NY∕T 3282.1-2018 真菌微生物农药 金龟子绿僵菌 第1部分:金龟子绿僵菌母药(农业).pdf
《NY∕T 3282.1-2018 真菌微生物农药 金龟子绿僵菌 第1部分:金龟子绿僵菌母药(农业).pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《NY∕T 3282.1-2018 真菌微生物农药 金龟子绿僵菌 第1部分:金龟子绿僵菌母药(农业).pdf(15页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、ICS 65.100 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/ T 3282.1-2018 真菌微生物农药金龟子绿僵菌第1部分:金龟子绿僵菌母药Fungal pesticides-Metarhizium anisopliae一Part 1: Metarhizium anisopliae technical concentrate (TK) 2018-07 -27发布2018-12 -01实施;筒中华人民共和国农业农村部发布NYjT 3282. 1-2018 目U昌NYj T 3282(真菌微生物农药金龟子绿僵菌分为3个部分:一一第l部分:金龟子绿僵菌母药;一一第2部分:金龟子绿僵菌油悬
2、浮剂;第3部分:金龟子绿僵菌可湿性粉剂。本部分为NY/T3282的第1部分。本部分按照GBjT 1. 1-2009给出的规则起草。本部分由农业农村部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位:农业农村部农药检定所、重庆大学、重庆重大生物技术发展有限公司。本部分主要起草人:王中康、王晓军、殷幼平、杨峻、李向英、郭明程、胡丽。I 1 范围真菌微生物农药金龟子绿僵菌第1部分:金龟子绿僵菌母药NY/T 3282. 1-2018 本部分规定了金龟子绿僵菌母药的术语和定义、要求、试验方法、产品的检验和验收,以及标志、标签、包装、储运、安全和保质期。本部分适用于以分生抱子为主要成分的粉状金龟子绿僵菌母药。2 规
3、范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/ T 191 包装储运图示标志GB/ T 1601 农药pH值的测定方法GB/ T 1604 商品农药验收规则GB/ T 1605 商品农药采样方法GB 3796 农药包装通则GB/ T 8170-2008 数值修约规则与极限数值的表示和判定GB/ T 16150 农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1 金龟子绿僵菌母药Metarhizium anisopliae technica
4、l concentrate(TK) 金龟子绿僵菌纯菌种经生物发酵获得的高含量的单一或组合形态的活菌体母药,通常情况还会包含伴随发酵过程的相关生物组分。3. 2 分生抱子conidia 真菌的一种无性繁殖细胞,由分生抱子梗上产抱细胞产生,是真菌农药中最常见的形态,简称抱子。3. 3 含抱量spore content 每单位金龟子绿僵菌母药样品中所含金龟子绿僵菌抱子的数量。3.4 活于包率percentage of Iiving spores 即抱子萌芽率,指在一定培养条件下,萌芽的金龟子绿僵菌抱子数占总抱子数的百分率。3.5 菌落形成单位colony forming units( CFU) 以涂
5、布方法,使单个分生抱子分散生长在营养琼脂培养基上,每一活抱子形成一个菌落,即为菌落形成单位(CFU)。1 NY/T 3282. 1-2018 3.6 杂菌率rate of microbial contaminants 金龟子绿僵菌母药样品中除绿僵菌抱子外,其他菌(真菌和细菌等)量占总菌量的百分率。3.7 储存稳定性storage stability 金龟子绿僵菌母药在室温或低于室温下密闭储存一定时间后,产品的活抱数占其标明值的相对百分率。4 要求4. 1 外观外观通常为浅绿色至暗绿色粉末,由于发酵基质的不同颜色偶有差异;应为均匀疏松的粉末,不应有结块。4.2 规范项目及指标金龟子绿僵菌母药质量
6、控制项目应符合表1的要求。表1金龟子绿僵菌母药控制项目指标项目指标含抱量,亿袍子/g二三250活于包率,%二三85杂菌率,%5 干燥减盘,%主二8细度(通过175m试验筛),%二三90pH 5.5-7.0 储存稳定性a,%二三80定期检测项目:每6个月检测一次。5 试验方法5.1 一般规定除非另有说明,试验方法所用试剂级别为化学纯及以上,所用、溶液均为水溶液。5. 2 抽样按照GB/T 1605的规定进行样品的采集,用随机数表法确定抽样的包装件,最终抽样量不少于200 g。抽样时,从不同部位随机抽取至少3个样点的抱子粉,混合均匀。采样时,应特别注意样品的代表性和避免污染,采集容器和采样工具应经
7、过消毒灭菌。样品采集后,应立即检验,若不能立即检验,可储存在40C冰箱中。5. 3 菌种鉴别形态学特征观察:以划线或稀释涂布法将样品在萨氏培养基1/4SDAY上纯化培养,观察菌落形态颜色或色素等特征。用显微镜观察菌丝体、产抱梗和分生抱子并测量大小,对比近源绿僵菌的形态学特征描述进行鉴定。有效成分的特征描述参见附录A。菌种鉴别采用形态学特征观察和分子鉴定相结合的方式进行。常规检测主要根据代表菌株的形态学特征进行菌种鉴别。分子鉴定可采用核糖体rRNA基因序列或其他目标基因序列分析。菌种鉴别原则与方法见附录B。5. 4 含抱量测定5.4.1 方法提要显微镜血球计数板计数法。将抱子样品加人吐温80榕液
8、中,用高速匀浆器搅拌制成抱子悬浮液,2 NY/T 3282. 1-2018 并稀释至适当倍数K后,在光学显微镜下用血球计数板直接计数抱子数,然后计算单位质量试样中的真菌含抱量。5. 4. 2 试剂和溶液吐温80。0.1%吐温80榕液:(吐温80:水)= 1 : 10000 5. 4. 3 仪器及设备电子天平:精度为0.001g。光学显微镜:目镜物镜=4OO倍。高速匀浆器:转速二注三孔10OOr旷/m丑lln超净工作台。恒温培养箱。亮线血球计数板:25X 16规格。微量移液器:0.2 mL1. 0 mL。手动计数器:19999o容量瓶:100mL。三角瓶:250mL。5. 4. 4 试验步骤5.
