高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定固态食品中6种稀有糖.pdf
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1、 年 月 研究论文:收稿日期:通讯联系人:(),:(邢家溧);:(娄永江)基金项目:国家自然科学基金项目();浙江省自然科学基金项目();宁波市泛 创新团队();宁波市高新精英创新团队(甬高科 号);宁波市重大科技攻关项目();宁波市甬江引才工程():();();();();();()高效液相色谱蒸发光散射检测法同时测定固态食品中 种稀有糖刘 宇,邢家溧,沈 坚,毕晓丽,毛玲燕,徐晓蓉,张书芬,娄永江,吴 希,穆应花(宁波大学食品与药学学院,浙江 宁波;宁波市产品食品质量检验研究院(宁波市纤维检验所),浙江 宁波)摘要:稀有糖在固态食品中的应用量与日俱增,引发了掺假、过量添加等食品安全问题,因
2、此建立固态食品中稀有糖(阿洛酮糖、塔格糖、海藻糖、异麦芽酮糖、赤藓糖醇和甘露糖醇)的检测方法十分重要。本文基于高效液相色谱蒸发光散射检测器,建立了一种同时检测固态食品中 种稀有糖的分析方法。选用 色谱柱(,)进行分离,流动相为乙腈水(,),流速梯度洗脱。蒸发光散射检测系统的漂移管温度设置为 ,雾化器载气为高纯氮,载气流速为 ,压力为 ,增益值为。样品经 水提取,振荡涡旋 ,分别加入 的乙酸锌溶液和 的亚铁氰化钾溶液净化,离心,取上清液,过 水相滤膜,待上机分析。种稀有糖在各自范围内线性关系良好,决定系数()均 ,方法的检出限为 。以空白固态食品样品为基质,在 种加标水平下,种稀有糖的回收率为
3、,相对标准偏差为 。将该方法用于分析实际固态食品样品中 种稀有糖的含量,结果显示,实际成分和食品标签所示基本一致。本研究建立的方法前处理操作简单,重复性好,方法快速、灵敏、准确,可应用于日常监测固态食品中 种稀有糖的含量,同时为稀有糖的检测提供了一种具有广阔前景的技术手段。关键词:高效液相色谱;蒸发光散射检测器;稀有糖;固态食品中图分类号:文献标识码:,(,;(),):,色谱第 卷,(,),(,)(,;,;,)(,):,(),(),;,引用本文:刘宇,邢家溧,沈坚,毕晓丽,毛玲燕,徐晓蓉,张书芬,娄永江,吴希,穆应花 高效液相色谱蒸发光散射检测法同时测定固态食品中 种稀有糖 色谱,():,()
4、:();();第 期刘 宇,等:高效液相色谱蒸发光散射检测法同时测定固态食品中 种稀有糖 糖()主要由、种元素组成,是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称,被广泛应用于食品甜味剂来提升甜度和风味。目前,市场上常见的甜味剂为蔗糖、葡萄糖和人工甜味剂等。然而过量摄入甜味剂会引发多种健康问题,例如 型糖尿病、肥胖症和心血管疾病,。而且人工甜味剂的安全性目前存在一定争议。因此,为了减少糖和人工甜味剂的消耗,稀有糖得到越来越多的关注。稀有糖被定义为自然界中少量存在的单糖及其衍生物。大 量 研 究 报 道 了 稀 有 糖 的 有 益 功能,例如不引起龋齿、减轻体重、控制血糖等。近年来,赤藓糖醇和
5、甘露糖醇在全球范围内代糖销售市场火热,阿洛酮糖和塔格糖作为新型糖类成为最有前途的蔗糖替代品,异麦芽酮糖和海藻糖是广泛研究的稀有二糖,国外相关机构已将这 种稀有糖视为功能性甜味剂,允许加入食品中。然而,以下原因造成了稀有糖的食品安全问题:()食品添加剂联合专家委员会()、美国食品药品监督管理局()、欧盟()和澳新食品标准局()都未指定这 种稀有糖每日可接受摄入量(,),。()需要大量添加或复合添加稀有糖才能达到一定的甜度,这可能会引发过量食用稀有糖导致胃肠道反应(如腹泻、饱胀)并扰乱血糖水平。部分食品厂商用廉价或无营养价值的非糖类物质(玉米淀粉、麦芽糊精等)或含有杂质的低质量工业糖来掺假添加,夸
