A-PRF联合Bio-Os...围骨缺损的修复效果实验研究_黄仙波.pdf
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1、基础研究A-PF 联合 Bio-Oss 对种植体周围骨缺损的修复效果实验研究黄仙波,何志良,曹雷,贺成功,马慧颖,李燕波,李士辉,李春佳,张艳波,田茜基金项目:河北省医学科学研究课题计划(20211447);承德市科学技术研究与发展计划项目(202204A147)作者单位:067000 河北 承德,承德市中心医院口腔科(黄仙波、何志良、曹雷、贺成功、马慧颖、李燕波、李士辉、李春佳);067000 河北 承德,承德医学院附属医院口腔科(张艳波);065800 河北 文安,文安县医院口腔科(田茜)作者简介:黄仙波,硕士研究生,主治医师。主要从事口腔颌面外科方向研究通讯作者:田茜,E-mail:44
2、8307249 qq com 摘要 目的探讨改良型富血小板纤维蛋白(A-PF)联合 Bio-Oss 对种植体周围骨缺损的修复效果。方法12 只新西兰大白兔建立下颌骨缺损模型,在每只大白兔双侧下颌骨制备 6 个骨缺损孔,并分别植入 A-PF 与 Bio-Oss骨粉 2 1 混合物(A 组)、1 1 混合物(B 组)、1 2 混合物(C 组)、空白对照(D 组)、单独植入 A-PF(E 组)、单独植入 Bio-Oss 骨粉(F 组),于植入后 4、8、12 周处死动物,行大体观察、影像学及组织学观察,并对成骨效果进行分析。结果术后 4 周,D 组可见纤维结缔组织围绕,A 组、E 组骨质完全覆盖螺纹
3、钉,其余 3 组出现不同程度骨质覆盖,术后8、12 周相同部位种植体表面骨质覆盖增厚。术后 4、8、12 周骨体积分数 A 组 E 组 B 组 C 组 F 组 D 组(P 0.05)。术后 4 周,A 组有新生血管、骨基质形成,骨小梁钙化良好,有大量新骨形成;术后 8、12 周,A 组骨小梁融合成岛状,可见不同程度的板状骨。术后 4、8、12 周骨形成率 A 组 E 组 B 组 C 组 F 组 D 组(P 0.05)。结论A-PF 与 Bio-Oss 混合物具有良好骨缺损修复效果,A-PF 与 Bio-Oss 2 1 混合物成骨效果更佳,可提高种植体骨愈合能力。关键词 改良型富血小板纤维蛋白;
4、Bio-Oss;下颌骨;骨缺损;牙种植体;修复;骨体积分数;骨生成 中国图书资料分类号-332;782 文献标志码 A 文章编号 1002-3429(2023)04-0136-06 DOI 103969/j issn 1002-3429 2023 04 029Experimental Study on the Effect of A-PF Combined with Bio-Oss in e-pairing Peri-implant Bone DefectsHAUNG Xianbo1,HE Zhiliang1,CAO Lei1,HE Chenggong1,MA Huiying1,LI Yanb
5、o1,LI Shihui1,LIChunjia1,ZHANG Yanbo2,TIAN Qian31 Department of Stomatology,Chengde Central Hospital,Chengde,Hebei 067000,China;2 Department of Stomatology,the Affiliated Hospital of Chengde Medical University,Chengde,Hebei 067000,China;3 Department of Stomatology,theHospital of Wenan County,Wenan,H
6、ebei 065800,China Abstract ObjectiveTo explore the experimental study on the effect of modified platelet-rich fibrin(A-PF)com-bined with Bio-Oss in repairing peri-implant bone defects MethodsA mandibular defect model was established in 12 NewZealand white rabbits Six bone defect holes were prepared
7、in the bilateral mandibles of each rabbit and implanted with a 21 mixture of A-PF and Bio-Oss bone powder(Group A),a 1 1 mixture(Group B),a 1 2 mixture(Group C),a blankcontrol(Group D),a single implantation of A-PF(Group E),and a single implantation of Bio-Oss bone powder(GroupF),respectively The an
