药物的鉴别试验专家讲座.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,第二章 药品判别试验,药分教研室,1,药物的鉴别试验专家讲座,第1页,一、,概述,药品判别试验,（,identification test,),是依据药品分子结构、理化性质,采取化学、物理,化学或生物学方法来,证实已知药品真伪,。,而,不是,对未知物进行定性分析。,是药检工作,首要任务,，杂质检验、含量测定,前提,。,2,药物的鉴别试验专家讲座,第2页,二、判别试验项目,性状,普通判别试验,专属判别试验,3,药物的鉴别试验专家讲座,第3页,性状,外观：感观要求，普通性描述。,溶解度：反应了在某种溶剂中溶解性能。,物理常数:评价药品质量主要指标，,反应药品纯净程度。,熔点、,比旋度、吸收系数,、凝点、折光率,相对密度、馏程、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值等,4,药物的鉴别试验专家讲座,第4页,外观：,指药品外表感观和色泽，,包含聚集状态、晶型、色泽以及臭、味,如：,维生素B,1,“本品为白色 结晶或结晶粉末；,有微弱特臭，味苦；,干燥品在空气中迅即吸收约4%水分”,（色泽）,（聚集状态）,（臭）,（味）,5,药物的鉴别试验专家讲座,第5页,溶解度,试验法：,供试品准确称取研成细粉,在,252,，加溶剂,每隔,5min,振摇,30s,无目视可见,溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解,极易溶解 系指溶质1g(ml)能在溶剂不到1ml中溶解；,易溶 系指溶质1g(ml)能在溶剂1不到10ml中溶解；,溶解 系指溶质1g(ml)能在溶剂10不到30ml中溶解；,略溶 系指溶质1g(ml)能在溶剂30不到100ml中溶解；,微溶 系指溶质1g(ml)能在溶剂100不到1000ml中溶解;,极微溶解 系指溶质1g(ml)能在溶剂1000不到10000ml中溶解；,几乎不溶或不溶系指溶质1g(ml)在溶剂10000ml中不能完全溶解。,6,药物的鉴别试验专家讲座,第6页,物理常数,1、熔点,1）定义：Ch.P 要求,熔点系指一个物质由固体熔化成,液体温度、熔融同时分解温度，或在熔化时自初熔至全,熔一段温度。,如：,雌二醇：,175,180,醋酸地塞米松,：,223 233,样品,发毛,收缩,液滴,（初熔）,澄清,（全熔）,7,药物的鉴别试验专家讲座,第7页,2）测定方法,分三法：,第一法：测定易粉碎固体药品,第二法：测定不易粉碎固体药品,第三法：测定凡士林或其它类似物质,（详见：Ch.P 年版二部 附录 C,）,8,药物的鉴别试验专家讲座,第8页,2、比旋度,偏振光透过长1dm并每1ml中含有旋光性物质1g溶液，,在一定波长与温度下测得旋光度称为,比旋度,。,本药典系用钠光谱D线(589.3nm)测定旋光度，,除另有要求外，测定管长度为1dm，测定温度为20。,偏振光向右旋转者（顺时针方向）为,右旋,，以“,”符号表示；,使偏振光向左旋转者(反时针方向)为,左旋,，以“,”符号表示,Ch.P 年版二部 附录 E,9,药物的鉴别试验专家讲座,第9页,3、吸收系数,吸光物质在给定波长、溶剂和温度等条件下，单位浓度、单位液层厚度时吸收度,溶液浓度,液层厚度,溶液浓度,液层厚度,摩尔吸收系数,(,),百分吸收系数,10,药物的鉴别试验专家讲座,第10页,含有相同结构化合物可能有相同,max,，,但吸收系数有差异,11,药物的鉴别试验专家讲座,第11页,普通判别试验 （,general identification test,）,是指依据,某一类,药品共同化学结构或,相同理化特征，来判别药品真伪。