6、大宣传其功效来误导消费者购买。()这 种稀有糖同时检测的方法尚未成熟。因此,为了安全合理地使用稀有糖,亟须开发一种高效、灵敏,且可以同时检测分析食品中 种稀有糖的检测方法。常见的糖类分析检测方法有气相色谱法()、气相色谱质谱法()、毛细管电泳法()、高效阴离子交换色谱脉冲安培检测法()和高效液相色谱()联用不同检测器的方法,如质谱()、紫外检测器()、示差折光检测器()、蒸发光散射检测器()。和 需要衍生化,步骤复杂、耗时。可以快速分析塔格糖,然而没有关于其他稀有糖的检测报道。使用氢氧化物水溶液作为流动相会引起稳定性问题。此外,基于 分离系统,仪器昂贵,前处理涉及复杂的衍生化过程。由于糖类无发
7、色团,分析受到限制。相比之下,和 已被广泛应用于分析食品中的糖,无需衍生化即可进行快速分析,。然而,检测器不兼容梯度洗脱,灵敏度易受温度影响。不存在上述这些情况,要求流动相必须有良好的挥发性。目前,尚无采用 对 种稀有糖进行同时检测的相关报道。因此,在这项研究中,开发了一种新颖的 方法,经过方法优化可以在 内快速同时准确定性定量分离固态食品中 种稀有糖,也为我国食品中制定稀有糖检测方法标准和限量标准提供技术支持。实验部分 仪器、试剂与材料 高效液相色谱仪和蒸发光散射检测器(美国 公司);电子分析天平(精度为 ,上海梅特勒托利多仪器有限公司);高速离心机(美国 公司);自动漩涡混合器、多功能涡旋
8、混合器(德国 公司);一次性无菌注射器(上海金塔医用器材有限公司);超纯水仪(电阻率为 ,美国 公司);超声波清洗仪(宁波科生超声设备有限公司);移液枪(法国 公司);滤膜(美国 公司)。阿洛酮糖(,纯度)、塔格糖(,纯度)、海藻糖(,纯度)、异麦芽酮糖(,纯度)、赤藓糖醇(,纯度)、甘露糖醇(,纯度),级,均购自上海麦克林生化科技股份有限公司。乙腈(级,纯度)购自上海安谱实验科技股份有限公司;乙酸锌()、亚铁氰化钾()(均为分析纯)购自上海默克化工技术有限公司。实验用固态食品:面包、口香糖、巧克力、饼干、糖果均购自网络,藕粉购自宁波大型超市。溶液配制 标准储备液:分别准确称取各种稀有糖标准品
9、各 (精确至 )于 容量瓶中,用色谱第 卷超纯水定容至刻度,配合超声加速溶解,配制成各质量浓度为 的标准储备液;分别吸取阿洛酮糖、塔格糖、赤藓糖醇 ,甘露糖醇 ,异麦芽酮糖、海藻糖 于 容量瓶中,用超纯水定容至刻度,转移至 棕色进样瓶中,得到含有不同浓度的混合标准储备液,密封后置于 冰箱中保存备用。标准工作液:用超纯水将混合标准储备液逐级稀释配制成质量浓度分别为 、的 种稀有糖的混合标准工作液。乙酸锌溶液():称取乙酸锌 ,加冰醋酸 ,加水溶解并稀释至 。亚铁氰化钾溶液():称取亚铁氰化钾 ,加水溶解并稀释至 。样品前处理 称取 样品至 螺口尖底离心管中,加入 水(样品处理用水为一级水),振荡
10、涡旋,分别加入 的乙酸锌溶液和 的亚铁氰化钾溶液,用水定容至刻度,充分摇匀,离心 ,移取上清液 ,过 水相滤膜,待 分析。分析条件 色谱条件:色谱柱(,美国 公司);柱温为;流动相:乙腈水(,);进样体积;流速梯度洗脱程序:,;,;,;,。条件:漂移管温度为 ,雾化器流速为 (载 气 为 高 纯 氮),载 气 压 力 为 ,增益值为。数据处理 采用 统计软件进行相关性分析和数据处理,采用 和 进行图表绘制。结果与讨论 前处理条件的优化 提取剂类别的优化 不同提取剂会影响稀有糖的提取效果。为了确定提取剂,本实验比较了水、乙腈和不同体积分数(、和)的乙腈水溶液对 种稀有糖提取效果的影响。结果表明,
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