cTfh细胞对乙型肝炎疫苗长期免疫的调控作用.pdf
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1、58http:/ E-mail:May 2023,Vol.26 No.S1论著cTfh 细胞对乙型肝炎疫苗长期免疫的调控作用洪茜,唐豪*,倪进东,周桑玉,熊泳珍,余水岸,尹明娟,黎峻余【摘要】目的分析主要辅助 B 细胞的是滤泡辅助性 T(TfhB)细胞对乙型肝炎疫苗长期免疫的调控作用,以提升疫苗免疫应答,遏制乙型肝炎传播。方法经医院伦理学会批准,选择东莞市莞城医院 2017 年至 2019 年诊治的乙型肝炎疫苗接种者 100 例。采用随机数字分组法将其分成对照组和观察组,均 50 例。对照组患者接受常规乙型肝炎疫苗注射方案。观察组患者使用 20g 重组乙型肝炎疫苗(含 cTfh 细胞)。比较两
2、组接种者免疫应答情况、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)浓度、外周血 cTfh 细胞和 B 细胞、浆细胞和记忆性 B 细胞含量。结果观察组患者中或强免疫应答率高于对照组(P0.05),弱或无应答率低于对照组(P0.05)。观察组在接种后 14、28dHBsAb 浓度高于对照组(P0.05)。观察组接种者在接种 14、28d 的 cTfh 细胞含量高于对照组(P0.05),B 细胞含量低于对照组(P0.05)。观察组接种者在接种14、28d的浆细胞含量多于对照组(P0.05),记忆性B细胞含量低于对照组(P0.05)。结论cTfh 细胞能提升乙型肝炎疫苗长期免疫的调控作用,促使机体免疫应答,增加 H
3、BsAb 浓度,建议使用。【关键词】免疫接种规划;HBsAb 浓度;cTfh 细胞;乙型肝炎疫苗;免疫;调控;作用【中图分类号】R19【文献标识码】AModulation of Long-term Immunity to Hepatitis B Vaccine by cTfh CellsHONG Qian,TANG Hao*,NI Jindong,ZHOU Sangyu,XIONG Yongzhen,YU Shuian,YIN Mingjuan,LI JunyuDongguan Guancheng Hospital,Dongguan 523000,China*Corresponding aut
4、hor:TANG Hao【Abstract】ObjectiveToinvestigatethemodulationoflong-termimmunitytohepatitisBvaccinebycirculatingT-follicularhelper(cTfh)cells.MethodsOnehundredcasesofhepatitisBvaccinatedpatientsinDongguanGuanchengHospitalfrom2017to2019wereselectedwiththeapprovalofthehospitalethicscommittee,andwereclassi
5、fiedintotwogroupsbyrandomnumbertablemethod,bothwith50cases.ControlgroupreceivedaconventionalhepatitisBvaccination,whileobservationgroupweregiven20ugofrecombinanthepatitisBvaccinecontainingcTfhcells.Thentheimmuneresponse,hepatitisBsurfaceantibody(HBsAb)concentration,peripheralbloodcTfhcellsandBcells,
6、plasmacellsandmemoryBcellswerecomparedbetweenthetwogroups.ResultsPatientsinobservationgrouphadahigherrateofmoderateorstrongimmuneresponsethancontrolgroup(P0.05)andalowerrateofweakornon-responsethancontrolgroup(P0.05).HBsAbconcentrationsinobservationgroupwerehigherthanthoseincontrolgroupatthe14dand28
7、dofvaccination(P0.05).ThecTfhcellatthe14dand28dofvaccinationwashigherinobservationgroupthanincontrolgroup(P0.05),andBcellcontentwaslowerthanthatincontrolgroup(P0.05).Atthe14dand28dofvaccination,observationgrouphadsignificantlyhigherlevelsofplasmacellandlowerBcellcontent(P0.05),具有可比性。本研究通过本院伦理委员会审批。1
8、.2诊断、纳入及排除标准1.2.1诊断标准无或弱免疫应答标准,抗-HBsS/C 值 10mU/m 中或强免疫应答标准,抗-HBsS/C 值 10mU/m。1.2.2纳入标准(1)能追溯到5年内疫苗接种的受试者;(2)知情同意的受试者;(3)接种者均无乙肝病毒感染病史;(4)常规指标检查正常;(5)HBV-DNA 阴性受试者。1.2.3排除标准(1)伴有严重性基础疾病患者;(2)乙肝疫苗注射禁忌证患者;(3)先天性免疫疾病患者;(4)精神疾病患者;(5)妊娠期、哺乳期患者。1.3方法对照组患者接受常规乙肝疫苗注射方案,按照 0、1、6 个月方案肌肉注射接种基因重组乙肝疫苗,10g/针。观察组患者
