卫生与微生物基础知识培训.ppt

*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,一、第二十九条,所有人员,都应当接受,卫生要求,的培训，企业应当建立人员卫生操作规程，最大限度地降低人员对医疗器械生产造成污染的风险。,GMP!,药品生产质量管理规范,2010,年版,2025/10/21 周二,1,一、第二十条,凡在洁净区工作的人员,（包括,清洁工和设备维修工,）应当定期培训，使无菌医疗器械的操作符合要求。培训的内容应当包括,卫生和微生物方面的基础知识,。未受培训的外部人员（如外部施工人员或维修人员）在生产期间需进入洁净区时，应当对他们进行特别详,细的指导和监督,GMP!,药品生产质量管理规范,2010,年版 无菌附录,2025/10/21 周二,2,主要内容,一、人员卫生,二、微生物基础知识,2025/10/21 周二,3,法规要求,第三十条人员卫生操作规程应当包括与,健康,、,卫生习惯,及,人员着装,相关的内容。生产区和质量控制区的人员应当正确理解相关的人员卫生操作规程。企业应当采取措施确保人员卫生操作规程的执行。,一、人员卫生,2025/10/21 周二,4,法规要求,第三十一条企业应当对人员健康进行管理，并,建立健康档案,。直接接触医疗器械的生产人员上岗前应当接受健康检查，以后,每年至少进行一次,健康检查,一、人员卫生,2025/10/21 周二,5,法规要求,第三十二条企业应当采取适当措施，避免体表有,伤口,、,患有传染病,或,其他可能污染医疗器械疾病,的人员从事直接接触,医疗器械的生产,。,一、人员卫生,2025/10/21 周二,6,法规要求,其他可能污染医疗器械疾病：,皮癣、真菌感染的皮肤病等,一、人员卫生,2025/10/21 周二,8,法规要求,第三十三条,参观人员,和,未经培训的人员,不得进入,生产区,和,质量控制区,，,特殊情况确需进入的，应当事先对个人卫生、更衣等事项进行指导。,一、人员卫生,2025/10/21 周二,9,法规要求,第三十五条进入洁净生产区的人员,不得化妆和佩带饰物,。,一、人员卫生,2025/10/21 周二,10,摘下个人饰物：耳环、手表、戒指、项链等 不得留长指甲,提醒：,进入洁净区人员不得化妆，否则,需清洗,去除化妆品,2025/10/21 周二,11,一、人员卫生,人体是一个永不休止的污染媒介。,人是药厂中最不清洁的成份，是最大的污染源。,我体检过了,没问题,!,2025/10/21 周二,12,人类是第一的,(,主要,),污染源。,人们每,24,小时就会脱落皮肤表面上最外层的皮细胞。这等于每天高达,10,9,（,1000,，,000,，,000,）,=10,亿,个细胞的数量。,2025/10/21 周二,13,人带来的污染来源,人的头发和皮肤,液滴,衣着,化妆品和珠宝手饰,人的操作,（生产过程中人员不当的操作所引,起的混杂和误差,）,2025/10/21 周二,14,人是最大的污染源,人体内外表面,广泛存在微生物,人体携带的微生物根据卫生情况不同因人而异,2025/10/21 周二,15,未洗的手,清水漂洗的手,2025/10/21 周二,16,洗净的手 洗净的手,(,用皂液,)(,用消毒剂,),2025/10/21 周二,17,难以觉察的,口腔微滴（说话、喷嚏）,人是最大的污染源,2025/10/21 周二,18,坐着不动能产生10,万个颗粒,走能产生,500,万个颗粒,跑能产生,1500,万个颗粒,人是最大的污染源,2025/10/21 周二,19,人是第一的,(,主要,),污染源。,怎么办？,2025/10/21 周二,20,根据污染源查找解决方法,2025/10/21 周二,21,工作服及其质量应当,与,生产操作的要求及操作区的,洁净度级别相适应,，其式样和穿着方式应当,能,够满足,-,保护产品,和,人员,的要求。,法规要求：附录第二十四条,2025/10/21 周二,22,人是第一的,(,主要,),污染源。