DB36∕T 882-2015 水稻二化螟抗药性检测技术规范-饲料混毒法.pdf
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1、ICS 67.060 B22 备案号:48486-2016 DB36 江西省地方标准 DB 36/ T 8822015 水稻二化螟抗药性检测技术规范-饲料混毒法 Technological rules for monitoring insecticide resistance in striped stem borer,Chilo suppressalis Walker,using artificial diet incorporation bioassay method 2015 - 12 - 21 发布 2016 - 03 - 15 实施江西省质量技术监督局 发 布 DB36/ T 882
2、2015 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 术语和定义 . 1 3 试剂与材料 . 1 4 主要仪器设备 . 1 5 试验步骤 . 1 6 数据统计与分析 . 3 7 抗性水平评估 . 3 8 检测报告编写 . 4 附录 A(资料性附录) 部分杀虫剂对水稻二化螟的敏感毒力基线 . 5 附录 B(资料性附录) 二化螟人工饲料的组份及其配比. 6 DB36/ T 8822015 II 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由江西省农业厅提出并归口。 本标准起草单位:江西省农业科学院植物保护研究所,江西省修水县植保植检站,江西省余江县植保植检站。 本标准
3、主要起草人:黄水金,陈琼,秦文婧,张华满,徐样庚。 DB36/ T 8822015 1 水稻二化螟抗药性检测技术规范-饲料混毒法 1 范围 本标准规定了饲料混毒法检测二化螟(Chilo suppressalis (Walker))抗药性的方法。 本标准适用于杀虫剂对二化螟室内毒力测定和抗药性评估。 2 术语和定义 2.1 抗药性 Resistence 昆虫忍耐杀死正常种群大部分个体的药量的能力,并在其种群中发展起来的能力。 2.2 敏感基线 Susceptibility baseline 在某种农药使用之前,该种药剂对昆虫敏感品系的毒力回归方程及LD50或LC50。 2.3 饲料混毒法Arti
4、ficial diet incorporation bioassay method 昆虫幼虫接触、取食混药的人工饲料而中毒死亡的毒力测定方法。 3 试剂与材料 3.1 供试虫源 4龄初期二化螟幼虫。 3.2 试剂与药剂 试剂为分析纯,药剂为农药原药或纯品。 4 主要仪器设备 电子天平(感量0.0001g),手持搅拌机,料理机,毛笔,眼科镊,移液器,平底玻璃管(直径3cm,高5cm),1000ml烧杯(直径13cm,高15cm),恒温培养箱、恒温养虫室或人工气候箱,高温高压湿热灭菌锅,微波炉。 5 试验步骤 5.1 卵块采集、管理及混毒饲料配制 DB36/ T 8822015 2 5.1.1 卵
5、块采集 卵块从水稻田直接采集,或从田间采集二化螟成虫于室内产卵。 5.1.2 卵块孵化及幼虫管理 在玻璃培养皿(直径9cm)中放入滤纸34片,并加入适量灭菌蒸馏水保湿,将卵块放入其中,保湿培养至卵块黑头时,将黑头卵块放入装有饲料的玻璃管中,每个玻璃管中放入12个卵块,塞上棉花塞。待幼虫从卵块中孵出并爬至饲料上后,将卵块残余部分从玻璃管中挑出来,然后将幼虫放置于温度281,相对湿度60%70%,光照比(L:D)16:8hrs(下光照)的光照培养箱中培养至4龄初期。 5.1.3 药剂配制 用电子天平或移液器称量若干原药,加入水或有机溶剂(如丙酮、二甲基甲酰胺等)溶解配制成药剂母液,然后按所需浓度的
6、量用移液器加入到已装有30ml含10(m/v) Triton-X 100(或吐温80)灭菌蒸馏水的烧杯(直径13cm,高15cm)中,充分混匀后备用。 5.1.4 人工饲料配制方法 人工饲料配方进行配制(见附录B)。具体配制方法如下: a) 将各组分按配比称重,备用; b) 将新鲜的茭白切碎, 加入水, 放入料理机中磨碎并匀浆, 匀浆后将其倒入盛有大豆粉、 酵母粉、干酪素和蔗糖的灭菌桶中,将上述 5 种组分充分搅拌均匀后,置于高压蒸汽灭菌锅中,于 125下灭菌 30min,灭菌完毕后,取出备用; c) 琼脂中加入纯净水,用微波炉加热并煮至完全溶解后,将其倒入步骤(b)中已灭菌好的饲料中,用手持
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