SN∕T 1135.3-2016 马铃薯帚顶病毒检疫鉴定方法(出入境检验检疫).pdf
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1、书 书 书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 代替 马铃薯帚顶病毒检疫鉴定方法犇犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犻 犱 犲 狀 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犘狅 狋 犪 狋 狅犿狅 狆 狋 狅 狆狏 犻 狉 狌 狊 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书 书 书前言 系列标准共分为 部分: 第部分:马铃薯癌肿病检疫鉴定方法; 第部分:马铃薯黄化矮缩病毒检疫鉴定方法; 第部分:马铃薯帚顶病毒检疫鉴定方法; 第部分:马铃薯黑粉病菌检疫鉴定方法; 第部分:马铃薯环腐病菌检疫鉴定方法; 第部分:马铃薯绯腐病菌检疫鉴定方法; 第部分:马铃薯病毒检疫鉴定方
2、法; 第部分:马铃薯坏疽病菌检疫鉴定方法; 第部分:马铃薯青枯病菌检疫鉴定方法; 第 部分:马铃薯病毒检疫鉴定方法; 第 部分:马铃薯皮斑病菌检疫鉴定方法; 第 部分:马铃薯病毒检疫鉴定方法; 第 部分:马铃薯病毒检疫鉴定方法。本部分为 的第部分。本部分按照 给出的规则起草。本部分代替 马铃薯帚顶病毒检疫鉴定方法 。本部分与 相比,主要技术性差异如下: 删除了“引言” ; 删除了“术语和定义”一章; 增加了“马铃薯帚顶病毒基本信息”一章; 删除了“现场检疫与抽样”一章; 增加了“检测方法”一节; 修改了 检测方法。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布结构不承担识别这些专利的责任。本
3、部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位:中国检验检疫科学研究院。本部分主要起草人:李明福、张永江、丁小兰、相宁、李桂芬、魏梅生、陈枝楠、黄文胜、张成良。本标准所代替标准的历次版本发布情况为: 。犛犖犜 马铃薯帚顶病毒检疫鉴定方法范围本部分规定了马铃薯帚顶病毒检疫鉴定的基本原则和方法。本部分适用于所有进境种薯、商品用薯、组培苗和脱毒苗等马铃薯种质中马铃薯帚顶病毒的检疫鉴定以及马铃薯帚顶病毒引起病害的田间调查。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
4、 植物病毒免疫电镜检测方法 进出境植物及植物产品检疫抽样马铃薯帚顶病毒基本信息中文名:马铃薯帚顶病毒学名:犘狅 狋 犪 狋 狅犿狅 狆 狋 狅 狆狏 犻 狉 狌 狊缩写:分类地位:帚状病毒科( )马铃薯帚顶病毒属(犘狅犿狅 狏 犻 狉 狌 狊) 。马铃薯帚顶病毒的其他信息参见附录。方法原理马铃薯帚顶病毒的血清学特性、分子生物学特性和生物学特性是检疫鉴定的主要依据。仪器设备、用具及试剂 仪器设备电子分析天平( ) 、小型离心机、台式冷冻离心机、恒温水浴锅、酶标仪、普通仪、电泳系统、计、凝胶成像系统、冰箱、超净工作台、 超低温冰箱、高压灭菌锅、制冰机、涡旋振荡器、微波炉、电子透射显微镜等。 用具可
5、调移液器( 、 、 、 、 、 、 )及相应的无 吸头、无 离心管、管、研钵、样品袋、标签等。 试剂有特殊说明除外,所有实验用试剂均为分析纯。犛犖犜 三抗体酶联免疫吸附测定试剂(见附录) 、 检测试剂(见附录) 。样品制备抽样按照 的规定进行。将马铃薯块茎种植在隔离温室中,于 生长并进行症状观察。待长出片片叶后将表现症状的植株编号,未表现症状的植株分组( 株为组)并编号。采集的叶片进行三抗体酶联免疫吸附测定、 、免疫电镜检测或生物学测定。检测方法 三抗体酶联免疫吸附测定见附录,其他有效的酶联免疫吸附测定检测方法可参照试剂说明书操作。 犚犜 犘犆犚检测见附录。 免疫电镜检测按照 中的方法进行电镜
6、观察,参照附录病毒粒体形态判定免疫电镜检测结果。 生物学测定见附录。结果判定 、 、 和 中的两种检测结果为阳性,即可判定检出马铃薯帚顶病毒。样品保存与记录结果 样品保存经检验确定携带马铃薯帚顶病毒的样品应在合适的条件下保存,马铃薯病薯块及叶片样品在 或 冰箱中保存,试管苗保存于组培室中,做好标记和登记工作。保存期满后,需经灭活处理。 结果记录与资料保存完整的实验记录要包括:样品的来源、种类、时间,实验的时间、地点、方法和结果等,并要有经手人和实验人员的签字。三抗体酶联免疫吸附测定检测应有酶联板反应的原始数据, 检测应有电泳图片,免疫电镜检测应有病毒粒体照片,生物学测定应有鉴别寄主的症状照片。
7、犛犖犜 附录犃(资料性附录)马铃薯帚顶病毒背景资料犃 寄主范围马铃薯(犛 狅 犾 犪 狀 狌犿狋 狌 犫 犲 狉 狅 狊 狌犿)是它唯一重要的自然寄主。在人工接种的情况下还可侵染茄科、藜科的 种植物。犃 分布亚洲:日本、中国台湾、以色列。欧洲:爱尔兰、英国(苏格兰) 、荷兰、芬兰、前捷克斯洛伐克、瑞典、丹麦和挪威。南美洲:玻利维亚、秘鲁、智利。犃 病害症状症状随季节的变化而不同,在马铃薯植株上一般表现为矮化(帚顶) ,叶片有褪绿和坏死的型斑纹,薯块开裂,在较凉的环境下( )薯块上有贝壳状的坏死层。图犃 感染犘犕犜犞马铃薯植株犃 传播途径主要靠土壤中的马铃薯粉痂菌犛狆 狅 狀犵 狅 狊 狆 狅
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