8、imals were sacrificed at 4,8,12 weeks after implantation for gross observation,imaging and histolog-ical observation,and analysis of osteogenic effects esultsAt 4 weeks after surgery,fibrous connective tissue could be seensurrounding the implant in Group D,and bone in Group A and Group E completely
9、covered the screw Bone coverage in theother 3 groups appeared in varying degrees,and at 8 and 12 weeks after surgery,the bone coverage on the surface of the im-plant at the same location was thicker At 4,8,and 12 weeks after surgery,the bone volume fraction was the greatest inGroup A,followed by Gro
10、up E,Group B,Group C,Group F,and Group D(P 0.05)At 4 weeks after surgery,in GroupA,there were neovascularization,bone matrix formation,good bone trabecular calcification,and a large amount of new boneformation At 8 and 12 weeks after surgery,the trabeculae in Group A were fused to form islands,with
11、different degrees ofplate-like bone visible At 4,8,12 weeks after surgery,the bone formation rate was the greatest in Group A,followed byGroup E,Group B,Group C,Group F and Group D(P 0.05)ConclusionThe mixture of A-PF and Bio-Oss has a631good effect on bone defect repair,especially a 2 1 mixture of
12、A-PF and Bio-Oss bone,showing better osteogenic effects,which can improve the healing ability of implant bone Key words Modified platelet-rich fibrin;Bio-Oss;Dental implants;Mandible;Bone defect;epair;Bone volumefraction;Osteogenesis牙齿可因龋病、外伤、炎症、肿瘤等造成缺失,临床中对缺牙患者多采用活动义齿、固定义齿、种植义齿进行修复,也是修复牙缺损、缺失的主要方式1
13、。近年来,随着医学科技的快速发展,口腔疾病的美学修复技术也逐渐发展起来,而种植牙是牙缺失美学和功能恢复的一种先进技术2。而种植体周围骨缺损的修复成为近年来亟待解决的问题,骨引导再生技术是解决这一问题的主要方式,越来越多的骨替代材料应用于骨引导再生技术中3-4。改良型富血小板纤维蛋白(A-PF)是一种在 PF 基础上改良的衍生物,其含有多种生长因子和纤维蛋白,能有效促进软硬组织愈合和生长5。Bio-Oss 骨粉与人工骨粉成分相似,具有骨引导性、多孔性,在骨引导再生技术中具有良好的应用价值6。基于此,本研究通过构建下颌骨缺损动物模型,探讨 A-PF 与Bio-Oss 骨粉以不同比例混合用于种植体周