,有机药品-官能团,无机药品-阴离子、阳离子,普通判别试验用于证实药品是哪一类，,要深入证实是哪一个药品，还需要结合专属判别试验,12,药物的鉴别试验专家讲座,第12页,普通判别试验 （,general identification test,）,Ch.P附录,中有：,有机氟类、有机酸盐类（水杨酸盐）、芳香第一胺类、托烷生物碱类、丙二酰脲类,无机金属类（Na,+,K,+,Ca,2+,Ba,2+,Li,+,Fe,3+,Al,3+,Zn,2+,Cu,2+,Ag,+,Hg,2+,等）,无酸盐类 (Cl,-,、,SO,4,2-,、NO,3,-,),13,药物的鉴别试验专家讲座,第13页,1.有机氟化物,有机氟,氧瓶燃烧,无机氟离子,pH4.3,茜素氟蓝,硝酸亚铈,蓝紫色,络合物,+F,-,+Ce,3+,pH4.3,碱液吸收,14,药物的鉴别试验专家讲座,第14页,2.,有机酸盐,(1),水杨酸盐,水杨酸+,FeCl,3,中性条件,弱酸性条件,红色配位化合物,紫色配位化合物,6 +4,FeCl,3,+12,HCl,水杨酸盐+稀盐酸水杨酸（白色沉淀）,溶于醋酸铵,15,药物的鉴别试验专家讲座,第15页,(2)酒石酸盐,供试品溶液（中性）+氨制硝酸银,银镜,水浴中,HOCHCOOH,HOCHCOOH,+2Ag(NH,3,),2,OH,HOCCOONH,4,HOCCOONH,4,2Ag,+,+2NH,3,+2H,2,O,水浴中,16,药物的鉴别试验专家讲座,第16页,3.芳香第一胺类,供试品,+,稀盐酸,0.1mol/L,亚硝酸钠,碱性,-萘酚试液,橙黄色,到,猩红色沉淀,N,2,+,Cl,-,.,+NaNO,2,+2HCl,+NaCl+2H,2,O,N,2,+,Cl,-,.,+,+NaOH,+NaCl+2H,2,O,17,药物的鉴别试验专家讲座,第17页,4.托烷生物碱类,这类生物碱中含有莨菪酸结构，,有,Vitali,反应,显紫色,。,水解,3HNO,3,三硝基衍生物,KOH,(C,2,H,5,OH),KOH,深紫色,莨菪酸,18,药物的鉴别试验专家讲座,第18页,5.无机金属盐,（Na,K,Ca,NH,4,+,),焰色反应：,Na,显鲜黄色,；,K,显紫色,；,Ca,显砖红色,铵盐：,供试品,+NaOH,氨气,使湿润,红色,石蕊试纸变,蓝,使硝酸亚汞试液湿润滤纸显,黑色,19,药物的鉴别试验专家讲座,第19页,6.无机酸根,氯化物：,Cl,-,+Ag,+,AgCl 白色乳状,Cl,-,+MnO,2,Mn,2+,+Cl,2,硫酸盐：,SO,4,2-,+Ba,2+,BaSO,4,白色,SO,4,2-,+Pb,2+,PbSO,4,白色,加盐酸，无白色沉淀,硝酸盐：,Cu +NO,3,-,Cu(NO,3,),2,+2NO,2,（,红棕色,）,Fe,2+,+NO,3,-,Fe,3+,+NO,区分 NO,3,-,、NO,2,-,H,2,SO,4,使湿润,KI,_,淀粉试纸,变蓝,KMnO4,褪色,NO,2,-,不褪色,NO,3,-,H,2,SO,4,H,2,SO,4,20,药物的鉴别试验专家讲座,第20页,专属判别试验 （,specific identification test,）,是证实,某一个,药品依据。,依据一类药品中,每一个,药品化学结构差异理化特征，选取一些特有灵敏定性反应，来判别药品真伪。,普通判别试验依据某类药品共同特点，区分不一样类药品。,专属判别试验在普通判别试验基础上，利用各种药品化学结构差异，判别各个药品单体。