,清 洗、包 裹,根据不同洁净区要求，穿戴不同衣服,2025/10/21 周二,23,人是第一的,(,主要,),污染源。,包裹物件包括：,帽子、口罩、眼罩、无菌服、鞋子,/,鞋套、手套,2025/10/21 周二,24,解决方法,人的头发和皮肤,清洗、包裹,2025/10/21 周二,25,第一步：,用清水润湿双手及手腕以上,10,厘米,洗 手,2025/10/21 周二,26,第二步：,均匀涂,上洗手,液,洗 手,2025/10/21 周二,27,第三步：,掌心相对，手,指并拢,相互摩擦,洗 手,2025/10/21 周二,28,第四步：,手心对手背沿指缝相互摩擦,交换进行,洗 手,2025/10/21 周二,29,第五步：,掌心相对，双手交叉，沿指缝相互摩擦,洗 手,2025/10/21 周二,30,第六步：,弯曲各手,指关节，,在另一手,掌旋转搓,擦，交换,进行,洗 手,2025/10/21 周二,31,第七步：,一手握另,一手大拇,指旋转搓,擦，交换,进行,洗 手,2025/10/21 周二,32,第八步：,搓洗手,腕，交换,进行。,洗 手,2025/10/21 周二,33,第九步：,将手及手腕用水冲洗干净，最后才可以用干净的手将干净的水龙头关掉。,洗 手,2025/10/21 周二,34,第十步：,然后在烘手器下吹干,洗 手,2025/10/21 周二,35,洗手手的细菌对照实验,2025/10/21 周二,36,未洗的手,漂洗的手,(,只用清水,),2025/10/21 周二,37,洗净的手 洗净的手,(,用皂液,)(,用消毒剂,),2025/10/21 周二,38,从上到下,需要将头发、胡须等相关部位遮盖、包裹。穿上合适的鞋子和,/,或鞋套。,确保包裹效果。,避免带入洁净区外的污染物,更洁净衣,2025/10/21 周二,39,万级更衣：,连体服须将鞋套套好，,戴上手套，手套将袖口包裹,更洁净衣,2025/10/21 周二,40,法规要求：附录第二十四条,正确穿戴洁净服，必须,包盖全部头发、胡须及脚部,，并能阻留人体脱落物；口罩要罩住口鼻；洁净鞋应能遮盖住全脚。并定期按规定清洗。离开洁净室，必须脱掉洁净服装。,2025/10/21 周二,41,更衣,头发应完全包在帽子内,YES,NO,NO,2025/10/21 周二,42,洁净区更衣,不能配戴手表、首饰,2025/10/21 周二,43,定时或在任何关键操作前，应消毒手套,2025/10/21 周二,44,填写批记录后，手套应消毒,2025/10/21 周二,45,主要内容,一、人员卫生,二、微生物基础知识,2025/10/21 周二,46,微生物的概念,是所有形体微小，单细胞或个体结构较为简单的多细胞，甚至没有细胞结构的低等生物的通称。,肉眼不能直接观察到微生物，必须经光镜或电镜放大几百倍，乃至几万倍方能看到。,2025/10/21 周二,47,微生物五大共性,体积小，面积大,；,吸收多，转化快；,生长旺，繁殖快；,适应强，易变异；,分布广，种类多；,2025/10/21 周二,48,微生物的分类,微生物类群十分庞杂，主要包括,细菌,、,放线菌,、,真菌（霉菌、酵母菌）、,立克次体、螺旋体、枝原体、衣原体与,病毒,等，还包括显微藻类和原生动物。,2025/10/21 周二,49,四、微生物的种类,微生物根据其不同的进化水平和性状上的明显差别可分为原核微生物、真核微生物和非细胞微生物三大类群。