雾离子源。 分析天平:感量为 和 。 组织捣碎机。 离心机。
6、 均质器。 固相萃取装置。 旋涡混合器。 氮气吹扫浓缩仪。样品制备与保存 肌肉、内脏样品取代表性样品约 ,取可食部分并切割成小块,用组织捣碎机捣碎并混合均匀,分成份,分别装入洁净的容器中,密封并标识。将试样置于 以下保存。 牛奶样品取代表性样品约 ,充分混匀,分成份,分别装入洁净的容器中,密封并标识。将试样置于以下避光保存。 在取样、制样和试样保存过程中,应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。分析步骤 提取 肉、肝、肾脏样品称取 试样(精确至 ) ,置于 具塞离心管中,加入 提取液( ) ,均质提取 ,然后以 的转速离心 ,将上清液转移至 具塞刻度试管中,残渣再用 提取液( )按上述步骤重
7、复提取两次,合并上清液,并用提取液( )定容至 。分取出样液(相当于 样品)于另一离心管中,向样液中缓慢滴加氢氧化钠溶液( )调节样液的犛犖犜 值约为 ,然后以 的转速离心 ,待净化。 牛奶称取 试样(精确至 ) ,置于 具塞刻度离心管中,加入提取液( )并定容至 ,涡旋混合 ,然后以 的转速离心 ,分取出样液(相当于 样品)于另一离心管中,向样液中缓慢滴加氢氧化钠溶液( )调节样液的值约为 ,然后以 的转速离心 ,待净化。 净化将样液( )转移至固相萃取柱上( ) ,控制样液通过固相萃取柱的流速低于 ,再依次用水和甲醇淋洗,弃去全部流出液,用洗脱液( )进行洗脱,收集洗脱液。洗脱液在 下氮气
8、吹扫浓缩至干,加入定容液( )溶解残渣,样液过 滤膜,供液相色谱或液相色谱串联质谱测定。 液相色谱测定 液相色谱参考条件参考条件如下:)色谱柱: 柱, ,粒度,或相当者;)柱温: ;)进样量: ;)流速: ;)检测波长: ;)流动相组成及梯度洗脱条件:见表。表液相色谱流动相组成及梯度洗脱条件时间 三氟乙酸溶液乙腈 定量测定在仪器最佳状态下,采用相同的分析条件,对标准工作溶液和样液等体积参插进样。以咪唑脲苯色谱峰峰面积对其标准溶液浓度绘制标准工作曲线。试样中咪唑脲苯的响应值应在线性范围内,若其响应值超过线性范围,可调整样液的定容体积使之满足定量线性范围的要求。在上述仪器条件下,咪唑脲苯的保留时间
9、为 。咪唑脲苯标准溶液的液相色谱图参见附录。犛犖犜 液相色谱质谱质谱确证 液相色谱参考条件参考条件如下:)色谱柱: , (内径) ,填料粒度;)柱温: ;)进样量:;)流速: ;)流动相组成及梯度洗脱条件见表。表液相色谱的流动相及梯度洗脱条件时间 乙酸乙酸铵溶液( ) 甲醇 质谱参考条件参考条件如下:)离子化模式:电喷雾电离正离子模式( ) ;)质谱扫描方式:多反应监测() ;)毛细管电压: ;)干燥气温度: ;)干燥气流量: ;)雾化器压力: ;)碰撞气:氮气;)其他质谱参数:见表。表犕犚犕质谱参数化合物母离子犿狕子离子犿狕驻留时间裂解电压碰撞能量咪唑脲苯 定性和确证在上述条件下测定试样和标
10、准溶液,如果样液中检测的色谱峰的保留时间与标准工作溶液检测的色谱峰的保留时间相一致(允许偏差在 之内) ;液相色谱中检测到的色谱峰经过液相色谱质谱质谱确证,其相对丰度比满足表中所规定的范围要求,则可判定为样品中残留咪唑脲苯。咪唑脲苯犛犖犜 谱图参见附录。表定性时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 空白试验除不加试样外,均按上述操作步骤进行。结果计算与表述试样中咪唑苯脲残留量利用数据处理系统按外标法计算或按式()计算:犡犮犿 ()式中:犡 试样中被测组分残留量,单位为微克每千克( ) ;犮 从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度,单位为纳克每毫升( ) ; 试样溶液定容体积,单
11、位为毫升() ;犿 试样溶液所代表的质量,单位为克() 。计算结果应扣除空白值。测定低限和回收率 测定低限本标准中咪唑脲苯的测定低限为 。 回收率下列基质中咪唑脲苯的添加回收率如下:牛肉:添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 。羊肉:添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 。牛肝:添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 。羊肝:添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 。牛肾:添加水平为 ,回收率范围为
12、;犛犖犜 添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 。羊肾:添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 。牛奶:添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 ;添加水平为 ,回收率范围为 。犛犖犜 附录犃(资料性附录)咪唑脲苯标准品的液相色谱图图犃 咪唑脲苯标准品液相色谱图犛犖犜 mAU 5.2 min 6 5 4 3 2 。2.5 5 t/min 附录犅(资料性附录)咪唑脲苯标准品犕犚犕谱图犪)犫)图犅 咪唑脲苯标准品犕犚犕图犛犖犜 犉 狅 狉 犲狑狅 狉 犱犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犱 狉 犪 犳