,21,药物的鉴别试验专家讲座,第21页,共性,丙二酰脲,-CONHCONHCO-,可与一些金属离子（Ag,+,、Cu,2+,、Hg,2+,等）反应呈色或产生沉淀,巴比妥类药品,R,+2AgNO,3,+2HNO,3,普通判别试验,22,药物的鉴别试验专家讲座,第22页,与Pb,2+,反应生成黑色PbS,甲醛硫酸反应,碘取代反应,专属判别试验,硫喷妥钠,司可巴比妥,苯巴比妥,23,药物的鉴别试验专家讲座,第23页,二、判别方法,（一）化学判别法,（二）光谱判别法,（三）X射线衍射法,（四）色谱判别法,（五）生物法,24,药物的鉴别试验专家讲座,第24页,（一）化学判别法,供试品加入适当试剂，在一定条件下，发生化学反应，经过产生可观察到显著现象，来判别药品真伪方法。,化学判别法特点,操作简便、反应快速、试验成本低、应用广 但专属性比仪器分析法差,分为：,（1）呈色反应判别法（2）沉淀生成反应判别法（3）荧光反应判别法（4）气体生成反应判别法（5）试剂褪色判别法,25,药物的鉴别试验专家讲座,第25页,（一）、化学判别法,（1）呈色反应判别法,供试品加入适当试剂，在一定条件下，反应生成有色产物,判别方法,三氯化铁呈色反应（酚羟基）,有机氟化物茜素氟蓝法,芳香第一胺类重氮化-偶合反应,托烷生物碱类-Vitali反应,肾上腺皮质激素类四氮唑,含羰基结构苯肼反应,氨基酸及氨基糖苷类茚三酮呈色反应,双缩脲反应,26,药物的鉴别试验专家讲座,第26页,芳香第一胺类,芳伯胺,+,稀盐酸,0.1mol/L,亚硝酸钠,碱性,-萘酚试液,橙黄色,到,猩红色,重氮化-偶合反应,对乙酰氨基酚,红色,27,药物的鉴别试验专家讲座,第27页,三氯化铁呈色反应（酚羟基）,蓝紫色,对乙酰氨基酚,（一）化学判别法,（1）呈色反应判别法,有机氟化物,氧瓶燃烧,无机氟离子,pH4.3,茜素氟蓝,硝酸亚铈,碱液吸收,蓝紫色,络合物,有机氟,28,药物的鉴别试验专家讲座,第28页,托烷生物碱类-Vitali反应,这类生物碱中含有莨菪酸结构，,有,Vitali,反应,显紫色,。,水解,3HNO,3,三硝基衍生物,KOH,(C,2,H,5,OH),KOH,深紫色,29,药物的鉴别试验专家讲座,第29页,肾上腺皮质激素类四氮唑,+2e,H,四氮唑,甲臜,皮质激素含有还原性，能将四氮唑还原为有色,甲臜,30,药物的鉴别试验专家讲座,第30页,含羰基结构苯肼反应,+,+H,2,O,苯肼,苯腙,31,药物的鉴别试验专家讲座,第31页,氨基酸及氨基糖苷类茚三酮呈色反应,左旋多巴,+CO,2,+3H,2,O,+,比如：,32,药物的鉴别试验专家讲座,第32页,双缩脲反应,（开环分解）,蓝紫色,33,药物的鉴别试验专家讲座,第33页,（2）沉淀生成反应判别法,供试品加入适当试剂，在一定条件下，反应生成沉淀,（一）化学判别法,还原性基团银镜反应,丙二酰脲类硝酸银反应,氯化物银盐沉淀,含氮杂环类与生物碱沉淀剂（碘化铋钾、硅钨酸）沉淀反应,苯甲酸盐类三氯化铁反应,生成氧化亚铜红色沉淀反应,与重金属离子沉淀反应,磺胺类药品铜盐反应,34,药物的鉴别试验专家讲座,第34页,丙二酰脲类硝酸银反应,+,2AgNO,3,+2HNO,3,Cl,-,+Ag,+,AgCl,氯化物银盐沉淀,35,药物的鉴别试验专家讲座,第35页,含有还原性基团药品银镜反应,+AgNO,3,+NH,3,H,2,O,Ag,异烟肼,葡萄糖,+,碱性酒石酸铜试液,（Fehling试液）,氧化亚铜,+葡萄糖酸,36,药物的鉴别试验专家讲座,第36页,苯甲酸盐类三氯化铁反应,+3FeCl,3,+OH,-,+7NaCl+2Cl,-,赭色沉淀,37,药物的鉴别试验专家讲座,第37页,利多卡因与重金属离子反应,2,+CoCl,2,H,+,亮绿色细小钴盐沉淀,38,药物的鉴别试验专家讲座,第38页,含氮杂环类生物碱沉淀反应,苯并二氮杂 