缺血性脑卒中患者血清LncRNA SNHG8的表达及临床意义.pdf
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1、目的探讨长链非编码 RNA 小核仁 RNA 宿主基因 8(long non-coding RNA small nucleolar RNA host gene 8,LncRNA SNHG8)在缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)患者血清中的表达水平及临床意义。方法选择2019年5月2021年 12 月在河北北方学院附属第一医院神经内科住院的 IS 患者 115 例作为研究对象(IS 组),根据入院时国立卫生研究院卒中量表评分(national institute of health stroke scale,NIHSS)对患者进行神经功能损伤评分,将患者分为轻度组(NIHSS评分
2、 4 分,n=39)、中度组(4 分 NIHSS 评分 20 分,n=35)和重度组(NIHSS 评分 20 分,n=41),另选取同期在该院体检人员 120 例作为对照组。采用实时荧光定量 PCR(real time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)法检测血清 LncRNA SNHG8 表达水平;Spearman 相关性分析 IS 患者血清 LncRNA SNHG8 与 NIHSS 评分的相关性;受试者工作特征(receiver operating characteristic curve,ROC)曲线分析血清 LncRNA SNHG8 表达水平对
3、IS 的诊断价值。结果IS 组血清总胆固醇(total cholesterol,TC)(5.261.21 mmol/L)和低密度脂蛋白-胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)(2.230.53 mmol/L)水平高于对照组(4.351.43 mmol/L,1.510.65 mmol/L),差异具有统计学意义(t=5.255,9.284,均 P 0.001);血清高密度脂蛋白-胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)(1.390.41 mmol/L)及LncRNA SNHG8(0.780.
4、11)表达水平低于对照组(1.720.36 mmol/L,1.050.15),差异具有统计学意义(t=6.564,15.680,均 P 0.001);轻、中、重度组患者血清 LncRNA SNHG8 表达水平分别为0.850.10,0.770.09 和 0.710.08,三组间比较差异有统计学意义(F=24.173,P0.001);IS 患者血清 LncRNA SNHG8 与 NIHSS 评分呈负相关性(r=-0.501,P0.001);血清 LncRNA SNHG8 表达水平评估 IS 患者的 ROC 曲线下面积为 0.873(95%CI:0.823 0.913),最佳截断值 0.89,敏感
5、度和特异度分别为 85.22%,73.33%;IS 患者在入院24 h 内、治疗 1 周后、治疗 2 周后血清 LncRNA SNHG8 表达水平为 0.780.11,0.850.09 和 0.930.08,表达水平依次升高,差异有统计学意义(F=73.064,P0.001)。结论LncRNA SNHG8 在 IS 患者血清中表达水平降低,与患者病情严重程度有关,可能成为 IS 诊断与病情评估的标志物。关键词:长链非编码核糖核酸;小核仁核糖核酸宿主基因 8;缺血性脑卒中中图分类号:R743.3;R392.11文献标识码:A文章编号:1671-7414(2023)05-075-05doi:10.
