DB42T2063.2-2023桑黄生产技术规程 第2部分:菌种制备.pdf
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1、 ICS 65.020 CCS B 39 DB42 湖北省地方标准 DB42/T 2063.22023 桑黄生产技术规程 第 2 部分:菌种制备 Technical regulations for sanghuangporus production Part 2:Spawn production 2023-06-27 发布 2023-08-27 实施 湖北省市场监督管理局 发 布 目次 前言.III 引言.V 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 固体菌种制备.1 5 场地分区液体菌种制备.4 6 标签标志、包装、运输和贮存.6 附录 A(资料性)母种培养基.8 附录
2、B(资料性)原种、栽培种培养基.9 附录 C(资料性)摇瓶液体菌种培养基.10 附录 D(资料性)发酵罐液体菌种培养基.11 附录 E(资料性)肉汤培养基.13 参考文献.14 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件是DB42/T 2063的第2部分。DB42/T 2063桑黄生产技术规程已发布如下部分:第 1 部分:生产环境要求;第 2 部分:菌种制备。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由湖北森源生态科技股份有限公司、湖北省农业科学院经济作物研究所提出。本文件由湖北省农业农村厅
3、归口。本文件起草单位:湖北森源生态科技股份有限公司、湖北省农业科学院经济作物研究所、宜昌市农业科学研究院、湖北省远安县农业技术推广中心。本文件主要起草人:周伟、周洪英、孙 波、吴洪丽、王卓仁、刘启燕、赵会长、刘世玲、申露露、李克彬、李明亮、翟红星、徐爱玉、史玉玲、陈姣蓉、陈严严、焦海涛、张顺凯、陈红霞。本文件实施应用中的疑问,可咨询湖北省农业农村厅,联系电话:027-87665821,邮箱:。本文件的有关修改意见建议请反馈至湖北森源生态科技股份有限公司,联系电话:0717-3815789,邮箱:;湖北省农业科学院经济作物研究所,联系电话:027-87389860,邮箱:。引言 随着桑黄产业在湖
4、北省的快速发展,需规范化、标准化引导桑黄生产,保障桑黄产业健康高质发展。桑黄菌种制备是生产过程的基础和核心,对生产顺利进行、桑黄产量和质量高低等有着决定性的影响。该文件制定的目的,是构建桑黄生产标准体系,整体提升我省及我国桑黄产品质量。该文件不同部分的划分和技术规程的确立,主要依据为桑黄生产过程中的不同环节,亦便于该文件各部分单独使用。桑黄生产技术规程拟由以下部分构成。第 1 部分:生产环境要求。目的在于规范桑黄生产环境的一般性要求及操作管理技术措施。第 2 部分:菌种制备。目的在于规范桑黄菌种制备的一般性要求及操作管理技术措施。以上各部分涉及桑黄生产的不同环节,各部分内容协调互补,共同构成桑
5、黄生产标准体系,以完善桑黄生产标准体系。桑黄生产技术规程 第 2 部分:菌种制备 1 范围 本文件规定了桑黄生产菌种制备过程以及标签标志、包装、运输和贮存要求。本文件适用于湖北省桑黄生产环境要求的规范。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 191 包装储运图示标志 GB 4789.28 食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 12728 食用菌术语 GB/