类,+BiI,3,橙红色沉淀,氯氮,氟西泮,氯硝西泮,+12W0,3,Si0,2,灰白色沉淀,4KI,C,2,H,5,OH,白色,C,2,H,5,OH,黄色,阿托品+HgCl,2,东莨菪碱+HgCl,2,托烷类生物碱,39,药物的鉴别试验专家讲座,第39页,吡啶环类,2,+CuSO,4,+2NH,4,SCN,Cu(SCN),2,+(NH,4,),2,SO,4,草绿色配合物沉淀,40,药物的鉴别试验专家讲座,第40页,磺胺类药品,成铜盐反应,磺酰氨基上活泼氢原子，可被一些金属离子取代，生成有色金属盐沉淀。磺胺类药品钠盐溶液，加硫酸铜试液生成不一样颜色铜盐沉淀，可供区分及判别。,41,药物的鉴别试验专家讲座,第41页,(3)荧光反应判别法,药品本身在可见光下发射荧光,如：硫酸奎宁溶液显蓝色荧光,药品与适当试剂反应后发射荧光,如：氯普噻吨+HNO,3,后，紫外下显绿色,VB,1,硫色素（蓝色荧光）,碱性,K,3,Fe(CN),6,（一）化学判别法,42,药物的鉴别试验专家讲座,第42页,（4）气体生成反应判别法,大多数伯胺（铵）类药品、酰尿类以及一些酰胺类药品，可经强碱处理后加热产生氨气。红色石蕊试纸变蓝硝酸亚汞试液湿润试纸显黑色,（一）化学判别法,43,药物的鉴别试验专家讲座,第43页,化学结构含硫药品，可经强酸处理后加热产生硫化氢气体,硫鸟嘌呤,7H,2,O,强酸,H,2,S,（臭鸡蛋气味）,使醋酸铅试纸变黑,44,药物的鉴别试验专家讲座,第44页,含碘有机药品经直火加热可生成紫色碘蒸汽,含醋酸酯和乙酰胺类药品，经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯香味。,45,药物的鉴别试验专家讲座,第45页,（一）化学判别法,（5）试剂退色,维生素C与二氯靛酚反应,46,药物的鉴别试验专家讲座,第46页,（6）测定生成物熔点法,制备衍生物测定熔点法,药品试剂 新化合物有一定mp;,药品酸化或碱化生成游离酸或碱。,操作繁琐费时间，应用较少。,（一）化学判别法,47,药物的鉴别试验专家讲座,第47页,紫外光谱,（UV）,红外光谱,（IR）,近红外光谱法,（NIRS）,原子吸收法,（AAS）,核磁共振法,（NMR）,二、判别方法,（二）光谱判别法,48,药物的鉴别试验专家讲座,第48页,1、紫外光谱判别法,紫外光谱法操作简便、快速。用作判别专属性远不如红外光谱法。紫外光谱相同物质不一定是同一个物质,。,（二）光谱判别法,49,药物的鉴别试验专家讲座,第49页,紫外光谱法常有方法,测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长；,要求浓度供试液在最大吸收波长测定吸收度；,要求吸收波长和吸收系数法；,要求吸收波长和吸光度比值法；,经化学处理后,测定其反应产物吸收光谱特征,以上方法可单用，也可几个结合起来使用，以提升专属性,50,药物的鉴别试验专家讲座,第50页,测定最大吸收波长,或同时测定最小吸收波长,乙胺嘧啶,供试品在0.1mol/L盐酸介质,中紫外吸收在272nm处为峰,216nm处为谷。,51,药物的鉴别试验专家讲座,第51页,要求吸收波长和吸光度比值法,两性霉素在,362nm、381nm、405nm,波优点有最大吸收.,要求,362nm,/,381nm,处吸光度比值小于,0.6,381nm,/,405nm,波长比值小于,0.9,VB,12,361nm/278nm 1.701.88,361nm/550nm 3.15 3.45,52,药物的鉴别试验专家讲座,第52页,己稀雌酚注射液用供试品溶液250-450nm波长吸收光谱与对照品是否一致判别。