海口市海产品中副溶血弧菌和溶藻弧菌的污染情况监测分析.pdf
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1、海南医学院学报 2023,29(15)Journal of Hainan Medical University海口市海产品中副溶血弧菌和溶藻弧菌的污染情况监测分析陈晨1,2,庞燕3,邵仁杰2,4,李雪霞2,4,夏乾峰2,4(1.海南医学院公共卫生与全健康国际卫生学院,海南 海口 571199;2.海南医学院热带转化医学教育部重点实验,海南 海口 571199;3.海口市疾病预防控制中心,海南 海口 571199;4.海南医学院热带医学院,海南 海口 571199)摘要 目的:了解海口市海产品中副溶血弧菌和溶藻弧菌的污染及分布情况。方法:采集 2020 年2022 年海口市售的 3 大类海产品,
2、参照 食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验(GB4789.72013)检测副溶血性弧菌和溶藻弧菌,采用实时荧光 PCR 技术对副溶血性弧菌及溶藻弧菌进行鉴定,分析不同种类海产品、不同年份和不同季度的副溶血弧菌和溶藻弧菌检出情况。结果:海产品中共采集 119份,其中 24份检出副溶血性弧菌,阳性率 20.1%;46份检出溶藻弧菌,阳性率 38.7%;各类海产品中虾类副溶血性弧菌阳性率最高,为 50%;贝类溶藻弧菌阳性率最高,为 48%。监测年份之间比较,2021年溶藻弧菌的阳性率最高,为 76.7%;2022年副溶血性弧菌阳性率最高,为 25%。不同季度之间比较,第二季度溶藻弧菌的阳
3、性率最高,为 80%,第四季度副溶血弧菌的阳性率最高,为 33.3%。不同年份、季度海产中溶藻弧菌阳性率差异具有统计学意义(P0.05),不同种类、季度副溶血弧菌阳性率差异具有统计学意义(P0.05)。结论:2020年2022年海口市海产品中存在着副溶血性弧菌和溶藻弧菌的污染,建议加强相关部门的监管,保障人民海产品食用的安全性。关键词 海产品;副溶血弧菌;溶藻弧菌中图分类号 R155.5 文献标识码 A 文章编号 1007-1237(2023)15-1156-06Monitoring and analysis of contamination of Vibrio parahaemolyticu
4、s and Vibrio alginolyticus in seafood in HaikouCHEN Chen1,2,PANG Yan3,SHAO Renjie2,4,LI Xuexia2,4,XIA Qianfeng2,4(1.International School of Public Health and One Health,Hainan Medical University,Haikou 571199,China;2.Key Laboratory of Tropical Translational Medicine of Ministry of Education,Hainan M
5、edical University,Haikou 571199,China;3.Haikou Center for Disease Control and Prevention,Haikou 571199,China;4.Tropical Medical University of Hainan Medical University,Haikou 571199,China)Foundation Project:This study was supported by Major Science and Technology Project of Hainan Province(ZDKJ20200
6、3)Author:CHEN Chen,Email:.Correspondence to:LI Xuexia,Associate Professor,Email:;XIA Qianfeng,Professor,Email:.Received:20230310 Revised:20230603 JHMU,2023;29(15):11561161View from specialist:It is creative,and of certain scientific and educational value.ABSTRACT Objective:To investigate the contami
7、nation and distribution of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio alginolyticus in seafood in Haikou.Methods:Three types of seafood sold in Haikou from 2020 to 2022 were collected,Vibrio parahaemolyticus and Vibrio alginolyticus were detected according to the National Food Safety Standard Food Microbiol
