DB3301∕T 1082-2018 堇叶紫金牛组赔繁育技术规程(杭州市).pdf
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1、ICS 65.020.20B 05DB3301浙江省杭州市地方标准DB 3301/T 10822018堇叶紫金牛组培繁育技术规程2018 - 06 - 20 发布2018 - 07 - 20 实施杭州市质量技术监督局发 布DB3301/T 10822018I前言本标准按照GB/T 1.12009标准化工作导则 第1部分:标准的结构和编写给出的规定起草。本标准由杭州市林业水利局提出并归口 。本标准主要起草单位:杭州市园林绿化股份有限公司、杭州市林木种苗管理中心。本标准主要起草人:杨浩、孙英坤、胡亚芬、高凯、陈林敬、魏建芬、樊靖、姚涛、邱影、崔晓燕、王霁、李红霞。DB3301/T 10822018
2、1堇叶紫金牛组培繁育技术规程1范围本标准规定了堇叶紫金牛(Ardisia violacea)组培快繁过程中的外植体制备、组织培养、炼苗、上盆、容器苗管理、苗木出圃、档案管理等内容。本标准适用于杭州市范围内堇叶紫金牛的组培繁育。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。NY/T 23062013花卉种苗组培快繁技术规程DB33/T 179林业育苗技术规程3母株选择选择长势旺盛、叶背暗紫色、叶脉清晰、无病虫害的植株作为组培繁殖母株,置于温室内培养。4外植体制备4.
3、1外植体采集选择健壮选择健壮、无病虫害、带休眠腋芽的新发茎段为外植体材料。外植体采集后宜当日进行消毒处理,或保存于4冰箱,保存时间不宜超过2d。4.2外植体消毒4.2.1表面消毒沿叶柄基部切除外植体材料的叶片, 用小毛刷蘸取少量洗洁精轻轻刷洗茎段表面, 反复刷洗叶腋附近,用自来水冲洗干净;将外植体茎段切段,用0.1%的苯扎溴铵于磁力搅拌器上进行消毒处理,转速不宜超过200转/min;处理时间与茎段幼嫩程度选择5min12min;倒掉消毒液,在流水下冲洗30min60min。4.2.2深度消毒将表面消毒后的外植体材料置于无菌操作台上, 用无菌水冲洗外植体茎段1次; 使用75%乙醇溶液摇晃消毒处理
4、,处理时间根据茎段幼嫩程度选择15s90s;倒掉乙醇溶液,用1%次氯酸钠溶液摇晃消毒处理,处理时间与茎段幼嫩程度成反比,宜选择3s10min;倒掉消毒液,用无菌水反复冲洗45次,每次5min。DB3301/T 1082201825组培扩繁5.1培养基制备5.1.1培养基制备方法参照NY/T 23062013 花卉种苗组培快繁技术规程。5.1.2培养基配方参照附录A。5.2初代培养5.2.1将外植体茎段切成长度约 2cm 的小段,并带有 1 个休眠腋芽。5.2.2用无菌刀片切除小段下端(芽向上)褐化部分,迅速接种到初代培养基上。5.2.3培养条件:温度 252、光照时间 10h/d、光照强度 1
5、500Lx2000Lx,相对湿度 60%65%。5.3增殖培养5.3.1将新发的侧芽嫩茎切下,接种到增殖培养基上。5.3.2培养条件:温度 252,光照时间 12h/d,光照强度 2000Lx2500Lx,相对湿度为 60%65%。5.3.3培养约 40d 后分化产生大量侧芽和不定芽丛。5.4壮苗培养5.4.1将不定芽丛轻轻拨散成单个不定芽,将伸长的侧芽嫩茎切下,接种到壮苗培养基。5.4.2培养条件为温度 252、光照时间 12h/d、光照强度 2000Lx2500Lx、相对湿度 60%65%。5.4.3壮苗培养约 20d 后,再生小苗达到叶片数量 6 枚以上、高度 5cm 以上、茎粗 2mm
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