,与对照品比较,对比吸收光谱一致性,53,药物的鉴别试验专家讲座,第53页,Ch.P,示例一 盐酸布比卡因判别试验,0.40mg/ml,max,:,263nm,、,271nm,A:0.530.58;0.430.48,要求一定浓度供试液在最大吸收波优点吸光度,示例二 地蒽酚,判别试验,max,:,257nm,、,289nm、356nm,A,257,/A,289,=1.061.10,A,356,/A,289,=0.900.94,要求最大吸收波长和吸光度比值法,54,药物的鉴别试验专家讲座,第54页,示例三 氯贝丁酯判别试验,0.10mg/ml,max,:280nm、288nm,10,g/ml,max,:226nm,要求一定浓度下供试液最大吸收波长,示例二 专属性相对很好,55,药物的鉴别试验专家讲座,第55页,USP 采取对照品法,供试药与其对照品按同一方法处理，在一样条件下紫外光谱图一致,。,BP 要求一定波长范围内，仅有一个最大或,最小吸收,JP 与Ch.P相同,各国紫外判别法比较,56,药物的鉴别试验专家讲座,第56页,2、红外分析法,IR光谱法,是有机药品分子振动-转动光谱，能,反应药品分子 结构,特点，分子中每个基团普通都由对应吸收峰，且特征性强，（除光学异构体及长链烷烃同系物外）几乎没有两种化合物含有完 全相同红外吸收光谱，即红外吸收光谱含有“指纹性”,，,被广泛地应用于化合物判别。,特点 专属性强、准确度高特点，应用广（固、液、气）,主要用于组分单一、结构明确原料药以及结构相近同类物质。,（二）光谱判别法,57,药物的鉴别试验专家讲座,第57页,2、红外分析法 标准图谱法：,Ch.P要求按指定条件绘制供试品红外光吸收图谱，与药品红外光谱集中对应标准图谱对比，假如峰位、峰形、相对强度都一致时，即为同一个药品。,对照品法：,将供试品与对照品在一样条件下绘制红外图谱，彼此对比是否一致方法。可消除不一样仪器和操作条件造成误差。,58,药物的鉴别试验专家讲座,第58页,试样制备方法,压片法,供试品（约1mg)+干燥KBr/KCl(约200mg),研磨均匀 （玛瑙研钵）,置压膜中,真空,加压至0.8-1GPa,2-3min,均匀透明片,无显著颗粒,供试片,同法制空白,KBr/KCl片，做空白校正，扣除背景干扰,59,药物的鉴别试验专家讲座,第59页,糊法,供试品（约5mg）,滴加少许液体石蜡或其它液体,制成糊状物,玛瑙研钵,取适量,夹于两个KBr片,（150mg/片）,之间,供试片,KBr（约300mg）制成空白片，作背景校正,60,药物的鉴别试验专家讲座,第60页,膜法,供试品多为高分子聚合物，可做成液膜铺展于适宜盐片上。,溶液法,液体供试品（或溶于适宜溶剂内），,制成1%-10%溶液，置于0.1-0.5mm厚液体池中，即可测得。,61,药物的鉴别试验专家讲座,第61页,应用光谱图比对时应注意问题,1）固体药品应按要求方法进行预处理,2）盐酸盐类药品制片时普通使用KCl做基质,3）注意仪器本身影响,可与标准聚苯乙烯薄膜比对，校正,4）不适用多组分、多晶形药品,5）以新版药品红外光谱集为准,6）制剂判别，应消除辅料干扰，提取分离后再制片,7）Ch.P 4000-400cm,-1,BP -400cm,-1,62,药物的鉴别试验专家讲座,第62页,各国红外光谱法比较,Ch.P 采取标准图谱对照法,BP 采取标准图谱对照法、对照品法,USP 采取对照品法,JP 要求条件下测定一定波优点特征吸收峰。,63,药物的鉴别试验专家讲座,第63页,（二）光谱判别法,3、近红外光谱法,近红外谱区:12800-4000cm,-1,750-2500nm,经过测定被测物在近红外区特征光谱，进行定性、定量分析一个分析技术。