6、3969/j.issn.1671-7414.2023.05.014Expression and Clinical Significance of Serum LncRNA SNHG8 in Patients with Ischemic StrokeGAO Jiyinga,SHI Daileb,WANG Gangc(a.Hyperbaric Oxygen Chamber Room of Neurosurgery Department;b.Department of Neurosurgery;c.Department of Neurology,the First Affiliated Hospit
7、al of Hebei North University,Hebei Zhangjiakou 075000,China)Abstract:ObjectiveTo investigate the expression level and clinical significance of long non-coding RNA small nucleolar RNA host gene 8(LncRNA SNHG8)in the serum of patients with ischemic stroke(IS).MethodsA total of 115 IS patients hospital
8、ized in the Department of Neurology,the First Affiliated Hospital of Hebei North University from May 2019 to December 2021 were selected as the study subjects(IS group),according to the national institute of health stroke scale(NIHSS)score at admission,the patients neurological impairment was scored
9、,the patients were divided into mild group(NIHSS score 4 points,n=39),moderate group(4 points20 points,n=41),another 120 cases of physical examination personnel in the hospital were taken as the control group.The expression level of serum LncRNA SNHG8 was detected by real time fluorescent quantitati
10、ve PCR(qRT-PCR),the correlation between serum LncRNA SNHG8 and NIHSS scores in patients with IS was analyzed by spearman correlation,and the diagnostic value of serum LncRNA SNHG8 expression level in IS was analyzed by receiver operating characteristic curve(ROC curve).ResultsThe levels of 基金项目:2022
11、 年度河北省医学科学研究课题计划(20220029):长链非编码 RNA 与急性缺血性卒中疾病风险、严重性、炎症和预后的相关性。作者简介:高继英(1982-)女,本科,主治医师,研究方向:高压氧专业,E-mail:。76现代检验医学杂志第 38 卷第 5 期2023 年 9 月J Mod Lab Med,Vol.38,No.5,Spet.2023serum total cholesterol(TC)(5.261.21 mmol/L)and low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C)(2.230.53 mmol/L)in IS group were hi
12、gher than those in control group(4.351.43 mmol/L,1.510.65 mmol/L),and the difference was statistically significant(t=5.255,9.284,all P0.001),the expression levels of serum high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C)(1.390.41 mmol/L)and LncRNA SNHG8(0.780.11)were lower than those of control group(1.7
13、20.36 mmol/L,1.050.15),and the differences were statistically significant(t=6.564,15.680,all P0.001).The expression levels of serum LncRNA SNHG8 in the mild,moderate and severe groups were 0.850.10,0.770.09 and 0.710.08,respectively,and there were significant differences among the three groups(F=24.
14、173,P0.001).Correlation analysis showed that serum LncRNA SNHG8 in IS patients was negatively correlated with NIHSS score(r=-0.501,P0.001).The results of ROC analysis showed that the area under the ROC curve of serum LncRNA SNHG8 expression level in IS patients was 0.873(95%CI:0.823 0.913),the best
15、cut-off value was 0.89,the sensitivity and the specificity were 85.22%,73.33%,respectively.The expression levels of serum LncRNA SNHG8 in patients with IS within 24h after admission,1 week after treatment,and 2 weeks after treatment were 0.780.11,0.850.09 and 0.930.08,and the expression level increa
