猪伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株,传代细胞源)生产用毒种不同代次生物学特性的研究.pdf
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1、猪伪狂犬病活疫苗(BarthaK61株,传代细胞源)生产用毒种不同代次生物学特性的研究丘成文1,赖月辉1*,齐冬梅1,吴文福1,侯高伟1,周晓敏1,陈坚1,徐少珠1,张国丽1,陈建凯1,2,张璞1,2,曾垠涛1(1.广东永顺生物制药股份有限公司,广东 广州 5113562.佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东 佛山 528231)摘 要:将猪伪狂犬病活疫苗(BarthaK61株,传代细胞源)基础毒种F7传至F13,并将PRVF8PRV F13六个代次毒种接种仔猪进行安全性检验,PRV F8、PRV F10、PRV F13三个代次毒种接种仔猪进行免疫原性检验,用以研究猪伪狂犬病活疫苗(Bar
2、thaK61株,传代细胞源)生产用毒种不同代次生物学特性。安全性检验结果显示,各代次毒种经颈部肌肉接种仔猪,观察期内仔猪精神、食欲、体温均正常;免疫原性检验结果显示,免疫组仔猪攻毒后精神、食欲、体温均正常,对照组仔猪攻毒后体温升高,全部发病并死亡。以上结果表明,猪伪狂犬病活疫苗(BarthaK61株,传代细胞源)不同代次的生产毒种对仔猪均安全且保持良好的免疫原性。关键词:猪伪狂犬病活疫苗;生产用毒种;安全性检验;免疫原性检验;生物学特性中图分类号:S852.5文献标识码:A文章编码:10058567(2023)04002505Study on the Biological Characteri
3、stics of DifferentGenerations of Porcine Pseudorabies Live Vaccine(BarthaK61 Strain,Cell Line Origin)in Swine ProductionQIU Chengwen1,LAI Yuehui1*,QI Dongmei1,WU Wenfu1,HOU Gaowei1,ZHOU Xiaomin1,CHEN Jian1,XU Shaozhu1,ZHANG guo li1,CHEN Jiankai1,2,ZHANG Pu1,2,ZENG Yintao1(1.Guangdong winsun biophama
4、ceutical co.,Ltd.,Guangzhou Guangdong 511356;2.College of life science and engineering,Foshan University,Foshan Guangdong 528231)Abstract:To study the biological characteristics of different generations of porcine pseudorabies live vaccine(BarthaK61 strain,cell line origin)production virus seeds,the
5、 porcine pseudorabies live vaccine(BarthaK61strain,cell line origin)basic virus seed F7 was continuously passaged to F13,and six generations of PRV F8PRVF13 were inoculated with piglets for safety test,and three generations of PRV F8、PRV F10 and PRV F13 wereinoculated with piglets for immunogenicity
6、 test.The results of the safety test showed that the spirit,appetite,and bodytemperature of piglets were normal during the observation period after each generation of production virus seeds wereinoculated on the neck muscles;the results of the immunogenicity test showed that the spirit,appetite,and
7、body收稿日期:20220304作者简介:丘成文(1983年生),助理兽医师,从事兽用生物制品的生产。Email:*通讯作者:赖月辉(1972年生),高级兽医师,从事兽用生物制品的研发与生产。Email:Guangdong Journal of Animal And Veterinary ScienceDOI:10.19978/ki.xmsy.2023.04.05广东畜牧兽医科技广东畜牧兽医科技2023年(第48卷)第4期试验研究 25试验研究猪伪狂犬病活疫苗(BarthaK61株,传代细胞源)生产用毒种不同代次生物学特性的研究丘成文,等伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies vi
8、rus,PRV)引起的家畜和多种野生动物的一种以发热、奇痒、呼吸和神经系统疾病为特征的急性传染病12。患病动物病死率高,但成年猪死亡率低,也不发生奇痒,妊娠母猪可导致死胎和流产3。预防本病的发生,主要措施是加强兽医卫生管理、猪场净化和疫苗免疫接种45。其中,疫苗免疫接种是减少猪群经济损失的最有效方法。猪群的免疫效果关键在于疫苗质量的优劣,而毒种是疫苗的根基,为保证疫苗的良好免疫原性,必须把好毒种的质量关,为此本文对伪狂犬病病毒(Bartha K61株)生产用毒种进行了安全性和免疫原性等生物学特性的研究,总结如下。1材料与方法1.1毒种伪狂犬病活疫苗(BarthaK61株,传代细胞源)基础毒种F
9、7代(PRV F7)、检验用强毒PRV GD株,均由广东永顺生物制药股份有限公司制备、鉴定和保存6。1.2细胞猪睾丸(ST)传代细胞系,由广东永顺生物制药股份有限公司提供。1.3仔猪来源于广东永顺生物制药股份有限公司定点供应猪场,无PRV、CSFV、PRRSV病史以及伪狂犬病抗原抗体阴性的2025日龄健康易感仔猪。1.4生产种子批的建立生产种子批由基础种子批经猪睾丸(ST)传代细胞繁殖传代而来,取同一批次长成良好单层的ST 传代细胞,接入适量的基础毒种 PRV F7,置37、含5%二氧化碳培养箱中培养,定期观察细胞 病 变(cytopathic effect,CPE),当 CPE 达 到80%
10、90%以上时收获细胞培养物,根据特定生产种子批的检验标准进行系统检验,检验结果合格后可作为生产用毒种种子批PRV F8。用此方法将PRV传至F13(PRV F13)。1.5安全性检验用2025日龄健康易感仔猪35头,随机分为7组,每组5头,将六个不同代次的生产用毒种种子批PRV F8PRV F13分别用猪用疫苗稀释液稀释为107.0TCID50/mL,分别接种5头仔猪,每头仔猪颈部肌肉接种 1.0 mL;剩余 5 头仔猪作为对照组,每头仔猪颈部肌肉接种猪用疫苗稀释液1.0 mL。接种后观察14天,每天上、下午各测直肠温一次。1.6免疫原性检验用 2025 日龄健康易感仔猪 20 头,随机分为4
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