,特点,1、取得信息多:密度、粒子尺寸、直径、大分子聚合度等,2、样品无需预处理，可直接装入样品池测定,3、分析速度要快 扫描：5次/s，普通扫描50次,分析一次2-3min,4、灵敏度高，应用范围广,64,药物的鉴别试验专家讲座,第64页,近红外分析普通程序,（1）参考库建立,统计一定数量批次物质谱图（不一样生产企业、物,理形态、粒度差异）信息。,（2）数据预处理,对各谱图进行数学处理，建立分析模型,（3）数据评定,将待测物谱图与谱库中单一或平均参考谱图,比较。,（4）数据库验证,专属性、耐用性验证,65,药物的鉴别试验专家讲座,第65页,板蓝根注射液和川芎注射液近红外图谱,三个产地异穗卷柏近红外谱图,66,药物的鉴别试验专家讲座,第66页,4、,原子吸收法,利用原子蒸气能够吸收由该元素作为阴极空心阴极灯发出特征谱线特征，依据供试溶液在特征谱线处最大吸收和特征谱线强度减弱程度进行定量、定性分析。,主要用于元素分析,5、,核磁共振,经过测定供试品指定基团上质子峰化学位移,和偶合常数进行判别。,（二）光谱判别法,67,药物的鉴别试验专家讲座,第67页,（三）X射线粉末衍射法,X射线波长0.01-1nm电磁波,利用晶体对X射线衍射效应来进行定性、定量分析方法。,用于结晶物质判别，供试品与参考品X衍射图比较,衍射角,面间距,d,相对强度,68,药物的鉴别试验专家讲座,第68页,（三）X射线粉末衍射法,影响原因：,药品本身特征,入射X射线波长及强度,供试品结晶度、密度、体积,室验温度,研磨压力等,69,药物的鉴别试验专家讲座,第69页,（四）色谱判别法,利用不一样物质在不一样色谱条件下，产生各自特征色谱行为（保留时间，比移值）进行判别试验。,常采取对比法,与对照品、已知药品，在相同条件下进行色谱分离,并比较。,TLC,HPLC,GC,70,药物的鉴别试验专家讲座,第70页,（四）色谱判别法,1、薄层色谱判别法(TLC),薄层色谱法含有专属性强、操作简便、试验成本低等优点。,在判别试验中，薄层色谱法是色谱法中应用最广一个方法。Ch.p（）一部，1523项,经过R,f,值，斑点颜色进行定性。,71,药物的鉴别试验专家讲座,第71页,72,药物的鉴别试验专家讲座,第72页,（四）色谱判别法,2、HPLC、GC色谱分析法,供试品和对照色谱峰保留时间一致。,在判别试验中，通常含量测定同时用于判别一个方法。,73,药物的鉴别试验专家讲座,第73页,（四）色谱判别法,3、,质谱判别法,在高真空状态下将被测物离子化，按离子质荷比大小分离，经过离子谱峰强度及相互关系，提供分子结构相关信息，从而进行定性分析。,离子准确质量数,化合物分子式,碎片离子,化合物结构,74,药物的鉴别试验专家讲座,第74页,色谱谱判别法小结,适合用于复杂环境下药品有效成份及杂质判别,含有分离、分析同时进行特点.,高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法,(GC),供试品和对照品色谱峰保留时间一致.,薄层扫描法(TLC),对照品比较法，供试品斑点与对照品R,f,值及斑点颜色应一致.,色谱法（HPLC GC TLC),75,药物的鉴别试验专家讲座,第75页,（五）生物学法,是利用微生物或试验动物判别法,胰岛素生物检定法,肝素生物检定法,76,药物的鉴别试验专家讲座,第76页,药品判别方法新动向,1、仪器方法用于药品判别数量大大增加，,USP、BP 仪器判别法：化学判别法（2:1）,BP：主要用TLC,USP：HPLC,2、制剂广泛采取IR法判别,77,药物的鉴别试验专家讲座,第77页,例1.