16、sed sequentially,and the difference was statistically significant Significance(F=73.064,P0.001).ConclusionThe expression level of LncRNA SNHG8 IS decreased in IS patients,which was related to the severity of the disease.LncRNA SNHG8 may become a marker for diagnosis and disease evaluation of IS.Keyw
17、ords:long non-coding RNA;small nucleolar RNA host gene 8;ischemic stroke缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)约占脑卒中病例总数的 70%,具有极高的发病率及致残率,严重威胁人类生命健康,早期诊断并评估 IS病情,给予及时有效干预,具有重要意义1-2。长链非编码 RNA(long non-coding RNA,LncRNA)可参与调节脑缺血损伤、神经发育和神经可塑性等多种病理生理过程3。LncRNA 小核仁 RNA 宿主基 因 8(long non-coding RNA small nucleolar RNA
18、 host gene 8,LncRNA SNHG8)为 LncRNA 之一,可通过调控靶基因表达参与细胞增殖、分化、上皮间质转化、血管生成等多种生物学过程4。研究显示,LncRNA SNHG8 在大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠脑组织和氧-葡萄糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)的原代小胶质细胞中低表达,上调 LncRNA SNHG8表达可通过调控 miRNA-425-5p/沉默信息调节因子(silent information regulator,SIRT)1/核因子-B轴抑制脑缺血性诱导小胶质
19、细胞炎症和保护血脑屏障损伤5。以上研究表明,LncRNA SNHG8 在脑损伤中发挥保护作用,但 LncRNA SNHG8 在 IS 中的临床价值尚不清楚。因此,本研究拟探讨 IS 患者血清 LncRNA SNHG8 表达情况及其诊断价值,为IS 的诊疗提供理论参考。1材料与方法1.1研究对象选择 2019 年 5 月 2021 年 12 月在河北北方学院附属第一医院神经内科住院的 IS患者 115 例作为研究对象(IS 组),其中男性 70例,女性 45 例,年龄 4678(61.2010.50)岁;吸烟 35 例,饮酒 41 例,高血压 58 例,糖尿病 27例,冠心病 12 例。另选取同
20、期在本院体检人员 120例作为对照组,同时排除既往有脑卒中史、头部外伤史等系统疾病者,其中男性 64 例,女性 56 例,年龄 4680(60.7011.80)岁;吸烟 28 例,饮酒33 例,高血压 46 例,糖尿病 23 例,冠心病 15 例。两组性别、年龄及吸烟、饮酒、高血压、糖尿病、冠心病比例比较,差异均无统计学意义(2=1.361,t=0.343,2=1.509,1.809,3.486,0.652,0.246,均 P 0.05)。所有研究对象或其直系亲属签署知情同意书,且经河北北方学院附属第一医院伦理委员会审核、批准后实施。IS 组纳入标准:符合中国缺血性脑卒中诊治指南(2018)中
21、诊断标准7;首次发病且在发病 24h 内入院就诊;经头颅 CT 或 3.0 MRI 检查确诊且排除其他脑部病变。排除标准:短暂性脑缺血发作、出血性脑梗死、脑外伤、高血压脑病及脑膜炎者;并发肝肾功能障碍者;有恶性肿瘤者;临床资料不全者。根据入院时国立卫生研究院卒中量表评分(national institute of health stroke scale,NIHSS)6对 IS 组患者进行神经功能损伤评分,将患者分为轻度组(NIHSS 评分 4 分,n=39)、中 度 组(4 分 NIHSS 评 分 20 分,n=35)和重度组(NIHSS 评分 20 分,n=41)。1.2仪器与试剂ABI 7
22、300 PCR 仪(美国 Applied Biosystem 公司),总 RNA 提取试剂(Trizol)(美 国 Invitrogen 公司,货号 15596018),反转录试剂 盒(Reverse Transcriptase M-MLV)(货号 H2640A,日本 Takara)及 TaqMan 探针法荧光定量 PCR 试剂 盒(2Probe qPCR Mix)(货号HS0616,日本Takara),LncRNA SNHG8 及内参 GAPDH 的引物(上海生物工程有限公司)。1.3方法1.3.1样品采集及保存:采集IS组患者入院24h内、治疗 1 周、治疗 2 周后及对照组人员体检当天肘
23、静脉血 5 ml,常温 3 000g 离心 10 min 后收集血清,77现代检验医学杂志第 38 卷第 5 期2023 年 9 月J Mod Lab Med,Vol.38,No.5,Sept.2023置于-80保存待检。1.3.2实时荧光定量PCR(real time fluorescent quanti-tative PCR,qRT-PCR)法检测血清 LncRNA SNHG8 表达水平:采用 Trizol 试剂提取血清中总 RNA,取 1g RNA 使用反转录试剂盒合成 cDNA。反应条件:95 10 min;然后 95 10 s,60 60 s,共 40 个循环。LncRNA SNHG
24、8 上游引物:5-CCC GAGAACCGTCAGTTTGA-3,下游引物:5-ACAC CCGTTTCCCCAACTAC-3;GAPDH 上 游 引 物:5-AATCCCATCACCATCTTC-3,下游引物:5-AG GCTGTTGTCATACTTC-3。反应结束后,以GAPDH 为内参,采用 2-Ct法计算 LncRNA SNHG8 的相对表达量。1.3.3临床资料收集:收集入选人员性别、年龄、疾病史、血脂指标,血脂指标包括总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein
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