9、4.4.1 将试样混均匀后,称取约1.0 g(精确至0.001g)试样2份作为2个重复。5. 4. 4. 2 将每份试样置于洁净三角瓶中,先用5mL吐温80溶液润捏,再加入吐温80溶液60mL制成抱子悬浮液并在高速匀浆器上搅拌5minO 000 r/ min) ,转移至100mL容量瓶中定容、摇匀,配制成A悬浮液(稀释100倍)。5. 4. 4. 3 用移液器准确吸取1.0 mL A悬浮液至100mL容量瓶中,用吐温80榕液稀释至100mLC再稀释1001酌,并在高速匀浆器上混合均匀后备用。5. 4. 4. 4 在血球计数板上盖好盖玻片后,用微量移液器吸取5.4.4.3的抱子悬浮液,在盖玻片边
10、缘滴人,使液体沿边缘渗人盖玻片下,使其刚好充满盖玻片与计数板技术区域之间。应无气泡且计数区域四周无液体,如有多余液体可用吸水纸吸去。5. 4. 4. 5 用显微镜观察,待于包子静止后进行计数。在规划格区内,采取对角线5点取样的计数方法计数。上下区域各5个中方格06个小方格/中方格),即双线范围内160小方格(计数时,对于中方格四周如有压线的抱子,计上双线不计下双线,计左双线不计右双线)的金龟子绿僵菌抱子数。5. 4. 4. 6 每份试样点样计数次(=2)。5. 4. 5 测定结果试样的含抱量W按式0)计算。K X 400 X N5N1 ; ., . I . . I ., Sl:一一0)160p
11、m X O . 1 X 10-3 X lO8 4m 式中:W1 一一试样的含抱量,单位为亿抱子每克(亿抱子/g); K一一稀释倍数00000倍); N 一-p次计数的总抱子数(上下区域各5个中方格中计数的总抱子数); 400一一血球计数板计数室小方格总数为25X16=400;160一一血球计数板上下区域各5个中方格的小方格的总数(5X 16 X 2= 160); 0.1一一血球计数板计数室体积,单位为立方厘米(mm3); lO-3一一立方毫米换算为立方厘米(mL)的倍数;3 NY/T 3282. 1-2018 p 一一计数次数(2次); n2, 一-试样质量,单位为克(g); 108 一一代表
12、108个抱子每克,即亿抱子每克。5. 4. 6 允许差2次平行测定结果相对差应不大于10%,取其算术平均值作为测定结果。5. 5 活抱率测定5.5. 1 玻璃纸片萌芽抱子显微计数法5.5. 1. 1 方法提要将抱子悬浮液均匀涂在放有检。以抱子萌芽长度大于于包子率,即活抱率。5.5. 1.2 试剂和溶液萨氏培养基0/离子水中。用精5.5. 1. 3 仪器电子天平光学旋涡振5.5. 1.4. 1 养皿中(每皿约(高温灭菌)。5.5. 1.4.2 ?昆合均匀;b) 再用接种环蘸取、恒温培养24h; c) 用尖慑子分别取下3片后盖上盖玻片(尽量避免气在(25士l)OC下培养24h,制片镜子总数,计算抱
13、子萌芽百分g溶人1000mL去为9cm的培的玻璃纸片下操作:,在涡旋振荡器中d) 在光学显微镜下观察并计数萌芽的子包子数与未萌芽的抱子数,计算其抱子萌芽百分率。每次计数至少300个抱子。3次测定结果的平均值作为1份试样的测定结果。5.5. 1.5 测定结果试样的活抱率Wz按式(2)计算。Wz=是X100 . (2) 式中:Wz一一试样的活抱率,单位为百分率(%); 4 Nj一一萌芽抱子数,单位为个;Nz一一检查抱子总数,单位为个。5.5. 1. 6 允许差NY/T 3282. 1-2018 2次平行测定结果之差应不大于10%,取算术平均值作为测定结果。通过肉眼观察菌落的数量来推算单位微生物农药
14、样品中的活抱子含量。5. 5. 2 稀释平板菌落计数法金龟子绿僵菌母药活抱率测定见附录C。5. 6 杂菌率测定按照本部分5.4显微镜血球计数板计数法进行测定,检测样品中的金龟子绿僵菌和其他真菌和细菌的数量,杂菌率W3按式(3)计算。W, = _ N2 +N T . , 0 X 100 (3) Nj + Nz +N3 式中:W3一一杂菌率,单位为百分率c%); Nj一一试样中金龟子绿僵菌的总数,单位为个每克(个/g); Nz一一试样中非目标真菌的数量,单位为个每克(个/g); N3一一试样中细菌杂菌的数量,单位为个每克(个/g); 5. 7 干燥;咸量测定5.7. 1 方法提要按加热诚量法测定,
