脑脊液检测演稿.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,一脑脊液检查,脑脊液的生理,脑脊液标本的采集,检测项目,脑脊液检查的临床应用,脑脊液生理,脑脊液（,cerebrospinal fluid,，,CSF,）,是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体。成人平均总量约,150ml.,血脑屏障（,blood brain barrier,，,BBB,）,对血浆各种成分通透性各有不同，其中,通透性高的有：,Na,、,Cl,、,Mg,离子及乙醇等,其次为：清蛋白、葡萄糖、,Ca,离子、尿素和肌酐等,最难通过有：,Fbg,、补体、抗体、胆固醇、胆红素等,概念,脑脊液（,cerebrospinal fluid,，,CSF,）,血脑屏障（,blood brain barrier,，,BBB,）,生理,70%,脉络丛,30%,细胞间隙,侧脑室,第三脑室,室间孔,中脑导水管,第四脑室,蛛网膜下腔及脑池,中间孔,两侧孔,超滤作用,主动分泌,蛛网膜绒毛,血管及神经根间隙,吸收,标本采集,CSF,标本一般通过穿刺取得，,部位：腰椎，特殊情况下可由小脑延髓池或侧脑室,压力测试：穿刺成功后先作压力测定，正常在,80,180mmH,2,O,超过,200mmH,2,O,放出,CSF,量应控制在,2ml,内，低于,80mmH,2,O,可作动力试验以了解有无蛛网膜下腔阻塞。,采集：采,CSF,于,3,支无菌试管中，每管,12ml,，采集顺序如下,1,细菌学检查,2,化学学检查,3,理学学检查,如怀疑恶性肿瘤可再留,1,管作细胞学检查,标本采集的注意事项,细胞破坏或,CSF,凝固影响细胞计数和分类,糖分解致,GLU,结果偏低，,细菌自溶或死亡影响细菌检出率,化学检查 肝素抗凝,一般性状检查,EDTA,抗凝,送检及时,抗凝剂选择,CSF,检查项目,显微镜检查,免疫学检查,化学检查,病原学检查,理学检查,CSF,颜色,红色时新旧出血鉴别,黄色：黄变症,透明度,混浊原因,脑脊液中细胞成分增多,脑脊液中细菌、真菌增多,脑脊液中蛋白质增多,几种常见脑脊液,正常脑脊液,清晰透明,化脓性脑膜炎,结核性脑膜,病毒性脑炎、神经梅毒,明显混浊,毛玻璃样轻度混浊,透明外观,凝固性,CSF,的凝固性表现形式,CSF,的凝固性的临床意义,正常,CSF,：静置,1224h,不形成,薄膜、凝块或沉淀。,化脓性：标本静置,12h,可形成凝块或沉淀；,结核性：静置,1224h,标本表面有纤细网膜形成，,黄色胶冻 蛛网膜下腔梗阻，,CSF,循环受阻，蛋白质高达,15g/L,时。,薄膜（,pellicle,）,凝块（,clot,）,沉淀,正常,CSF,标本,化脓性脑膜炎,结核性脑膜炎,黄色胶冻状,不形成,比密测定,正常人腰穿,CSF,比密为：,1.006-1.008,比密增高,:,见于颅内高压,比密降低,:,见于脑脊液分泌增多,显微镜检查,1,、细胞计数,2,、白细胞分类计数,3,、细胞学检查,显微镜检查,1,细胞计数,细胞计数,参考值,1.,红细胞：无。,2.,白细胞：,成人（,010,）,10,6,/L,；,儿童（,015,）,10,6,/L,；,新生儿（,030,）,10,6,/L,。,细胞总数计数,白细胞计数,1,、细胞计数,细胞计数方法,手工显微镜计数,2,白细胞分类计数,方法,:,直接分类和染色分类,参考值,淋巴细胞和单核细胞为主，两者之比约,7,：,3,。,中性粒细胞可见少量,偶见软脑膜和蛛网膜细胞、室管膜细胞、脉络膜细胞。,3,细胞学检查,细胞成分,:,可见免疫活性细胞、单核吞噬细胞、多形核白细胞、肿瘤细胞。