免疫学检测培训-1期.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段，由于其可以利用同位素、酶、化学发光物质等对检测信号进行放大和显示，因此常被用于检测蛋白质、激素等微量物质。,我国免疫学检测的发展主要分为以下几个阶段,化学发光免疫检测（,CLIA,）,酶联免疫学检测（,ELISA,）,放射免疫学检测（,RIA,）,70,年代,80,年代,90,年代,21,世纪,一、免疫学检测,二、中国免疫诊断现状,1,、放射免疫法,中国 国际（欧美为主）,兴起于,20,世纪,70,年代，现仍普遍使用于县级以上医院,产品处于衰退期,厂商试剂与仪器共同开发,试剂基本系列化,兴起于,20,世纪,60,年代，现已基本退出临床应用,产品生命周期已终结,厂商试剂与仪器共同开发,试剂基本系列化,2,、酶联免疫法,中国 国际（欧美为主）,兴起于,20,世纪,80,年代，现仍普遍使用于各级临床机构，为我国临床免疫诊断的基本方法,产品处于成熟期,厂商试剂与仪器共同开发,试剂尚未系列化,兴起于,20,世纪,70,年代，现仍在临床应用,产品处于衰退期,厂商试剂与仪器共同开发,试剂基本系列化,酶联免疫吸附剂测定法（,ELISA,），是以免疫学为基础，将抗原抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。,中心就是让抗体与,酶复合物,结合，然后通过显色来检测,附,：,酶联免疫,根据检测样本与检测目的的不同可以设计出不同类型的,ELISA,方法,1,、双抗体夹心法,2,、双位点一步法,3,、竞争法,4,、间接法,应用于临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,化学发光,免疫测定（,CLIA,）亦称化学发光标记免疫测定，是用,化学发光剂,直接标记,抗原,或,抗体,（化学发光剂标记物），与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应，通过磁场把结合状态（沉淀部分）和游离状态的化学发光剂标记物分离开来，然后加入发光,促进剂,进行发光反应，通过对,发光强度,的检测进行定量或定性检测。,附,：,化学发光免疫,化学发光免疫分析法的优点,1,、灵敏度高,2,、光信号持续时间长,3,、分析方法简便快速,4,、结果稳定、误差小,5,、安全性好及使用期长,附,降钙素原,PCT,与,C-,反应蛋白,CRP,的关联与比较,降钙素原（,PCT,）是血清降钙素（,CT,）的前肽物质，是由,116,个氨基酸组成的糖蛋白质，在正常生理情况下，由甲状腺,C,细胞分泌产生。,健康人血液中的,PCT,浓度非常低，小于,0.05ng/ml,。在炎症刺激特别是细菌感染或脓毒血症状态下，机体各个组织、多种细胞类型均可产生,PCT,并释放进入血液循环系统。,CRP,是一种能和肺炎链球菌的荚膜,C,多糖结合，由,5,个相同的亚单位（,23KD,）以非共价键聚集形成的环状五聚体蛋白，分子量为,115 KD,，半衰期为,19h,，多由白细胞介素,-6,（,IL-6,）等炎性分子刺激肝脏细胞合成。,正常人血清中,CRP,含量极微。,适应症与临床意义,PCT,CRP,细菌感染与病毒感染的鉴别诊断。,帮助脓毒症的早期诊断,评估疾病的严重程度及预后。,抗生素治疗效果的评估,指导临床抗生素使用。,手术和严重创伤患者细菌感染并发症监测。,胰腺炎鉴别诊断。,鉴别细菌感染与病毒感染,监控感病情变化及术后感染,预测心血管病危险,用于疾病的随访和监控疗效,参考值,PCT,CRP,健康人的血浆,PCT,质量、浓度低于,0.05ng/ml,。老年人、慢性疾病患者、以及不足,10,的健康人血浆,PCT,质量浓度高于,0.05ng/ml,，最高可达,0.1ng/ml,，但一般不超过,0.3ng/ml,。脓毒症患者,PCT,的诊断界值为超过,0.5ng/ml,，严重脓毒症和脓毒性休克患者,PCT,质量浓度波动在,5,500ng/ml,之间。极少数严重感染患者血浆,PCT,水平超过,1000ng/ml,。,感染性疾病：儿童和成年人,90%,3mg/L,，,99%,10mg/L,，,10-99 mg/L,提示局灶性或浅表性感染，,100mg/L,提示败血症或侵袭性感染等严重感染。敏感性达,100%,。,新生儿细菌性感染：一般新生儿血清,CRP,水平,2mg/L,，大于此值即与细菌感染的严重程度有关。,用于心血管疾病危险性评估时：一般认为，,hs-CRP,1.0mg/L,为低危险性；,1.0,3.0mg/L,为中度危险性；,P,3 mg/L,为高度危险性。,据研究，,PCT,与,CRP,临床符合性比较结果显示：,PCT,灵敏度,=85,；特异度,=86.7,；总符合率,=85.7,。,CRP,灵敏度,=9O,；特异度,=67,；总符合率,=8O,。数据显示,PCT,和,CRP,在疾病灵敏度上差异不明显，但在特异性上,PCT,的特异性明显高于,CRP,。,CRP,是一种急性反应蛋白，多种因素均可引起其升高，包括在心血管疾病中也会导致其升高，所以临床单凭,CRP,一项标志物，大大限制了辅助诊断作用。临床也需要更敏感、更特异的标志物来提高对重症感染和败血症的诊治。,PCT,作为新的感染标志物，水平不受非感染因素影响。因此,PCT,对细菌感染的诊断价值明显高于,WBC,计数及,CRP,，是一项灵敏度好，特异性高的具有鉴别诊断意义的新指标。鉴别细菌性感染和非细菌性感染的能力明显的优于,CRP,，而且,PCT,还可以辅助临床诊断重症感染和败血症的需求。,PCT,对细菌感染发生的局部感染或全身感染在临床指导上比,CRP,更具意义，,CRP,目前对全身感染有一定的敏感性，在针对局部细微感染其作用是受限制的。,PCT,比,CRP,在抗生素治疗效果上更具有的指导性，,PCT,可避免抗生素乱用。,项目比较,