15、即试样经加热后,计算失去的水分占称取试样质量的百分率。5.7.2 仪器及设备电子天平:精度为0.001g。电热恒温干燥箱:控温误差+20C。称量皿:直径70mmX35 mm。5. 7. 3 试验步骤先将称量皿在005士2)OC电热恒温干燥箱内烘至恒重称重(精确至0.001g)。称取试样约5.0g (精确至O.001 g)置于预先称重的称量皿内,放人005:r2)OC电热恒温干燥箱内干燥,1h后取出,在干燥器中冷却至室温,称重。5. 7. 4 测定结果干燥减量W4按式(4)计算。W4=生二旦1X 100(4) mz一-mj式中:W4一一干燥减量,单位为百分率(%); m j 一一称量皿的质量,单
16、位为克(g);mz 烘前试样与称量皿的质量,单位为克(g);m一一烘后试样与称量皿的质量,单位为克(g)。5. 7. 5 允许误差2次平行测定结果之差应不大于0.5%,取算术平均值作为测定结果。5. 8 细度测定按GB/T16150中干筛法的规定执行。5.9 pH测定5 NY/ T 3282. 1-2018 按GB/T1601的规定执行。5. 10 储存稳定性5.10. 1 方法提要将试样密闭放置于50C低温储存12个月或150C250C常温储存6个月后,按照5.5.1的方法测定活抱率。储存后不低于活抱率初始值的80%。5. 10.2 仪器及设备冰箱:50C。样品柜:室内控温范围150C250
17、C。棕色磨口玻璃瓶:带有磨口瓶塞,确保样品密闭。5.10.3 试验步骤将20g试样放在玻璃瓶中,使其铺成平滑均匀层。密封后,置于50C冰箱中放置12个月或150C250C下放置6个月后,按照5.5.1的方法测定活抱率。6 产品的检验和验收应符合GBjT1604的规定。极限数值处理应按照GBjT8170-2008中4.3. 3的要求进行。7 标志、标签、包装、储运、安全和保质期7. 1 标志、标签应符合GB3796的规定,同时注明储运条件。7. 2 包装应符合GB3796和GBjT191的规定。7. 3 储运储运时,应严防日晒及350C以上高温,置于阴凉干燥处。运输时,注意轻放,防止破损。不得与
18、有毒有害物质混装、混运。7. 4 安全在使用说明书或包装标签上应注明产品为微毒、防护措施等。7.5 保质期在本部分的储存条件下,质量保证期从生产日期算起,12个月内产品活抱率不低于标示值。6 NY/T 3282. 1-2018 A.1 中文通用名称金龟子绿僵菌。A.2 拉丁文学名Metarhizium anisoLiae A.3 生物学分类地位附录A(资料性附录)金龟子绿僵菌有效成分描述菌物界、子囊菌门Ascomycota、盘菌亚门Pezizomycotina、粪壳菌纲Sordariomycetes、肉座菌亚纲Hypocreomycetid挝、肉座菌目Hypocreales、麦角菌科Clavi
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- NYT 3282.1-2018 真菌微生物农药 金龟子绿僵菌 第1部分:金龟子绿僵菌母药农业 NY 3282.1 2018 真菌 微生物 农药 金龟子 绿僵菌 部分 绿僵菌母药 农业
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【曲****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【曲****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。
链接地址:https://www.zixin.com.cn/doc/88716.html