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16、狑犲 狀 狕 犺 狅 狀 犵犛犖犜 犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犻 犿 犻 犱 狅 犮 犪 狉 犫狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲犻 狀犳 狅狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿犪 犾狅 狉 犻 犵 犻 狀犳 狅 狉犲 狓狆狅 狉 狋犎犘 犔犆犿犲 狋 犺 狅 犱犪 狀 犱犔犆 犕犛犕犛犿犲 狋 犺 狅 犱犛犮 狅狆犲犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犮 狅 狀 犳 犻 狉犿犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犻犿犱 狅 犮 犪 狉 犫狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲犻
17、狀犪 狀 犻犿犪 犾狅 狉 犻 犵 犻 狀犳 狅狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊犳 狅 狉犲 狓狆 狉 狅 狋犫 狔犎犘 犔犆犪 狀 犱犔犆 犕犛犕犛犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犮 狅 狀 犳 犻 狉犿犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犻犿犱 狅 犮 犪 狉 犫狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲犻 狀犫 犲 犲 犳,犿狌 狋 狋 狅 狀,犾 犻 狏 犲 狉,犽 犻 犱 狀 犲 狔犪 狀 犱犿 犻 犾 犽犖狅 狉犿犪 狋 犻 狏 犲狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊犜犺 犲犳 狅
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19、 狌 犫 狊 犲 狇 狌 犲 狀 狋犪犿犲 狀 犱犿犲 狀 狋 狊)狉 犲 犳 犲 狉 狉 犲 犱狋 狅犪 狆 狆 犾 犻 犲 狊犌犅犜 犠犪 狋 犲 狉犳 狅 狉犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮犾 犪 犫 狅 狉 犪 狋 狅 狉 狔狌 狊 犲犛狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狋 犲 狊 狋犿犲 狋 犺 狅 犱 狊犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲犜犺 犲犻犿犱 狅 犮 犪 狉 犫狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲犻 狀狋 犺 犲狋 犲 狊 狋狊 犪犿狆 犾 犲犪 狉 犲犲 狓 狋 狉 犪 犮 狋 犲 犱狑 犻 狋 犺狋 狉 犻 犳 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪
20、犮 犻 犱 犪 犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲,犮 犾 犲 犪 狀 狌 狆犫 狔犛犘犈犿犲 狋 犺 狅 犱狑 犻 狋 犺犠犆犡,狇 狌 犪 狀 狋 犻 狋 犪 狋 犻 狏 犲犫 狔犎犘 犔犆狑 犻 狋 犺犲 狓 狋 犲 狉 狀 犪 犾狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犿犲 狋 犺 狅 犱,犪 狀 犱犆狅 狀 犳 犻 狉 犿犪 狋 犻 狅 狀犫 狔犔犆 犕犛犕犛犿犲 狋 犺 狅 犱犚犲 犪 犵犲 狀 狋 狊犪 狀 犱犿犪 狋 犲 狉 犻 犪 犾 狊犝狀 犾 犲 狊 狊狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮 犪 犾 犾 狔犿犲 狀 狋 犻 狅 狀 犲 犱,犪 犾 犾狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋 狊狌
