DB65∕T 3915-2016 草莓脱毒种苗病毒检测技术规程(新疆维吾尔自治区).pdf
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1、ICS 65.020 B 16 DB65 新疆维吾尔自治区地方标准DB 65/ T 3915-2016 草莓脱毒种苗病毒检测技术规程Technical specification for virus-free plantlets virus detecting of Strawberry 2016一08-04发布2016一09一04实施新疆维吾尔自治区质量技术监督局发布D865/ T 3915一一2016目IJ1=1 本标准按照GB/T1. 1-2009 标准化工作导则第l部分:标准的结构和编写给出的规则起草。本标准由新疆生产建设兵团第十二师农业科学研究所提出。本标准由新疆维吾尔自治区农业厅归
2、口。本标准起草单位:新疆生产建设兵团第十二师农业科学研究所、新疆维吾尔自治区标准化研究院。本标准主要起草人:史芳芳、汪泉、李向泉、郭艳、陈晓坤、胡晓憨、哈里旦、向征。I 草莓脱毒种苗病毒检测技术规程1 范围本标准规定了草莓脱毒种苗病毒检测对象、抽样方法、检测方法和质量要求。本标准适用于脱毒草莓母本株、组培苗及脱毒草莓种茵的病毒检测。2 规范性引用文件0865/ T 3915-2016 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单适用于本文件。WS 233-2002 微生物和生物医学实验室生物安全通
3、用准则NY/T 406-2000 脱毒草莓种苗病毒检测技术规程DB33/T 594. 1一2005草莓脱毒种苗第1部分:脱毒种苗3 术语和定义下列定义和术语适用于本文件。3.1 脱毒茵in-vitrovirus free plantlet 经组织培养脱毒处理或直接引进,经检测后确认不携带本规程规定检测病毒的种苗。3.2 脱毒组培瓶苗virus一freep I ant I et i n v i tr。通过植物组织培养方法获得的不携带本规程规定检测病毒的组织培养瓶苗。3.3 脱毒草莓母本株virus-freestrawberry parent strain 由脱毒组培苗直接繁育并且不带本规程的检测
4、对象、用于提供草莓匍匍茎繁殖苗的母株。3.4 脱毒草莓种茵virus-freestrawberry seedl ing 由脱毒草莓母本株繁育并符合本规程规定合格标准的种苗。3.5 病毒病株允许率theal lowing rate of virus infection OB65/ T 3915一一2016脱毒草莓母本株及种苗繁殖田中病毒病株的允许比率。4 检测对象4. 1 草莓斑驳病毒(SMoV)未归属病毒,是球状病毒颗粒,直径为25nrn -30 nr日,在叶片的表皮和韧皮部的细胞质内有晶状球形颗粒。4. 2 草莓轻型黄边病毒(SMYEV)马铃薯X病毒属CPotexvirus),为线状病毒颗粒
5、,14 nrnX500 nrn,分布在细胞质内。4.3 草莓皱缩病毒(SCV)弹状病毒科CRhabdovirida的细胞质弹状病毒属CCytorhabdovirus) ,为弹状病毒颗粒。在植物组织中,成熟病毒颗粒直径为63nrn,-.,75 nrn,粒体长度为190nrn,-.,380 nrn,在模株表皮、导管和筛管附近的薄壁组织细胞内均有分布。4.4 草莓镶脉病毒(SVBV)花椰菜花叶病毒科CCaulimoviridae)的花椰菜花叶病毒属(Caulimovirus),为球形病毒颗粒,直径40nrn-50 nrno主要在细胞质内复制,存在于叶片表皮与木质部相连的导管和细胞质内。5 抽样方法5
6、. 1 脱毒苗抽样5. 1. 1 脱毒核心材料:每株应检测。5.1.2 扩繁组培茵:随机抽取1%,-.,2%的扩繁基础苗检测。5.2 出圃种苗抽样出圃种苗抽样应符合NY/T406-2000中5.3规定。6 检测方法6. 1 使用试剂符合WS233-2002的规定。6.2 方法反转录一聚合酶链式反应CRT-PCR)检测法(见附录A),检验结果记录见附录B。7 质量要求7. 1 脱毒组培瓶苗质量要求符合DB33/T594.1-2005的规定。凡反转录一聚合酶链式反应(RT一PCR)检测呈阳性反应者为带毒种苗。2 OB65/ T 3915一-20167.2 各类种苗病株病毒允许率a) 脱毒草莓母本株
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