GB 29989-2013婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定.pdf
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1、中中华华人人民民共共和和国国国国家家标标准准GB 2998920132013-11-29 发布2014-06-01 实施食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定GB 2998920131食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定1范围本标准规定了婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定。2原理试样经过水提取,用高氯酸沉淀蛋白质后过滤。滤液经碱皂化后使溶液中结合态的左旋肉碱游离出来。左旋肉碱与乙酰辅酶 A 在乙酰肉碱转移酶的催化下反应生成乙酰肉碱和游离的辅酶 A。游离的辅酶 A 和 2-硝基苯甲酸反应生成黄色物质,其颜色深浅与游离的辅酶 A
2、 含量成正比。因游离的辅酶 A与左旋肉碱是等摩尔反应关系,可间接求出试样中左旋肉碱含量。3试剂和材料注:除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T6682 规定的三级水。3.1试剂3.1.1高氯酸(HClO4)。3.1.2氢氧化钠(NaOH)。3.1.3氢氧化钾(KOH)。3.1.42-硝基苯甲酸(C14H8N2O8S2)。3.1.5N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸(C8H18N2O4S)。3.1.6乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2Na22H2O)。3.1.7乙酰辅酶 A(AcetylCoA):在 28保存。3.1.8乙酰肉碱转移酶(CAT):在 28保存。3.2试剂配制3.
3、2.1高氯酸溶液(13%):13 mL 高氯酸稀释至 100 mL。3.2.2氢氧化钠溶液(10 mol/L):称取 40 g 氢氧化钠用水溶解,冷却后稀释至 100 mL。3.2.3氢氧化钾溶液(4.0 mol/L):称取 22.4 g 氢氧化钾用水溶解,冷却后稀释至 100 mL。3.2.4显色储备液:分别称取 50 mg 2-硝基苯甲酸、5.96 g N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸、185 mg乙二胺四乙酸二钠溶于 30 mL 去离子水中,用 10 mol/L NaOH 溶液调 pH 至 7.47.6,然后用水定容至 50 mL。此液置于 4冰箱中可保存 3 个月。3.2.5显色工
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