,原核微生物：细菌、放线菌、蓝细菌、立克次氏体、支原体、衣原体、螺旋体、蛭弧菌等,真核微生物：霉菌、酵母菌等,非细胞类微生物：病毒,个体微小，可通过细菌滤器,等,2025/10/21 周二,50,细菌的繁殖,(1),充足的营养物质,（碳源、氮源、无机盐、水）,(2),适宜的酸碱度,(3),合适的温度,(4),必要的气体环境（,CO,2,和氧气,）,生长繁殖的条件,2025/10/21 周二,51,繁殖最适条件对比,微生物,酸碱度,温度,细菌,pH7.0,7.5,37,真菌,(,霉菌、酵母菌）,pH4.5,6.0,22,28,2025/10/21 周二,52,微生物的存在,水,土壤,空气,衣服,地板,海水,油膜,废水,排水口,洗手池,汽油罐,嘴,头发,皮肤,鼻子,肠道,食物,昆虫,动物,南极,(250,0,C),2025/10/21 周二,53,微生物的益处,啤酒，葡萄酒的生产,面包酵母的生产,奶酪的生产,醋的生产,酸奶的生产,维生素的生产,类固醇的生产,抗菌素、干扰素的生产,分解废物，循环利用,帮助肠道中的食物消化,除虫,2025/10/21 周二,54,微生物的害处,导致伤口感染,导致胃肠不适,引起感冒，咳嗽,尿道感染,败血症,癌症,脑脊膜炎,破伤风,艾滋病,2025/10/21 周二,55,微生物的危害,微生物中也有一部分能引起人及动、植物,发生病害,，这些具有致病性的微生物，称为,病原微生物,。,从医疗器械生产的卫生学而言，,微生物,对医疗器械的原料、生产环境和成品的,污染,是造成生产失败、可以导致产品腐败变质、成品,不合格的重要因素,。,2025/10/21 周二,56,在医疗器械生产过程中，根据,GMP,中洁净度级别要求以及产品质量标准要求，对物料、产品、生产环境需进行控制的污染（有害）微生物主要为,细菌和真菌（霉菌、酵母菌）,。,医疗器械生产需控制的微生物,2025/10/21 周二,57,污染,:,污染就是指当某物与不洁净的或腐坏物接触或混合在一起使该物变的不纯净或不适用时，即受污染。,简单的说当一个产品中存在不需要的物质时，他即受到了污染,2025/10/21 周二,58,污染的形式和载体,:,污染的形式,:,尘埃粒子,微生物,污染的载体,:,空气、水、表面、人。,2025/10/21 周二,59,微生物的污染途径,自身污染：由于患者和员工自身携带微生,物而污染。,接触污染：由于和非无菌的用具、器械或,人的接触而污染。,空气污染：由于空气中所含微生物的沉降、,附着或被吸入而污染。,其他污染：由于其他因素（如昆虫）而污染。,2025/10/21 周二,60,控制微生物的污染途径,有效地阻止室外的污染侵入室内。,迅速有效地排除室内已发生的污染。,控制污染源，减少污染发生量。,2025/10/21 周二,61,医疗器械中微生物污染的特殊性,是能繁殖的活细胞生物。,数量少而分布不均匀。,多数处于受损伤状态。,生存环境的多样性及复杂性。,2025/10/21 周二,62,防止交叉污染,？,有需要,时,要洗手及消毒,尽量减少,直接以,双手接触医疗器械,接触医疗器械,的表面及用具,用,后,清洗,转换产品时,清洗,2025/10/21 周二,63,手的卫生,每只手可携带,40,万个细菌；刚洗过的手，每平方厘米也可检验出,3200,个细菌。,1,10,万个细菌,/,1cm,2,皮肤表面,!,2025/10/21 周二,64,洗手的重要性,:,用流水（如自来水）洗手，能使手上的致病微生物减少,80%,；,用皂液充分洗手，再用自来水冲洗能使致病微生物减少,95%,。,洗手后正确使用消毒剂能使致病微生物减少到,99%,。,2025/10/21 周二,65,更衣,标准更衣程序：,一更：脱衣换鞋洗手,二更：戴帽子,/,戴口罩,/,无菌鞋,/,洁净服,消毒双手 洁净区,.,2025/10/21 周二,66,更衣,着衣种类 测定日期 细菌数,/100CM,上衣内侧 使用五日后,300,外侧 使用五日后,200,裤子内侧 使用五日后,450,外侧 使用五日后,70,帽子内侧 使用五日后,100,外侧 使用五日后,150,口罩内侧 使用一日后,22000,使用一日后,100,袜子内侧 使用一日后,30000,外侧 使用一日后,2800,2025/10/21 周二,67,更衣的目的：,想混进去，没门！