8、ogical Examination of Vibrio parahaemolyticus(GB 4789.72013),and they were identified by realtime fluorescence PCR.The detection of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio alginolyticus in different kinds of seafood,different years and different quarters was analyzed.Results:A total of 119 seafood sample
9、s were collected.Among them,24 samples were positive with Vibrio parahaemolyticus,with DOI:10.13210/ki.jhmu.20230608.001网络出版地址:https:/ 海南省重大科技计划项目(ZDKJ202003)作者简介 陈晨,Email:。通讯作者 李雪霞,副教授,Email:;共同通讯作者:夏乾峰,教授,Email:。收稿日期 20230310 修回日期 20230603 网络出版时间:20230609 13:09:171156陈晨等.海口市海产品中副溶血弧菌和溶藻弧菌的污染情况监测分析
10、a positive rate of 20.1%;46 samples were positive with Vibrio alginolyticus,with a positive rate of 38.7%.Among various types of seafood,shrimp have the highest positivity rate for Vibrio parahaemolyticus at 50%,while shellfish have the highest positivity rate for Vibrio alginolyticus at 48%.Compari
11、ng between monitoring years,the positive rate of Vibrio alginolyticus was the highest in 2021(76.7%),while the positive rate of Vibrio parahaemolyticus was the highest in 2022(25%).Comparing between different quarters,the positivity rate for Vibrio alginolyticus was found to be highest in the second
12、 quarter at 80%,while the positivity rate for Vibrio parahaemolyticus was highest in the fourth quarter at 33.3%.There were statistically significant differences(P0.05)in the positivity rate for Vibrio alginolyticus in different years and quarters,as well as in the positivity rate for Vibrio parahae
13、molyticus in different types and quarters.Conclusion:Vibrio parahaemolyticus and Vibrio alginolyticus were found in seafood products in Haikou City from 2020 to 2022.It is recommended that relevant departments strengthen supervision to ensure the safety of seafood products consumed by the public.KEY
14、WORDS Seafood;Vibrio parahaemolyticus;Vibrio alginolyticus海南作为热带岛屿地区,是国内海产品最丰富的省份之一。其中海口作为省会城市,日常生活中承担了 290万人口的海产品饮食所需。海口市海产品丰富多样,也不乏一些细菌会存在于海产品中,常见的包括副溶血性弧菌和溶藻弧菌。副溶血性弧菌是一种革兰阴性嗜盐杆状细菌,广泛分布于多种海产品中,包括鱼类、贝类、头足类、虾蟹类等1。根据现有的研究报道,绝大部分副溶血性弧菌的感染与食用海产品有关2。若食用了被副溶血性弧菌污染的、且未完全煮熟的海鲜可导致急性胃肠炎,同时伴有恶心、头痛和低烧等症状3。溶藻弧菌