21、 狊 犲 犱狊 犺 狅 狌 犾 犱犫 犲犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾犵 狉 犪 犱 犲 犃犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲:犎犘 犔犆犵 狉 犪 犱 犲 犕犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾:犎犘 犔犆犵 狉 犪 犱 犲 犜 狉 犻 犳 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱:犎犘 犔犆犵 狉 犪 犱 犲 犛犖犜 犛狅 犱 犻 狌犿犺 狔 犱 狉 狅狓 犻 犱 犲 犃犿犿狅 狀 犻 狌犿犪 犮 犲 狋 犪 狋 犲:犌狌 犪 狉 犪 狀 狋 犲 犲狉 犲 犪 犵 犲 狀 狋(犌犚) 犉狅 狉犿 犻 犮犪 犮 犻 犱 犃犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱 狋 狉 犻 犳
22、 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狇 狌 犲 狅 狌 狊狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀:犜 狉 犪 狀 狊 犳 犲 狉 犿犔狋 狉 犻 犳 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱( )犻 狀 狋 狅 犿犔狏狅 犾 狌犿犲 狋 狉 犻 犮犳 犾 犪 狊 犽,犱 犻 犾 狌 狋 犲狋 狅狋 犺 犲犵 狉 犪 犱 狌 犪 狋 犻 狅 狀狑 犻 狋 犺狑犪 狋 犲 狉,狋 犺 犲 狀犿 犻 狓狌 狀 犻 犳 狅 狉犿 犾 狔 狋 狉 犻 犳 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狇 狌 犲 狅 狌 狊狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀:犜
23、 狉 犪 狀 狊 犳 犲 狉 犿犔狋 狉 犻 犳 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱( )犻 狀 狋 狅 犿犔狏狅 犾 狌犿犲 狋 狉 犻 犮犳 犾 犪 狊 犽,犱 犻 犾 狌 狋 犲狋 狅狋 犺 犲犵 狉 犪 犱 狌 犪 狋 犻 狅 狀狑 犻 狋 犺狑犪 狋 犲 狉,狋 犺 犲 狀犿 犻 狓狌 狀 犻 犳 狅 狉犿 犾 狔 犈狓 狋 狉 犪 犮 狋 犻 狅 狀狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀:狋 狉 犻 犳 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狇 狌 犲 狅 狌 狊狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀犃犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲(,犞犞)
24、犜 狉 犪 狀 狊 犳 犲 狉 犿犔狋 狉 犻 犳 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狇 狌 犲 狅 狌 狊狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀( )犪 狀 犱 犿犔犪 犮 犲 狋 狅 狀 犻 狋 狉 犻 犾 犲,狋 犺 犲 狀犿 犻 狓狌 狀 犻 犳 狅 狉犿 犾 狔 犈 犾 狌 狋 犻 狅 狀狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀:狋 狉 犻 犳 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱犿犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犜 狉 犪 狀 狊 犳 犲 狉犿犔狋 狉 犻 犳 犾 狌 狅 狉 狅 犪 犮 犲 狋 犻 犮犪 犮 犻 犱( )犻 狀
25、 狋 狅 犿犔狏狅 犾 狌犿犲 狋 狉 犻 犮犳 犾 犪 狊 犽,犱 犻 犾 狌 狋 犲狋 狅狋 犺 犲犵 狉 犪 犱 狌 犪 狋 犻 狅 狀狑 犻 狋 犺犿犲 狋 犺 犪 狀 狅 犾,狋 犺 犲 狀犿 犻 狓狌 狀 犻 犳 狅 狉犿 犾 狔 犉狅 狉犿 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狇 狌 犲 狅 狌 狊狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀:犜 狉 犪 狀 狊 犳 犲 狉 犿犔犳 狅 狉犿 犻 犮犪 犮 犻 犱( )犻 狀 狋 狅 犿犔狏狅 犾 狌犿犲 狋 狉 犻 犮犳 犾 犪 狊 犽,犱 犻 犾 狌 狋 犲狋 狅狋 犺 犲犵 狉 犪 犱 狌 犪 狋 犻 狅 狀狑 犻 狋 犺狑犪 狋 犲 狉,狋 犺 犲
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