,2025/10/21 周二,68,主要的微生物污染源,空气,水,设备,原辅料,人员,2025/10/21 周二,69,主要的微生物污染源,-,空气,洁净度测定包括：,悬浮粒子,微生物,-,浮游菌,-,沉降菌,-,表面微生物,2025/10/21 周二,70,2025/10/21 周二,技术指标,监测项目,100,级,百级,10 000,级,一万级,100000,级,十万级,300000,级,三十万级,监测频次,温度,(,无特殊要求时,)18-28,1,次班,相对湿度，,%,4565,1,次班,换气次数，次,h,20,15,12,1,次月,静压差,Pa,不同级别洁净室（区）及洁净室（区）,与非洁净室（区）之间,5,1,次月,洁净室（区）与室外大气,10,尘埃数,0.5 um,3500,350 000,3500 000,10 500 000,个,m,3,5 um,0,2 000,20 000,60 000,1,次季,浮游菌数，个,m,3,5,100,500,1,次季,沉降菌数，个皿,1,3,10,15,1,次周,2025/10/21 周二,71,主要的微生物污染源,-,水,设计,验证,运行维护,饮用水,纯化水,注射用水,无菌注射用水,自来水,工艺用水,2025/10/21 周二,72,主要的微生物污染源,-,设备,几乎没有细菌不“吃”的东西,设备和器具与医疗器械直接接触,设备和器具的清洗,清洁程序必须经过验证,按清洗周期清洗,清洗和存放设备、器具处应与生产区域洁净等级相同,2025/10/21 周二,73,主要的微生物污染源,-,原辅料,包括厡辅料、内包装材料。,-,厡辅料微生物的限度标准？,-,内包装材料微生物的限度标准？,符合药典或行业标准,厡辅料、内包装材料的贮存：,-,包装严密，不得破损，污染。,-,清洁贮存。,2025/10/21 周二,74,主要的微生物污染源,-,人员,No,Yes,2025/10/21 周二,75,人体散发的尘粒数,:,（万个,/,每分钟）,10 50 100-250,2025/10/21 周二,76,人员不良行为所产生的污染,:,当有如下行为时将相应增加微粒的产生量,:,-,吸烟者的呼吸,500%,喷嚏,2000%,搓手,200%,行走,200%,跺脚,5000%,2025/10/21 周二,77,（三）常用的消毒剂,洁净室（区）常用的消毒剂,甲醛薰蒸（作用机制：阻抑菌细胞核蛋白质合成,),甲醛有挥发性，对眼睛、皮肤有刺激性，引起皮肤硬化或皱褶，不宜做皮肤消毒用。）,0.1%,新洁尔灭溶液,(,作用机制：使蛋白质变性，破坏细胞膜。,),75%,酒精溶液（常用于皮肤消毒。能迅速杀死细菌繁殖体，对一般病毒有一定的消毒作用。）,5%,来苏水,(,甲酚皂,),溶液（,作用机制：损伤细胞膜,）,2025/10/21 周二,78,（四）灭菌的方法,1,、热力灭菌,2,、气体灭菌,3,、辐射灭菌,4,、过滤灭菌,2025/10/21 周二,79,（四）灭菌的方法,1,、热力灭菌：,主要是利用高温的致死作用，使微生物的蛋白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破坏，而导致细胞死亡。,分为干热灭菌与湿热灭菌,2025/10/21 周二,80,（四）灭菌的方法,(1),干热灭菌：灼烧与火焰灭菌、干烤灭菌,灼烧主要用于接种工具灭菌，如接种针、接种环、刀、剪等在火焰上烧灼即可达到彻底灭菌。,火焰灭菌是在无菌操作中，将试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次，利用火焰对管口等进行灭菌，防止管口污染，作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段。,干烤灭菌是利用热辐射及干热空气进行灭菌。,2025/10/21 周二,81,（四）灭菌的方法,(2),湿热灭菌法：通过热蒸汽或沸水使细菌蛋白质变性而杀灭微生物的方法。