,细胞收集方法：离心沉淀、细胞玻片离心仪,染色方法,可用综合应用多种染色鉴别,（吖啶橙荧光染色,-,肿瘤细胞等）,PAS,染色,-,鉴别原淋与腺癌细胞,CSF,细胞计数和分类的临床意义,1,增高常见于,化脓性脑膜炎,结核性脑膜炎,新型隐球菌性脑膜炎,病毒性脑炎,中枢神经系统感染性疾病,蛛网膜下腔出血,中枢神经肿瘤,脑寄生虫病,白细胞数量,细胞分类,化脓性脑膜炎,显著升高,以,N,为主,结核性脑膜炎,中度升高,早期,N,为主,后期以,L,为主，可有浆细胞,病毒性脑膜炎、脑炎,轻度增高,以,L,为主,新型隐球菌性脑膜炎,中度增高,以,L,为主,1.,常见,NS,系统感染性疾病细胞计数与分类特点,细胞数（,1050,）,106/L,为轻度升高，（,50100,）,106/L,为中度增高，,200106/L,以上为显著增高,CSF,细胞计数和分类的临床意义,2,。,均匀血性脑脊液，可见大量红细胞,N,明显增高,出血,23,天后可见吞噬细胞,细胞数正常或稍高，,L,为主，,可见肿瘤细胞。,找到白血病细胞是脑膜白血病证据,细胞数可增高，,可见,E,及浆细胞增高，,沉淀可查出虫卵、原虫、幼虫等,2.,蛛网膜下腔出血,3.,中枢神经肿瘤,4.,脑寄生虫病,（二）化学检查,蛋白质检查,蛋白质定量试验,蛋白质定性试验,葡萄糖测定,氯化物测定,酶学检查,ALT,、,AST,、,CK,、,LD,、,NSE,蛋白定性试验,Pandy test,（,Ross-Jone test,）和,Nonne-Apelt test,蛋白质与苯酚结合成不溶性蛋白盐而产生白色混浊。,球蛋白在饱和硫酸铵溶液中产生白色混浊或沉淀。,参考值,:,阴性或弱阳性,原理：,对球蛋白敏感,灵敏度较差,灵敏度高,方法学评价,:,蛋白质定量试验,磺柳酸,-,硫代硫酸钠比浊,1.,蛋白沉淀剂比浊法,丽春红,S,、考马斯亮蓝,2.,染料结合比色法,参考值（成人）腰池,200,400mg/L,小脑延髓池,100,250mg/L,脑室,50,150mg/L,对灵敏度和精密度较高，对,pH,要求高,简便、快速、无需特殊仪器、标本量大、对球蛋白和白蛋白沉淀能力不同精密度差,方法学评价,:,代表方法,:,蛋白质检查的临床意义,1.,血脑屏障通透性增加：,脑膜炎：化脓性脑膜炎显著增高、结核性脑膜炎中度增高，病毒性脑膜炎轻度增高。,出血、内分泌或代谢性疾病：脑室或蛛网膜下腔出血、糖尿病毒性神经病变、甲状腺功能减退、尿毒症及脱水,药物中毒：如乙醇、酚噻嗪、苯妥因。,蛋白质检查的临床意义,2.,脑脊液循环障碍：,脑部肿瘤或椎管梗阻如蛛网膜下腔粘连。,蛛网膜下腔梗阻时，蛋白质,10g/L,以上，脑脊液呈胶冻状，有蛋白,-,细胞分离现象。,3.,鞘内,Ig,合成增加：,如多发性硬化症，神经梅毒,葡萄糖测定,常用方法,葡萄糖氧化酶法,己糖激酶法，特异性更高；,方法学评价,测定应及时，久时间放置应加适量氟化钠抑制细菌或细胞利用葡萄糖，,理想采血时间应在禁食,4,小时后。,参考值,2.5,4.4mmol/L,临床意义,1.,减低,中枢神经系统细菌性、真菌性感染：化脓性感染时降低最为严重且早期就可明显降低。结核性其次,中枢神经系统肿瘤：脑膜瘤时脑脊液葡萄糖含量明显降低甚至为零。,脑寄生虫病：脑囊虫病、血吸虫、弓形虫病时,2.,升高,血糖升高或下丘脑受损伤,氯化物测定,脑脊液中氯化物含量影响因素,脑脊液自身理化性质、,血浆氯化物含量,血液,PH,值影响。,方法：,滴定法、比色法、电量法、离子选择电极法，后者目前常用。,参考值,120,130mmol/L,氯化物测定的临床意义,减低 见于,细菌性、真菌性脑膜炎：,结核性脑膜炎下降显著，可低于,102mmol/L,。,低氯血症：,呕吐、肾上腺功能减退,增高 见于,尿毒症、呼碱,等,病原,学检查,1,、标本离心取沉淀涂片作,染色,革兰氏染色抗酸染色墨汁染色或苯胺黑染色荧光染色。,涂片镜检：血吸虫卵、肺吸虫卵、阿米巴、弓形虫等,。