15、是一种专性寄生于嗜盐对虾等海洋生物中的细菌4,可直接感染人类。人们可能通过接触疫水或食用被污染的海产品感染,可引起严重的软组织感染、败血症和其他肠道外感染5。近年来的研究也证实了副溶血性弧菌和溶藻弧菌是沿海地区腹泻病的常见病原菌6。此外,中国疾病预防控制中心对2009年2018年的急性腹泻患者的监测显示,食源性弧菌是导致腹泻的重要病原体之一,在所有致腹泻相关病菌中,其所占比例约为 10.83%7。目前对于海南地区海产品中副溶血性弧菌和溶藻弧菌的污染情况的研究较少,本研究探究海南地区海产品中副溶血性弧菌和溶藻弧菌的整体污染情况,为控制海产品的污染控制提供依据,同时为促进公共卫生的防控提供依据。本
16、研究监测了 20202022 年期间海口市部分海产品中副溶血弧菌和溶藻弧菌的流行情况,旨在为海口市海产品中副溶血弧菌和溶藻弧菌的污染情况提供可靠的数据支撑,有利于提高海产品质量,保护公众健康。1 材料和方法 1.1材料1.1.1材料与试剂按照国家食品污染和有害因素风险监测的要求,在海口市所辖个区:龙华区、美兰区、琼山区和秀英区的餐饮、超市、零售店采集119 份海产品;其中虾类 10 份,鱼类 59 份,贝类 50份。每份样本采集 5001 000 g,采集后在 4 h 内送实验室检测。以上所有样本资源均由海口市疾控中心人员在 20202022年 112月所采集。副溶血性弧菌核酸检测试剂盒(PC
17、R荧光探针法)(DS1400)和溶藻弧菌核酸检测试剂盒(PCR荧光探针法)(DS1430)购自于广州达安生物科技有限公司。3%碱性蛋白胨水、3%氯化钠三糖铁琼脂、3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂、硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂(TCBS)均购自广东环凯微生物科技有限公司。1.1.2仪器与设备Incucell ICV 55 ECO 电热恒温培养箱(德国 MMM 公司),7500FAST 荧光定量RCR 仪(美国 Applied Biosystems 公司),T1000 电子天平(福州华志科学仪器有限公司),SterilGARD Advance SG403生物安全柜(美国 Baker公司)。1.2方法副
18、溶血弧菌和溶澡弧菌的分离及鉴定:采用食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验(GB 4789.72013)为标准,进行样本的前处理、增菌分离及鉴定。利用副溶血性弧菌和溶藻弧菌的核酸检测试剂盒,采用实时荧光 PCR 技术可疑菌落进行验证鉴定。反应程序:50 2 min,95 预变性 15min;95 10 s,55 45 s,40 个循环采集荧光。以副溶血弧菌和溶澡弧菌核酸检测试剂盒提供的阳性质控品为阳性对照,阴性质控品为阴性对照。1.3统计学处理采用 SPSS 26.0 软件对数据进行分析,阳性率的比较采用 2检验,当理论频数1 且5,则采用Fisher精确检验,P38;阳性:Ct38
19、 且曲线有明显的扩增曲线。如图 3 所示,样品的 Ct=12.57,阳性对照为 Ct=24.53,阴性对照Ct=40,可以确定该样品为副溶血弧菌。根据溶藻弧菌核酸检测试剂盒的说明,溶藻弧菌的结果判定标准如下,阴性:无扩增曲线或 Ct38;阳性:Ct38且曲线有明显的扩增曲线。如图 4所示,样品的 Ct=15.12,阳性对照为 Ct=22.73,阴性对照 Ct=40,可以确定该样品为溶藻弧菌。2.3不同种类海产品中副溶血性弧菌的检出情况20202022 年所采集的海口市市售鱼类、虾类、贝类 3大类的 119份样品中,24份样品检出副溶血性弧菌,总阳性率为 20.1%(表 1)。3大类海产品中均检
20、出副溶血性弧菌,其中虾类中阳性率最高,为 50%;50 份贝类样本中,副溶血性弧菌的阳性率为 34%;鱼类的阳性率较低。经 Fisher精确检验分析,各类样品中副溶血性弧菌阳性率差异有统计学意义(2=23.529,P0.05)。2.5不同年份海产品中副溶血性弧菌的检出情况按不同年份统计 3种海产品中副溶血性弧菌的检出情况,2022 年副溶血性弧菌的阳性率最高,为25%(表 3)。经卡方检验分析,不同年份海产品中副溶血性弧菌阳性率差异无统计学意义(2=1.10,P0.05)。2.6不同年份海产品中溶藻弧菌的检出情况按不同年份统计 3种海产品中溶藻弧菌的检出情 况,其 中 2021 年 溶 藻 弧
21、 菌 的 阳 性 率 最 高,为76.7%(表 4)。经卡方检验分析,不同年份海产品中溶藻弧菌阳性率差异有统计学意义(2=42.573,P0.05)。2.7不同季度海产品中副溶血弧菌检出情况按不同季度统计 3种海产品中副溶血弧菌的检出 情 况,第 4 季 度 副 溶 血 弧 菌 的 阳 性 率 高,为32.8%,第 3季度未检出副溶血弧菌(表 5)。经 Fisher精确检验分析,不同季度海产品中溶藻弧菌阳性率差异有统计学意义(2=61.645,P0.05)。2.8不同季度海产品中溶藻弧菌的检出情况按不同季度统计 3种海产品中溶藻弧菌的检出情况,其中第 2 季度溶藻弧菌的阳性率最高,为80%,第
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