DB36_T 1652-2022苦瓜抗枯萎病苗期鉴定技术规程.pdf
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1、ICS 65.020 CCS B 16 DB36 江西省地方标准 DB36/T 16522022 苦瓜抗枯萎病苗期鉴定技术规程 Technical specifications for resisitance evaluation of bitter gourd to Fusarium wilt at seedling stage 2022-09-26 发布 2023-04-01 实施 江西省市场监督管理局 发 布 DB36/T 16522022 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 接种体制备.1 5 鉴定方法.2 6 鉴定结果判断.2 7 鉴
2、定品种要求.2 附录 A(资料性)苦瓜枯萎病菌生理小种.3 附录 B(规范性)枯萎病菌悬液的制备.5 附录 C(规范性)苦瓜品种枯萎病抗性鉴定表.6 DB36/T 16522022 II 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由江西省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位:江西省农业科学院蔬菜花卉研究所、江西省高安市农业农村局。本文件主要起草人:关峰、石博、张景云、万新建、张会国、黄国东、陈蕾、朱琦、陈保玲、蔡裕山。DB36/T 16522022
3、1 苦瓜抗枯萎病苗期鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了苦瓜抗枯萎病苗期鉴定和抗性评价方法的术语和定义、接种体制备、鉴定方法、鉴定结果判断、鉴定品种要求等。本文件适用于苦瓜枯萎病苗期抗性鉴定及评价。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 16715.1 瓜类蔬菜作物种子 第1部分:瓜类 NY/T 2354 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 苦瓜 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 苦瓜枯萎病 bitte
4、r gourd Fusarium wilt 由尖孢镰刀菌苦瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.momordica,FOM)所引起的叶片网状黄化,茎叶 坏死,切开病株可发现维管束变成褐色,致整株枯死的苦瓜土传病害。4 接种体制备 4.1 病原物分离与保存 以常规组织分离法,从发病茎部的褐色维管束组织中分离枯萎病病原物,进行分离物的纯化,后经形态学鉴定和致病性测定,确认为尖孢镰刀菌苦瓜专化型,保存备用。4.2 生理小种鉴定 对于抗病性鉴定接种的病原分离物进行生理小种的鉴定,鉴定方法参照附录 A。4.3 接种体 4.3.1 菌株繁殖 选择苦瓜枯萎病优势生理小种菌株制备接种体。将
5、菌株活化后,用无菌水制成孢子悬浮液,均匀涂DB36/T 16522022 2 抹在 PDA 平板上,置于 26 下培养 5 d7 d,待培养皿长满孢子。将枯萎病菌菌块,接种于装有灭菌的 PS 培养基的三角瓶中,在摇床上 26条件下 160 rmin-1,恒温培养 3 d5 d,即可产生大量分生孢子,备用。4.3.2 菌悬液制备 将 PS 培养基培养 3 d5 d 的菌液用四层灭菌纱布过滤。过滤后的菌液离心(4000 rmin-1,5 min),弃上清液。离心后的分生孢子液用无菌水稀释,用血球计数板计数分生孢子菌液浓度,使分生孢子悬浮液接种浓度调至 106 cfumL-1。过滤后的菌丝用高速组织
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