,2,、细菌培养（血平板、巧克力平板,CO,2,环境培养、中国蓝平板）动物接种、真菌培养,脑脊液检查的临床应用,1.,中枢神经系统感染性疾病的诊断与鉴别,诊断,2.,脑血管病诊断与鉴别诊断,3.,脑肿瘤诊断,4.,中枢神经系统疾病治疗及疗效观察,常见中枢神经感染疾病,CSF,检查特点,二 浆膜腔积液检验,浆膜腔（,serous cavity,）：是人体的胸腔、心包腔、腹腔和关节腔的统称，正常情况下仅含少量液体起润滑作用，,浆膜腔积液：病理情况下浆膜腔内大量液体潴留形成的积液，根据产生原因及其性质不同分为,漏出液（,transudate,）,渗出液（,exudate,）,漏出液,和,渗出液,漏出液,是通过毛细血管滤出、并在组织间隙或浆膜腔内积聚的非炎症性组织液，多为双侧性。,原因有,毛细血管流体静压增高，,血浆胶体渗透压减低，,淋巴回流受阻，,钠水潴留,渗出液,是毛细血管通透性增高，以致液体、血液内大分子物质和细胞从血管渗出至血管外、组织间隙及浆膜腔形成的积液,原因,微生物的毒素,缺氧,炎性介质等,漏出液,渗出液,标本采集与保存,采集：分装,4,管,第,1,管,.,细菌学检查（注意无菌、及时）,第,2,管,.,化学检查,第,3,管,.,一般性状检查（理学）,第,4,管,.,细胞检查,理学和细胞学检查可加,EDTA-K,抗凝，,化学检查可加肝素,穿刺术采集,第,1,管,.,细菌学检查（注意无菌、及时）,第,2,管,.,化学检查,第,3,管,.,一般性状检查（理学）,第,4,管,.,细胞检查,保存,理学和细胞学检查可加,EDTA-K,抗凝，,化学检查可加肝素,检查项目,理学检查,免疫学检查,显微镜检查,化学检查,量,比密,透明度,颜色,粘蛋白定性,蛋白定量,乳酸铁测定,葡萄糖测定,酶学检查,细胞计数,细胞分类,染色体检查,细胞学检查,CEA,AFP,TAP,CA-125,SCCP,细菌学检查,涂片染色,培养,动物接种,理学检查,1,量,正常时量较少，,病理情况下液体较多其程度与病变轻重及部位有关。,2.,比密,渗出液,1.018,漏出液,1.015,一般性状检查,3,颜色,正常为清亮、淡黄色液体。,病理时变化多样，一般渗出液色深些,1,）红色：淡红、鲜红、暗红等,多由穿刺损伤、结核、肿瘤、出血性疾病所致,2,）白色：呈脓性或乳白色，多因白细胞增加、胸导管阻 塞破裂，大量脂肪变性细胞,3,）绿色：铜绿假单胞菌感染,4,）棕色：阿米巴感染,5,）黄色或淡黄：黄疸,6,）黑色：曲霉菌感染,7,）草黄色：尿毒症引起的心包积液,一般性状检查,4.,透明度,与其所含细胞、细菌、蛋白质量有关。,正常浆膜腔液：清晰透明,渗出液 ：不同程度混浊，,乳糜液 ：脂浊,漏出液 ：清晰透明。,5,凝固性,正常 ：无凝块，,漏出液 ：无凝块，,渗出液 ：有凝块，也可因纤溶酶溶解无凝块。,化学检查,1,粘蛋白定性试验（,Rivalta test,）,粘蛋白等,电点在,PH3,5,，在稀酸溶液中产生白色沉淀，漏出液为阴性，渗出液多为阳性,2,蛋白质定量,1,）,方法与血清蛋白定量一致，,漏出液一般小于,25g/L,，,电泳清蛋白相对较高，大分子蛋白相对较少。,渗出液大于,30g/L,，电泳谱与血清蛋白电泳一致。,2,）常以积液蛋白与血清蛋白比大于,0.5,为渗出液的判断指标之一,化学检查,3,葡萄糖定量,漏出液葡萄糖含量较血糖稍低，,渗出液多明显降低,3.33mmol/L,，,4,乳酸铁,(lactate iron),测定,鉴别细菌性和非细菌性感染,升高提示细菌感染。,显微镜检查,1,1.,细胞计数，,RBC,意义不大，,WBC,渗出液,500,10,6,/L,漏出液,100,10,6,/L,，,2.,脱落细胞学检查,HE,染色、组化等,3.,寄生虫及虫卵：离心镜检,4.,染色体检查,:,数量和形态异常,显微镜检查,2,细菌学检查,1,涂片染色,革兰氏染色,抗酸染色,2,培养,细菌培养,真菌培养,厌氧培养,3,动物接种,临床应用,1.,渗出液与漏出液鉴别,2.,寻找病因,3.,结核与恶性积液鉴别、良性与恶性积液鉴别,结核性与恶性胸腔积液鉴别表,良性与恶性腹腔积液鉴别表,漏出液与渗出液鉴别表,谢谢,!,