6、T 26373 醇类消毒剂卫生要求 GB/T 37671-2019 金针菇菌种 NY/T 1284 食用菌菌种中杂菌及害虫的检验 NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求 NY 5099 无公害食品 食用菌栽培基质安全技术要求 DB42/T 2063.1 桑黄生产技术规程 第1部分:生产环境要求 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。4 固体菌种制备 人员配备 人员配备要求见参考文献食用菌菌种管理办法。生产用水 应符合GB 5749的要求。酒精 应符合GB/T 26373的要求。母种制备 4.4.1 工艺流程 培养基配制分装灭菌摆斜面冷却无菌检验菌种制备接种培养检验母种。4.4.2
7、 容器 使用直径18 mm20 mm、长180 mm200 mm的玻璃试管,试管塞采用硅胶塞。4.4.3 培养基 参照附录A表A.1配方配制,将桑木粉和切片的马铃薯放入水中,煮沸30 min,用双层纱布过滤,弃去滤渣,加入琼脂融化后,加入剩余配料充分溶解后,补水至1000 mL。4.4.4 分装 将配制好的培养基立即分装,装量为试管长度的1/51/4。试管口保持洁净,塞入硅胶试管塞,用牛皮纸包扎成捆。4.4.5 灭菌 将包扎好的试管直立放在高压灭菌锅中灭菌,饱和蒸汽压力达到1.05 kg/cm2、温度121 时,恒压恒温灭菌30 min。4.4.6 摆斜面 灭菌结束后,当压力表指针回到“0”位
8、时,打开灭菌锅锅盖,趁热将试管以适当斜度摆放在操作台面上冷却凝固,斜面长度为试管的2/3。4.4.7 无菌检验 按试管总量的3%5%随机抽取斜面培养基,置于30 1 恒温培养48 h,无微生物长出的为灭菌合格。4.4.8 接种 取符合NY/T 1742 要求的桑黄菌种按无菌操作要求,取约0.3 cm2 0.5 cm2菌块接种到新的试管斜面培养基中,置于28 的培养箱中培养。当菌丝长满培养基,即得母种,可用于生产原种。4.4.9 培养 将斜面试管置于28 的培养箱中培养,至菌丝长满培养基,选取菌丝生长健壮、均匀一致、无杂菌污染的试管菌种留存使用。4.4.10 质量检验 接种48 h后应做首次检查
9、,剔除未萌发生长或受污染者;母种菌落长至直径约2 cm左右时,进行第二次检查;长满前再检查一次,剔除污染或生长不良的菌种。按照 NY/T 1284 的规定进行检查。原种、栽培种制备 4.5.1 工艺流程 培养基配制装袋(瓶)灭菌冷却接种培养质量检验原种(栽培种)。4.5.2 容器 4.5.2.1 原种一般选用 750 mL 玻璃菌种瓶或 15 cm28 cm(0.05 mm0.07 mm)聚丙烯塑料袋;4.5.2.2 栽培种一般选用(17 cm18 cm)35 cm(0.05 mm0.07 mm)改性聚乙烯或聚丙烯塑料袋。4.5.3 培养基 培养基配方参见附录B表B.1,含水量控制在55%65
10、%。4.5.3.1 培养基材料的规格及要求 培养基材料应符合NY 5099的要求,其具体规格和要求为:a)用于原种及栽培种的桑树木屑、栎类等杂树木屑,冬季粉碎加工时过 4 目(直径 12 cm)左右的筛,晒干入库备用;b)麸皮使用新鲜、纯净无杂质的大块麸皮,含水量不超过 12%;c)碳酸钙粉使用合格的轻质碳酸钙粉;d)蔗糖使用没有经过脱色处理的红糖为好,其营养成分更丰富。4.5.3.2 材料的预处理及配置 为了使配制的培养料含水量均匀,木屑混合搅拌前作加水预湿处理;按照附录B的配方比例,计算培养基各材料的配方量准确称取,严格按照要求的含水量准确加入所需的水,利用搅拌机进行培养料的均匀搅拌。4.
11、5.4 装袋(瓶)保证装料松紧度的一致,压紧料面,瓶装菌种用塑料透气膜封口,袋装菌种套上无棉盖体封口。装料确保在2 h4 h内完成,防止时间过长微生物繁殖导致培养料酸败。4.5.5 灭菌 保持饱和蒸汽压力1.05 kg/cm21.37 kg/cm2、温度121 125 时,恒温恒压灭菌2 h。4.5.6 冷却 灭菌完成后取出置于净化冷却区域冷却至室温。4.5.7 接种 4.5.7.1 接种前准备 用75%酒精擦拭超净工作台、接种用具、需接种的培养料袋(瓶)进行表面消毒后,置于超净工作台内紫外线照射30 mim,再进行后续操作。4.5.7.2 接种操作步骤 接种操作步骤包括:a)原种。提前备好母
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