,包括：煮沸灭菌、流通蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌,煮沸灭菌：加热使水至沸而杀灭细菌的方法。凡不适于高压蒸汽灭菌的物品可常压下在水中煮沸一段时间达到灭菌目的。,流通蒸汽灭菌：常压下，用蒸笼、蒸锅等在,100,灭菌。仅可杀死细菌繁殖体，不能完全杀灭芽孢。,2025/10/21 周二,82,（四）灭菌的方法,高压蒸汽灭菌：通过加压提高蒸汽温度，穿透力强、温度高、灭菌效果最好。是最可靠最适用最广泛的灭菌方法，凡耐高温和潮湿的物品可应用本法灭菌。,注意事项：完全排出高压灭菌器内的冷空气。（冷空气存在时，同一表压下所达到的温度值偏低，不符合规定的要求，灭菌就不彻底。,2025/10/21 周二,83,（四）灭菌的方法,2,、气体灭菌：利用化学消毒剂形成的气体来杀灭微生物。,臭氧杀菌消毒,广泛存在于自然界中，雷雨过后的空气有一种清新的感觉，是因为空中放电产生臭氧，消灭了空气中的微生物，净化了空气。,臭氧具有强烈的杀菌消毒作用。其杀菌消毒原理是：臭氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧和单个氧分子，后者具有很强的活性，对细菌具有很强的氧化作用，臭氧氧化,2025/10/21 周二,84,（四）灭菌的方法,分解了细菌内氧化葡萄糖所必需的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为普通氧分子，不存在任何有毒残留物，故称为无污染消毒剂。不但对各种细菌（包括肝炎病毒、大肠杆菌、绿脓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，且对杀死霉菌也很有效。,2025/10/21 周二,85,（四）灭菌的方法,3,、辐射灭菌,（,1,）电离辐射,:,用引起电离的,X,射线、,射线灭菌。,电离辐射对微生物的致死作用，主要是细胞内生物化学的变化所致。,辐射的医疗器械、食品的安全问题：辐射灭菌用于医疗器械或食品都应经过安全试验，完全有必要进行科学全面的评价，高剂量的辐射更应慎重。,（,2,）电磁波辐射（包括紫外线,波长,190,350nm,、红外线,波长,0.77,1000m,、微波,波长,1,1000mm,）。,2025/10/21 周二,86,（四）灭菌的方法,紫外线灭菌,1,、紫外线辐射的穿透力很弱，因此主要用于无菌室、某些工作区的空气灭菌、物体表面灭菌。,2,、实践工作中在无菌室无菌柜净化工作台工作室及车间安装紫外灯，一般仅起杀死空气中部分微生物的作用，而不能起到完全灭菌的作用。,3,、紫外线消毒方法验证中紫外灯需确认的参数主要有紫外线的波长、紫外线强度、灯管的寿命。,4,、紫外灯消毒的效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关，还需通过验证来确定。,5,、注意事项：紫外线直射对眼、皮肤有损害。紫外线照射过程中产生臭氧，臭氧过多对眼及鼻腔有刺激，产生头晕、胸闷、血压降低，所以无菌室及净化工作台紫外线照射停止后，请稍等片刻，让臭氧消散，方可进行实验操作。,2025/10/21 周二,87,（四）灭菌的方法,4,、过滤灭菌：以物理的方法除去介质中的微生物。常将空气或液体中的微生物及杂质用不同材料制成的薄膜滤器过滤得到无菌、无杂质的空气或液体。,滤过病毒的滤膜孔径为,25,100,nm,；,滤过细菌的滤膜孔径为,0.22,0.45m,。,2025/10/21 周二,88,九、生产环境的空气洁净度监测,根据,GMP,的有关规定，洁净室分为四个等级，即,100,级、,10,，,000,级区、,100,，,000,级和,300,，,000,级，各级别的要求如下：,洁净度,级别,尘粒最大允许数,/,立方米,微生物最大允许数,0.5m,5m,浮游菌,/,立方米,沉降菌,/,皿,100,级,3,500,0,5,1,10,000,级,350,000,2,000,100,3,100,000,级,3,500,000,20,000,500,10,300,000,级,10,500,000,60,000,1,000,15,2025/10/21 周二,89,九、生产环境的空气洁净度监测,浮游菌和沉降菌测试,我国对医药工业洁净室和控制区的浮游菌和沉降菌的测试，国家标准有明确规定。