QB∕T 5715-2022 发酵液中衣康酸的测定 高效液相色谱法.pdf
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1、ICS 67. 180. 20CCS X69QB中华人民共和国轻工行业标准QB/T 5715-2022发酵液中衣康酸的测定 高效液相色谱法Determination of itaconic acid in fermentation liquorHigh performance liquidchromatography method2022-04-08 发布2022-10-01 实施中华人民共和国工业和信息化部发布QB/T 5715-2022_刖 s本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。本文件由中国轻工业联合会提出。本文件由全国食品
2、工业标准化技术委员会(SAC/TC64)归口。本文件起草单位:安徽省食品药品检验研究院、青岛琅珊台集团股份有限公司、中国生物发酵产业 协会、山东省食品发酵工业研究院、山东寿光巨能金玉米开发有限公司、武汉远大弘元股份有限公司、 天津科技大学。本文件主要起草人:李建军、何俊、李悦明、冯志合、田延军、李静、徐建春、吴泽华、李霞、 王晋、张居舟、张文文、程坚、张成林。本文件为首次发布。IQB/T 5715-2022发酵液中衣康酸的测定高效液相色谱法1范围本文件描述了发酵液中衣康酸的高效液相色谱测定方法。本文件适用于衣康酸发酵液中衣康酸的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本
3、文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。第一法高效液相色谱紫外检测器法4方法提要试样中的衣康酸经甲醇溶液提取或直接稀释,经强阴离子固相萃取柱净化,利用反相液相色谱柱分 离,用紫外检测器检测,外标法定量。5试剂和材料水为符合GB/T 6682规定的一级水。5. 1试剂5. 1. 1甲醇:色谱纯。5. 1.2磷酸:优级纯。5.2试剂配制5 . 2. 1甲醇溶液(1+1,体积比):量取250mL甲醇(5.1.
4、1)至500mL容量瓶,用水定容,混匀。5 .2.2 2%磷酸甲醇溶液:量取2mL磷酸(5.1.2)至100mL容量瓶,用甲醇(5.1.1)定容,混匀。5. 2.3 0.1%磷酸溶液:准确吸取1mL磷酸(5.1.2),转移入1 000 mL容量瓶,用水定容,混匀。1QB/T 5715-20225.2.4 0.1%磷酸甲醇溶液(87+13,体积比):量取0.1%磷酸溶液(5.2.3) 870 mL至1 000 mL容量 瓶,用甲醇(5.1.1)定容,混匀。5.3 标准品衣康酸标准品(CAS: 97-65-4, C5H6。4):纯度不小于99%,或经国家认证并授予标准物质证书 的标准物质。5.4
5、标准溶液配制提示:在衣康酸配制时注意安全防护。5.4 . 1衣康酸标准储备液(2.0mg/mL):精密称取20 mg (精确至0.1 mg)的衣康酸标准品(5.3), 用甲醇(5.1.1)溶解并定容至10 mL,此溶液衣康酸含量为2.0 mg/mL,于4 y下保存,有效期6个月。 5. 4.2衣康酸标准工作液:分别量取适量衣康酸标准储备液(5.4.1),用0.1%磷酸甲醇溶液(5.2.4) 配制成 5 mg/L、10mg/L、20 mg/L、50 mg/L、100 mg/L 200 mg/L 的标准工作液,于 4 C保存,现配 现用。5.5 材料5. 5. 1强阴离子固相萃取小柱(SAX) :
6、 1000mg/6mL,或相当者,使用前依次用4mL甲醇(5.1.1)、 4 mL水、4 mL甲醇溶液(5.2.1)活化。5. 5. 2 0.45 pm滤膜,有机系。6仪器和设备6. 1高效液相色谱仪:配紫外检测器。6. 2 电子天平:感量0.1 mg和0.01 g。6.3 涡旋振荡器。6.4 氮吹仪。6.5 固相萃取装置。6. 6离心机:转速不低于6 000 r/min。6.7其他实验室常用仪器。7分析步骤7. 1试液制备量取500 mL发酵液搅匀,取适量体积经6 000 r/min离心5 min,称取上清液1.0 g (精确至0.01 g) 于100mL容量瓶(可根据实际样品中衣康酸的含量
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