天麻多酚提取工艺研究.pdf
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1、天麻多酚提取工艺研究符凌玮杨肖衣杨晓东李 丹李 玮吴珊珊(贵州中医药大学贵州 贵阳)摘 要:目的:对天麻多酚提取工艺进行优化为建立最佳提取工艺提供实验依据比较不同产地天麻多酚含量差异 方法:以没食子酸为对照品、天麻多酚含量为评价指标采用福林酚比色法测定天麻多酚含量以乙醇浓度()、提取时间()、料液比(/)为三个自变量因素通过单因素试验与 响应面法相结合来优化天麻多酚提取工艺参数确定天麻多酚最佳提取工艺 结果:最佳提取工艺为天麻药材用 乙醇按 /料液比浸泡 超声提取 得到的天麻多酚含量最高 即贵州天麻多酚含量最高为 即贵州天麻多酚含量最低为 且不同产地间天麻多酚含量无明显差异 结论:本实验所建立
2、的天麻多酚提取方法和测定方法简便快速、准确可行不同产地与多酚含量无显著相关性所得实验数据真实可靠可以为天麻多酚研究提供实验依据关键词:天麻多酚提取方法响应面不同产地中图分类号:.文献标识码:文章编号:()():.()()(/).:.().():.():.:.():.辛颖达拉胡红艳等.梅花草抗肿瘤活性部位化学成分研究.中国药学杂志():.李永康.贵州植物志.贵阳:贵州人民出版社:.董洪进胡国雄李世升等.贵州省 个种子植物新纪录.贵州科学():.谷粹芝.梅花草属一新系.植物分类学报():.收稿日期:修回日期:基金项目:西华师范大学校级科研项目()作者简介:杨彩霞()女硕士主要从事植物系统学研究贵
3、州 科 学():(/).(.)(.).:天麻为兰科植物天麻 .的干燥块茎其性味甘、平归肝经具有平肝息风、祛风通络、止痉的功效别名赤箭、离母等 天麻有着悠久的药用历史是常用药食两用植物 天麻种植地较为广阔在我国东北地区、华中地区、四川以及云贵地区等均有分布主产区位于云贵高原、四川和西藏 现代研究表明天麻不仅具有镇痛镇静、抗惊厥、抗氧化、抗肿瘤的作用还有益智、抗衰老、降血压等作用 近年来大量研究表明天麻药物活性成分除多糖外还有天麻素、天麻苷元、巴利森苷类等酚类成分其药理活性有镇静催眠、抗肿瘤和抗病毒活性、调节免疫以及改善心血管系统 等 目前对天麻酚类成分的提取工艺研究较少 因此本实验以中药天麻为试
4、材用 软件设计响应面试验作为试验方法优化天麻多酚的提取工艺建立最佳的提取方法同时比较不同产地天麻药材多酚含量的相关性为后期建立天麻多酚质量控制体系提供实验基础 仪器与试剂.仪器超纯水机(微量分析型淅川沃特浦水处理设备有限公司)、恒温水浴锅(数显上海况胜实业发展有限公司)、超声波清洗机(上海科导超声仪器有限公司)、紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)、电子天平(梅特勒托力多仪器(上海)有限公司).试剂无水碳酸钠(分析纯天津市永大化学试剂有限公司)、无水乙醇(分析纯天津市富宇精细化工有限公司)、福林酚(源叶生物)、没食子酸对照品(乐美天医药)实验用水.药材实验药材均购买于中药材市场经
5、贵州中医药大学中药鉴定教研室刘晓龙老师鉴定为兰科植物天麻 .的干燥块茎 药材产地及批次见表 表 药材产地批次表样品批次产 地样品批次产 地云南河南云南安徽云南安徽云南贵州甘肃贵州陕西贵州陕西贵州陕西贵州湖北贵州河南贵州 方法.样品制备取药材市场购买的已干燥天麻块茎药材用打粉机粉碎过筛后得到天麻药材样品.供试品的制备精密称取 天麻粉末(批次为)置于锥形瓶中加入 乙醇溶液称重静置 用超声法提取 过滤取续滤液.对照品的制备精密称取没食子酸对照品 置于 生命科学/第 卷容量瓶中用蒸馏水定容至刻度线制成浓度约为 /的对照品溶液.最大吸收波长的确定取 项对照品溶液 于 比色管中摇匀分别加入 福林酚摇匀静置
6、 加入 碳酸钠溶液 混匀室温避光显色 在紫外检测器上进行全波长扫描以吸收最大、干扰最小为原则确定最大吸收波长为 结果见图 C C NNNN图 对照品、样品全波长扫描结果图.标准曲线的绘制分别精密量取 项没食子酸对照品溶液 、于 容量瓶中加蒸馏水 摇匀分别加入 福林酚摇匀静置 加入 碳酸钠溶液 混匀用蒸馏水定容至刻度线室温显色放置 于 处测定吸光度以吸光度为横坐标质量浓度为纵坐标绘制标准曲线 ().显色条件的考察.多酚提取精密称取 天麻粉末置于锥形瓶中加入 乙醇溶液称重静置 超声 用乙醇补重过滤取续滤液 于 容量瓶中备用.福林酚用量参照 项供试品溶液的制备加蒸馏水 依次加入福林酚试剂 、每个实验
7、设置 个平行样摇匀静置 其余操作同 标准曲线的绘制 结果显示梯度 、福林酚用量在 处多酚含量较高故 福林酚用量可以作为显色条件 如图 所示NH H N-图 考查福林酚用量.碳酸钠用量取 项容量瓶加蒸馏水 依次加入福林酚 摇匀静置 依次加入 、碳酸钠溶液其余操作同 福林酚用量 结果显示梯度 、的碳酸钠用量在 处多酚含量最高故选择 的碳酸钠作为显色条件 如图 所示NH H N-图 考查 碳酸钠用量.考查避光放置时间取 项样品参照 福林酚用量依次加入福林酚试剂 碳酸钠 分别避光放置 、每个梯度设置两个平行样其余操作同 福林酚用量 结果显示避光时间为 时的多酚含量最高故选择避光时间为 为显色时间 如图
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