,2025/10/21 周二,90,九、生产环境的空气洁净度监测,沉降菌测试：,通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，计算形成的菌落数。,计算及结果判定：,平均菌落数,=,各培养皿中的菌落总数,/,培养皿的个数,对照洁净级别中每皿沉降菌的最大允许数来判定所测区域的洁净级别是否符合规定。,2025/10/21 周二,91,九、生产环境的空气洁净度监测,尘粒数测定：,尘埃粒子计数器：根据微粒的光散射原理设计而成；能够测出尘埃粒子的个数并能够区分颗粒的大小，从而计量出净化级别。,根据仪器上显示的每立方米空气中的颗粒数对照洁净度级别中每,m,3,的尘粒最大允许数来判定所测区域的洁净级别是否符合规定。,2025/10/21 周二,92,GMP,的信条,:,GMP,照章办事,有据可查,有章可循,2025/10/21 周二,93,问题,1,：,什么导致医疗器械污染？,毛发,润滑油等,微生物,其他医疗器械,清洗液,人的行为,2025/10/21 周二,94,问题,1,：答案,（,1,）毛发,员工有许多途经污染医疗器械，包括头发和,皮屑，因此必须戴口罩和帽子进行操作,严禁裸手操作。,2025/10/21 周二,95,问题,1,：答案,（,2,）润滑油等,设备保养后若没有清洁彻底，其零件或,残余的油就会导致下批医疗器械被污染，设,备的脱落物如铁锈或油漆也会造成医疗器械,的污染。,2025/10/21 周二,96,问题,1,：答案,（,3,）微生物,微生物不允许存在与某些医疗器械中，如注,射剂、滴眼剂。在其他医疗器械中限度允许,存在，如片剂、混悬剂、颗粒剂等,2025/10/21 周二,97,问题,1,：答案,（,4,）其它医疗器械,医疗器械之间能互相污染，交叉污染。,2025/10/21 周二,98,问题,1,：答案,（,5,）清洗液,若不正确使用或使用太多的清洗液，就,会留有残余物质，同样会污染下一批药,品。,2025/10/21 周二,99,问题,1,：答案,（,6,）人的行为,洁净区行为要控制，要缓慢移动，保持,好的身体姿势，轻声谈话，减少交谈频,率等,。,人的行为是维持洁净区平衡不可或缺的,。,2025/10/21 周二,100,问题,2,：,每一次污染都能被发现吗？,能。做一次最终检查。,不能。,2025/10/21 周二,101,问题,2,：答案,不能。,随机取样不可能检测全部产品；,最终检查也可能出错。,2025/10/21 周二,102,问题,3,：,有一批产品被微生物污染，这,能否被发现？,能。提供这批产品的样品也被污染了。,可能。但不确定。,肯定不能。因为这是不可见的污染。,2025/10/21 周二,103,问题,3,：答案,可能。但不确定。,潜在的不可见的污染是可以通过检测到,的，但不能确认污染肯定会被发现。因,为，我们不能肯定在样品中会被检测到,细菌是否存在。,2025/10/21 周二,104,问题,4,：洁净区岗位人员的操作要求？,1.,无菌服应可能覆盖全身，穿戴规范，皮肤暴露部分越少越好。,2.,操作过程中应戴手套和口罩，做好卫生管理。随时把握操作者的健康状况，定期进行健康检查。,3.,车间空调净化系统要保证,10,万级洁净级别。,4.,工作人员在进入车间之前要进行二次更鞋、二次更衣，并进行手消毒。,5.,每个岗位在一天工作结束后或批生产结束后进行清洁，并做好消毒工作。,6.,无菌服、手套、鞋子等要定期清洗和消毒。,2025/10/21 周二,105,谢谢！,2025/10/21 周二,106,