14、围骨缺损的成骨效果。现报告如下。1材料与方法1.1实验动物12 只成年雄性新西兰大白兔购于武汉万千佳兴生物公司 许可证号 scxk(鄂)2011-0011,3 月龄,体质量 2 2 2 5 kg。大白兔饲养在本实验室,自然昼夜光照条件,单笼、全价颗粒饲料喂养,适应本实验室环境 1 周,观察无疾病后开始实验。实验过程中动物处置均符合医学伦理标准。1.2A-PF 制备术前大白兔禁饮禁食12 h,在双侧耳处剃毛,常规消毒,用一次性采血针在一侧耳中动脉处采血8 mL,分 2 管置于无菌采血管内,2 000 r/min 离心24 min,室温静置 5 min 可见采血管血液分为 3 层,顶部为血浆层,中
15、部为纤维蛋白凝块,底部为红细胞层。用镊子取出中部纤维蛋白凝块,放置于干净纱布,除去多余红细胞,轻轻按压排出部分血清,得到A-PF,用剪刀剪碎备用。1.3兔下颌骨缺损模型制备采用 1 mL/kg 3%戊巴比妥在另一侧耳缘静脉注射麻醉大白兔,麻醉成功后,建立动物模型,大白兔呈仰卧位,并固定在实验台上,双侧下颌脱毛,露出皮肤,消毒铺巾,用 2%利多卡因局部浸润麻醉。沿右侧下颌骨下缘切开至骨膜,切口约为 3 cm,切口后缘不超过咬肌附丽处,剥离骨膜,翻瓣至暴露手术区。用 5 mm 平台钻在下颌骨下缘制备直径为5 mm、深 2 mm 的圆柱形骨缺损共 3 个,备洞过程中用生理盐水降温,以免骨灼伤;注意保
16、护颏神经。3个骨缺损彼此间隔 2 mm,由近中至远中依次为 A组、B 组、C 组;另一侧下颌骨制备相同 3 个骨缺损,由远中至近中依次为 D 组、E 组、F 组。1.4种植体植入6 个骨缺损处均植入 2 0 mm 7 0 mm 钛螺纹钉,保证螺帽顶部与正常骨平齐,注意避开兔下颌切牙牙根。右侧骨缺损处分别植入 A-PF 与 Bio-Oss2 1 混合物(A 组)、1 1 混合物(B 组)、1 2 混合物(C 组),总质量为0 02 g;左侧骨缺损处作为空白对照(D 组)、单独植入 0 02 g A-PF(E 组)、单独植入 0 02 g Bio-Oss(F 组)。将不同填充物填入骨缺损区域,并压
17、紧,保证相邻骨缺损填充物间无接触。填充物填入后复位组织瓣,对位缝合,术后 3 d连续注射青霉素钠 80 U 防止感染,1/d。12 只大白兔分别在术后 4、8、12 周处死,每组 4 只。1.5大体观察术后观察 12 只大白兔饮食、切口愈合情况,并观察螺纹钉有无松动、脱落,以及植入材料生长情况等。1.6影像学观察处死大白兔后,取出完整兔颅顶骨,分离缺损区周围 10 mm 骨,用生理盐水冲洗,采用 4%甲醛固定24 72 h,采用 Micro CT 仪器扫描检查,并分析计算各组骨体积分数。1.7HE 染色标本固定 24 72 h 后,脱水包埋,制成 5 m 切片,切片先后加入二甲苯、进行脱蜡,使
18、用苏木精染色 10 min,直至出现紫红色,水洗;用 1%盐酸分色处理 30 s,水洗,在弱碱水溶液观察到蓝色,水洗;进行伊红染色,用乙醇脱水处理,二甲苯、透明,在载玻片上滴中性树胶,盖好盖玻片,自然晾干。低倍镜下观察切片情况,并计算骨形成率。1.8统计学方法采用 SPSS 24 0 统计学软件处理数据,计量资料以均数 标准差(x s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,组内比较采用 LSD-t 检验。=0 05为检验水准。7312结果2.1实验动物情况12 只大白兔造模后全部存活,中途无丢失。手术切口均无感染,术后当天精神较差,无法进食,活动较少;术后第 1 天开始少量进食,3 d 后逐渐恢
19、复正常饮食和活动,无感染;1 周后切口已初期愈合,缝线自然脱落。2.2大体观察从离体标本观察到,切口愈合良好,螺纹钉固定良好,无脱落,种植体周围未见骨缺损或未吸收骨粉。术后 4 周,D 组螺纹钉可见纤维结缔组织围绕,无骨质覆盖;A 组、E 组表面骨质较厚,完全覆盖螺纹钉,其余 3 组表面均有不同程度骨质覆盖。术后8、12 周,随着时间推移,相同部位种植体表面骨质覆盖越厚。2.3影像学观察各组观察到螺纹钉周围存在不同程度透射阴影,且螺纹钉帽被不同程度骨组织覆盖。术后 4 周D 组骨缺损处螺纹钉周围骨密度较低,且与正常骨质界限清晰,其余 5 组螺纹钉周围也有透射阴影,且与正常骨质界限不清。术后 8
20、 周各组骨缺损区螺纹钉周围骨密度明显增加,且 A-PF 浓度越高,缺损区骨密度越高,但 D 组、F 组骨密度相对较低,与正常骨质边界不清。术后 12 周不同 A-PF 浓度骨密度较术后 8 周增高,D 组有低密度阴影。术后 4、8、12 周骨体积分数 A 组 E 组 B 组 C 组 F 组 D 组,差异有统计学意义(P 0.05)。见表 1。2.4组织学观察HE 染色结果显示,术后 4 周,A 组可见大量纤维结缔组织、骨组织,纤维组织间有新生血管、骨基质形成,骨小梁钙化良好;E 组观察到有少量板状骨,骨小梁丰富;B、C 组间质较疏松,有纤维组织形成;D 组间质呈大片网状,新骨形成面积较小,单层
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