维生素C判别,（1）药典中要求：,维生素C比旋度应为,+20.5,+21.5,(2)在维生素C分子中含有烯二醇结构，,这个结构含有很强还原性，能够和一些氧化剂作用。,样品（0.2g）,10ml,水,5ml,黑色Ag,AgNO,3,（3）红外光谱与对照图谱一致。,二、判别方法,78,药物的鉴别试验专家讲座,第78页,三、判别试验条件,（一）溶液浓度,溶液浓度,主要指被判别物质浓度，其大小影响结果判断。,（如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中,max,A,E,1%,1cm,),（二）溶液温度,温度,过高,可使产物分解，造成颜色变浅，沉淀溶解，甚至观察,不到结果，故试验中应注意温度控制。,79,药物的鉴别试验专家讲座,第79页,（三）溶液酸碱度,许多判别反应都需要在一定酸碱度条件下进行，溶液酸碱度能够使各反应物有足够浓度处于活化状态、使反应产物处于稳定和易于观察状态。,（四）试验时间,有机化合物化学反应较慢，需要一定反应时间和条件。,（五）干扰成份存在,药品制剂判别，其它成份则会干扰检验结果现象观察，必须选择专属性更高判别方法或将干扰成份分离后判别。,80,药物的鉴别试验专家讲座,第80页,复方吡拉西坦片剂中维生素B,2,判别方法建立,复方吡拉西坦片剂,吡拉西坦,脑蛋白水解物,VB,2,VE,VB,1,VB,6,谷氨酸,辅料,取10片,加50ml水,滤过,滤液,脑蛋白水解物,VB,2,VB,6,VB,1,淡黄绿色,荧光,分三份,稀H,2,SO,4,NaOH溶液,连二亚硫酸钠,试样现象,VB,2,对照品现象,蓝色荧光,荧光消失,荧光消失,荧光消失,荧光消失黄色褪去,荧光消失,81,药物的鉴别试验专家讲座,第81页,分析原因，排除干扰,对复方中各组分逐一比较,脑蛋白水解物水溶液呈蓝色,82,药物的鉴别试验专家讲座,第82页,（一）判别方法选择标准：,方法要有一定,专属性、灵敏性，便于推广,。,采取一组试验项目全方面评价一个药品，应现有,母核反应,，又有,官能团反应,，既包含,化学方法,，又包含,仪器方法,，每种药品普通选取,2-4种,方法进行判别试验，相互取长补短，力争使结论正确无误。,尽可能采取药典中收载方法。,判别试验要求,83,药物的鉴别试验专家讲座,第83页,（二）提升反应灵敏度方法,加萃取液提取浓集有色生成物，易于观察。,改进观察方法,目视观察溶液颜色 分光光度计,观察生成沉淀 比浊法,84,药物的鉴别试验专家讲座,第84页,小结,药品判别试验,（,identification test,),是依据药品分子结构、理化性质,采取化学、物理,化学或生物学方法来,证实已知药品真伪,。,而,不是,对未知物进行定性分析。,是药检工作,首要任务,，杂质检验、含量测定,前提,。,85,药物的鉴别试验专家讲座,第85页,小 结,普通判别试验,依据,某一类,药品化学结构或理化特征，经过化学反应来判别药品真伪。,有机氟化物类、有机酸盐（水杨酸、酒石酸盐）,芳香伯胺类、托烷生物碱类、无机金属盐、无机酸根,性状：,外观、溶解度、物理常数,专属判别试验,在普通判别试验基础上，,区分同类药品各个单体,判别试验项目,86,药物的鉴别试验专家讲座,第86页,小 结,化学判别法,仪器判别法,判别试验方法,呈色反应,沉淀生成反应,荧光反应,气体生成反应,光谱法（,UV、IR、NIRS、AAS、NMR,）,色谱法（,TLC、HPLC、GC,）,X射线粉末衍射、MS,87,药物的鉴别试验专家讲座,第87页,小 结,溶液浓度,溶液温度,溶液酸碱度,试验时间,干扰成份,判别试验条件,88,药物的鉴别试验专家讲座,第88页,