9、使用 20g 重组乙型肝炎疫苗(含 cTfh 细胞)按照 0、1、6 个月方案肌肉注射接种基因重组乙肝疫苗,10g/针。1.4评价指标1.4.1免疫应答情况在注射结束后 2 个月评定两组接种者的免疫应答情况。1.4.2乙型肝炎表面抗体(HBsAb)浓度在接种前和接种结束后 14d 和 28d 抽取两组接种者空腹外周肘静脉血 5mL,离心处理后留下血清,使用 ELISA 法检测 HBsAb 浓度。1.4.3外周血 cTfh 细胞和 B 细胞在在接种前和接种结束后第 14d 和第 28d 抽取两组接种者空腹外周肘静脉血,离心处理后留下血清,使用流失细胞仪检测 cTfh 细胞和 B 细胞含量。1.4
10、.4浆细胞和记忆性 B 细胞在在接种前和接种结束后 14d和 28d 抽取两组接种者空腹外周肘静脉血,离心处理后留下血清,使用流失细胞仪检测浆细胞和记忆性 B 细胞含量。1.5统计学方法本文所有数据使用SPSS21.00处理。年龄、外周血 cTfh 细胞和 B 细胞、浆细胞和记忆性 B 细胞等计量资料以(s)形式表示,组间比较采用独立样本t检验;而性别、免疫应答情况等计数资料使用相对数表示,组间比较采用 2检验。以 P0.05 表示差异有统计学意义。2结果2.1两组接种者免疫应答情况比较观察组患者中或强免疫应答率高于对照组,弱或无应答率低于对照组,差异均有统计学意义(2=14.620,P0.0
11、5)。观察组在接种后 14、28dHBsAb 浓度高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。见表 2。表 2两组接种者乙型肝炎表面抗体浓度(s,U/mL)组别例数接种前接种 14d接种 28d对照组5057.262.06201.5811.58458.6928.65观察组5057.212.04263.4111.51654.2928.51t 值0.12226.77730.215P 值0.9020.0010.05)。观察组接种者在接种 14、28d 的cTfh 细胞含量高于对照组,B 细胞含量低于对照组(P0.05),差异均有统计学意义(P0.05)。观察组接种者在接种 14、28d 的浆细胞含量
12、多于对照组,记忆性 B 细胞含量低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。见表 4。3讨论HBV 感染是一个全球性严重公共卫生问题。据世界卫生组织估计,全球有 24 亿乙肝慢性感染者,每年因急性、慢性HBV 感染引起死亡人数达 78 万人。疫苗接种前我国是 HBV高流行地区6-8。通过乙肝疫苗接种目前降至 HBV 中度流行地区,但人群乙肝表面抗原(HBsAg)携带率仍高达 7.18%9。乙肝疫苗免疫效果主要依赖于激发机体产生足够水平的抗体、并保持有效的免疫记忆。关于乙肝疫苗长期免疫保护时限及是否需要加强免疫问题,一直存在分歧与争议10-12。体液免疫应答中,主要 TfhB,突破了传统的对
13、Th 细胞的认识,为深入探讨乙肝疫苗长期免疫调控机制提供了崭新的研究思路。基于此,本项目将通过对乙肝疫苗接种人群随访,研究表 3两组接种者外周血 cTfh 细胞和 B 细胞含量比较(s,%)组别例数cTfh 细胞B 细胞接种前接种 14d接种 28d接种前接种 14d接种 28d对照组506.021.126.250.366.471.189.741.369.540.449.250.55观察组506.031.167.260.317.981.119.731.338.680.478.760.58t 值0.03615.03216.3020.02514.02313.518P 值0.9010.0010.00
14、10.9540.0010.00160http:/ E-mail:May 2023,Vol.26 No.S1表 4两组接种者浆细胞和记忆性 B 细胞含量比较(s,%)组别例数浆细胞记忆性 B 细胞接种前接种 14d接种 28d接种前接种 14d接种 28d对照组5020.362.5821.740.3624.691.0619.872.2518.641.0217.680.33观察组5020.312.5123.580.3127.061.0319.822.2417.061.0616.470.36t 值0.71527.00620.4870.8148.31221.036P 值0.4130.0010.0010
15、.3320.0010.001Tfh 细胞与乙肝疫苗激发抗体衰减、记忆反应缺失之间关联及其作用机制,从一个全新视角阐述乙肝疫苗长期免疫的调控机制13。同时,项目研究中将鉴定乙肝疫苗长期免疫中辅助 B 细胞的效应 Tfh 细胞亚群和关键调控基因14-15,可为进一步乙肝疫苗佐剂研发提供参考靶标。既往研究结果表明,乙肝疫苗激发机体的免疫保护效果依赖于有效的免疫应答产生足量的抗体,以及形成记忆淋巴细胞克隆,当机体再次暴露于 HBV 时能迅速凭借免疫记忆,引起再次免疫应答,阻断感染发生。Tfh 细胞是主要辅助 B 细胞反应的 T 细胞亚群16。KUROSE 等17曾认为 cTfh 细胞只能是一种近期激活
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