微生物的计数.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,微生物计数,第1页,微生物计数,血球计数法,平板活菌计数法,计繁殖数法只适宜于单细胞状态微生,物,或丝状微生物产生孢子,第2页,血球计数法,一、试验原理,血球计数器是一特制厚载玻片，上面,刻有一定面积方格，将盖玻片盖上后，由,于二者之间存在着距离使之形成一定容积,小室。滴入待测样品后，使样品均匀充满小,室，在显微镜下计算小室内菌数，换算成,单位体积样品中所含菌数。,第3页,血球计数法,二、血球计数器结构,盖玻片,0.1mm,1/400mm,2,计数室体积,25*16,1mm,1mm,=(1,1,0.1)mm,3,=10,-4,cm,3,第4页,血球计数板,第5页,血球计数法,三、血球计数法步骤,1、取待测啤酒酵母菌液，摇匀。并做适,当稀释（以每个中格内20左右为宜）。,2、取洁净干燥血球计数器，盖上盖玻,片，用滴管吸收少许菌液沿盖玻片边缘滴入,一小滴，菌液自行渗透计数室，静止片刻，,使菌液均匀充满每小室。,第6页,血球计数法,示范动作,第7页,血球计数法,3、先在低倍镜下找到计数室，注意光线不,能太亮，再转到高倍镜下，取5个中格进行,计数（每个中格取4个小格）。,计数时注意调整焦距，使不一样焦距菌,体都计入，在线上菌，数上不数下，数,左不数右。,第8页,血球计数法,4、菌液浓度计算,菌液浓度（菌数/ml)=N2510,4,稀释倍数,其中N为每中格内菌数平均值。,第9页,平板活菌计数法,一、试验原理,微生物在固体培养基上形成单菌落，,普通认为是由一个细胞繁殖而来，及一个菌,落代表一个细胞。计数时，将待测菌样做一,系列稀释，再取一定稀释度一定量稀释液,接种到平板上，使其均匀分布。经培养后，,生长成单菌落，由菌落数推算出单位体积菌,液活菌数。,第10页,平板活菌计数法,二、平板活菌技术步骤,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml,菌悬液,10,-1,10,-2,10,-3,10,-4,10,-5,10,-6,每皿约倒入15ml,0.2ml,0.2ml,0.2ml,沙保培养基,第11页,平板活菌计数法,待凝后倒置于28恒温培养48h后计数。,（选择菌落数在50100个左右平板计数）,菌液浓度计算,菌液浓度（菌数/ml)=菌落数稀释倍数5,注：只数浓度适当两个平板取平均值,第12页,2.,3.,4.,5.,注意事项,1.,过程无菌操作,稀释分离法中熔化后培养基倒平板前温度控制,稀释法中用吸管取试管中液体次序从稀到浓,取样前注意摇匀待测菌液,取样时都要无菌操作。注意取菌液时移液管不要,碰到火焰，以免烧死菌体,6.血球计数器要洁净干燥，滴入菌液时在盖玻片与,载玻片间不能有气泡,7.血球计数时显微镜光线不宜太亮,第13页,思索题,.从两种方法计数得出菌液浓度是否一,致？分析误差产生原因，由此比较一下,二者优缺点及 各自适用范围。,.平板活菌计数中，为何选择生长有50,100个菌 落平板？,第14页,